Спосіб культивування пухлинної тканини

Спосіб культивування пухлинної тканини, що містить вирощування культури на покровному склі з лункою, використовують плазму як субстрат, за 43256 зано на маленькі шматочки розміром 1 мм 3, деякі з них були взяті для культивування. Шматочки, що залишилися, були змішані з кварцовим піском і розтерті в ступці до отримання гомогенної маси. До цієї маси було додано 10 мл фізіологічного розчину, вся отримана маса ретельно перемішана та профільтрована через 4 шари марлі. Таким чином було отримано пухлинний екстракт. Далі готувалися краплино-плазмові культури, до яких додавали пухлинний екстракт та приготовлені для культивування шматочки пухлини. Культури вирощувалися у термостаті. З особливостей слід відзначити, що в окрему груп у культур вносили мікрокраплину ембріонального екстракту як стимулятора росту. Оцінка результатів проводилася за допомогою темнопольної мікроскопії. Зона росту оцінювалась за середньою шириною і максимальному переміщенню окремих клітин. В наведеному прикладі препарати з додатком мікрокраплини ембріонального екстракту суттєво відрізняються лише у 35%, тому ембріональний екстракт не включено до способу. На відміну від аналогічних способів після прицільної аспірації вазелінової олії та рідкого поживного середовища під час завершення культивування можливо фарбування препаратів без порушення зони росту. Позитивним результатом даного способу є підвищення приживлення тканин у культура х, зберігання нормального газообміну протягом тривалого часу, можливість "підживлення" культури без порушення бар'єрного шару вазелінової олії. Запропонований спосіб опробовано в Донецькому обласному протипухлинному центрі, матеріалом були післяопераційні препарати хірургічного відділення № 2. Гістологічно пухлини мали таку структур у: аденокарциноми, внутрішньопротоковий рак, меланома. Перевиваємість складала 99,3 %. Культур у готують таким чином: на заздалегідь обезжирене ефіром стерильне покровне скло з лункою в центр наносять краплину фізіологічного розчину. В центр краплини капілярною піпеткою вносять краплину плазми хворого. Після цього додають краплину пухлинного екстракту і розміщують його в області 15 мм в діаметрі, змішуючи з плазмою так, щоб вона згорнулась. Поверх плазмового згустку вносять шматочок пухлинної тканини не більше 1-1,5 мм в діаметрі. Додають рідке поживне середовище, що складається на 50% з розчину Тіроде, на 40% - з сироватки хворого, на 10% - з пухлинного екстракту. Скляною паличкою, змоченою у стерильній вазеліновій олії, по краях лунки предметного скла утворюють олійне коло. Акуратно зверху на культуру розміщують краплину стерильної вазелінової олії. Культивування проводять при Т=38ºС у згоді з класичними параметрами. У приготованій за даним способом культурі вже через декілька годин визначається ріст, а до кінця першої доби визначається зона росту. Приклад Хвора Б., 1942 року народження, прооперована 11.02.2000 р. в ДОПЦ на рак молочної залози Т2 No Mo, II кл.гр. Після операції було взято пухлинну тканину розміром 1 см 3, пухлину було розрі __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 50 прим. Зам._______ __________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 __________________________________________________________ 2