Спосіб моделювання сальмонельозного менінгіту

Спосіб моделювання сальмонельозного менінгіту, що включає внутрішньочеревне введення суспензії 24-годинноі культури госпітального штаму Salmonella typhimunum, який відрізняється тим, що перед інфікуванням ПІДДОСЛІДНИХ тварин збудником сальмонельозу в дозі LDso 5-Ю6 мік/пл/мл, проводять сенсибілізацію їх організму кінською сироваткою в дозі 0,1 мл протягом 3-х діб, з подальшим морфологічним та бактеріологічним дослідженням тканини мозку Винахід належить до медицини, до розділу патологічної анатомії і може застосовуватись при експериментальних дослідженнях, для вивчення патоморфозу інфекційних захворювань, зокрема сальмонельозу Сальмонельозом хворіють як дорослі, так і діти, але найбільшу небезпеку він складає для дітей першого року життя, особливо перших МІСЯЦІВ У переважної КІЛЬКОСТІ дітей ця інфекція перебігає у вигляді гастроштестинальних форм, але останнім часом важкий перебіг захворювання та високий відсоток летальних випадків обумовлений розвитком генералізованих форм сальмонельозу з виникненням гнійних осередків інфекції, таких як пневмонії та менінгоенцефаліту З'ясування питань патогенезу захворювання можливе завдяки створенню моделі сальмонельозної інфекції в експерименті У літературі представлені експериментальні роботи по вивченню сальмонельозної інфекції у лабораторних тварин Ці роботи дають змогу з'ясувати механізми розвитку сальмонельозної інфекції та виявити зміни, які відбуваються в мішеневих органах тонкій та товстій кишках, печінці та селезінці Але робіт по створенню моделі сальмонельозного менінгіту ми не знайшли Відомий спосіб моделювання сальмонельозної інфекції (А И Смолягин, И Н Чайникова, Н Н Шевлюк // Микробиология, эпидемиология и иммунология биология - 1996 - № 2 - С 85-87), згідно якого зараження тварин здійснювали ентерально і внутрішньочеревно Тваринам вводили змив з добового агара культури Salmonella typhimunum 178 госпітального штама в дозі 2 млн на мишу Проводили бактеріологічне дослідження крові, селезінки, печінки, а також вивчали вилочкову залозу Однак при проведенні даного експерименту не підлягав дослідженню мозок, не були створені умови для підвищення проникності гематоенцефалічного бар'єру В основу винаходу "Спосіб моделювання сальмонельозного менінгіту" поставлене завдання з'ясувати питання п ато морфогенезу розвитку менінгіту та менінгоенцефаліту при сальмонельозній інфекції Поставлене завдання досягається способом моделювання сальмонельозного менінгіту, що включає внутрішньочеревне введення суспензії 24 годинної культури госпітального штаму Salmonella typhimunum, який відрізняється тим, що перед інфікуванням ПІДДОСЛІДНИХ тварин збудником сальмонельозу в дозі LDso 5-Ю6 мікліл/мл, проводять сенсибілізацію їх організму кінською сироваткою в дозі 0,1 мл протягом 3-х діб, з подальшим морфологічним та бактеріологічним дослідженням тканини мозку Спосіб здійснюється слідуючим чином Білих неімбредних мишей з масою тіла 14-15 г протягом 3-х днів сенсибілізують кінською сироваткою в дозі 0,1 мл Після ЦЬОГО тваринам вводять внутрішньочеревно суспензію 24-годинноі культури госпітального штаму Salmonella typhimunum, розведеною ІЗОТОНІЧНИМ розчином натрію хлориду, який містить 25% агар Сальмонели вводили в дозі LD50 5-106 мік/пл/мл в КІЛЬКОСТІ 0,5 мл на тварину Після інфікування через певні проміжки часу (ЗО хв, 1 год, 3 год, 24 год, 3 доби, 5 та 10 діб) мишей виводять з експерименту в умовах нембуталового наркозу Потім в стерильних умовах виймають мозок Досліджуваний орган зважують, роз ГО 42493 тирають в ступці в 10 мл стерильного бульйону (1:10). 3 органу отримують головне розведення. З отриманого розведення роблять ряд десятикратних розведень. Через добу після культивування в термостаті при t°+37°C з пробірок, де реєструється ріст збудників, роблять посів на чашку Петрі та ідентифікують культури. Таким чином визначається бактеріальний індекс досліджуваного органу. Під час експерименту проводять як морфологічне, так і бактеріологічне дослідження мозку та м'яких мозкових оболонок. Приклад Робота виконана на ЗО неімбредних мишах з початковою масою тіла до 14-15 г. Для індукування моделі сальмонельозного менінгіту піддослідних тварин, інфікованих госпітальним штамом Salmonella typhimurium в дозі LDso 5-Ю6 мік/гіл/мл в кількості 0,5 мл на тварину, попередньо сенсібілізували кінською сироваткою в дозі 0,1 мл на протязі 3 днів. Мишей виводили з експерименту через певні проміжки часу часу (ЗО хв, 1 год, 3 год, 24 год, 3 доби, 5 та 10 діб) в умовах нембуталового наркозу. В стерильних умовах досліджували головний мозок, визначали рівень його бактеріологічного обсіменіння та проводили ідентифікацію збудників. Крім цього, були вивчені морфологічні зміни в тканині мозку. Таким чином, проведене дослідження показало, що сальмонела обсіміняє не тільки внутрішні органи, а й безперешкодно проникає через гематоенцефалічний бар'єр і накопичується в тканині мозку, обумовлюючи при цьому формування вогнищ гнійно-деструктивного характеру та клініку менінгоенцефаліту. Так, через 72 години від початку проведення експерименту кількість Salmonella typhimurium в мозку складала 109 мік/тіл. Через 5 діб бактеріальний індекс складав 105 мік/тіл. На 10 день спостереження збудник не виділявся. При патоморфологічному дослідженні головного мозку піддослідних тварин найбільш чіткі зміни виявлені у тканині півкуль. Там спостерігалось повнокрів'я з явищами перинуклеарного та перицелюлярного набряку. Вогнищево реєстрували накопичення лімфоцитів навколо судин, дистрофічні зміни нейронів та клітин нейроглії. М'яка мозкова оболонка, переважно в області півкуль, була потовщена та інфільтрована лейкоцитами і вкрита ніжною сіткою фібрину (фіг.). Сальмонели виявлялись інтраваскулярно, периваскулярно та в тканині мозку. ФІГ. ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044)295-81-42, 295-61-97 Підписано до друку 2002 р. Формат 60x84 1/8. Обсяг обл.-вид. арк. Тираж 50 прим Зам. УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22