Спосіб визначення ступеня хронічної недостатності ниркового алотрансплантату

Спосіб визначення ступеня хронічної недостатності ниркового алотрансплантату (ХННАТ), що включає приготування гістологічних зрізів нефробіоптатів, їх фарбування за Масоном, мікроскопіч 3 46208 ня ІФ здійснюється на підставі приблизної оцінки площі ІФ у зрізі: сі0 - ІФ не більше 5 % площі коркової зони нирки; сі1 - легкий ІФ (6-25 % площі коркової зони); сі2 - помірний ІФ (26-50 % площі коркової зони); сі3 - важкий ІФ (більше 50% площі коркової зони). Тому цей показник в значній мірі є суб'єктивним, що викликало необхідність у розробці нових способів. В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення способу визначення ступеня ХННАТ шляхом використання системи аналізу зображення для надання шкалі оцінки кількісного характеру, що у сукупності сприятиме підвищенню якості визначення ступеня ХННАТ. Поставлена задача вирішується тим, що у способі, який включає приготування гістологічних зрізів нефробіоптату, їх фарбування згідно до рекомендацій Банфф-класифікації за Масоном, мікроскопічне дослідження зрізів та визначення морфологічних змін, новим є те, що зріз фотографують, одержане зображення аналізують за допомогою комп'ютерних програм (наприклад, Adobe Photoshop 8.0 і Image J 1.34s), та визначають площу ІФ в зрізі. Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю ознак, що заявляються, та технічним результатом полягає у такому. Оцінка результатів фарбування за допомогою системи аналізу зображення у напівавтоматичному режимі дозволяє підрахувати площу ІФ в зрізі. Цей показник дозволяє точно визначити ступінь ХННАТ. Спосіб здійснюють таким чином. Готують парафінові зрізи нефробіоптатів завтовшки 3-4 мікрони та помішують їх на предметні стекла (по 4-6 зрізів на скло). Фарбують 1 скло трихромом за Масоном. Комп’ютерна верстка Д. Шеверун 4 Аналізують один зріз на скло; під мікроскопом при збільшенні ´ 400 у корковій речовині нирок методом систематичного випадкового відбору відбирають 10 полів зору інтерстиціальної тканини для дослідження. Зображення фотографують за допомогою цифрової фотокамери, потім вводять в комп'ютер для зберігання та наступної обробки. Виділяють фрагмент зображення, пофарбований у синій колір. Визначають відповідний ІФ відсоток площі зображення. Далі визначають середнє значення відсотка ІФ за результатами аналізу 10 полів зору. При площі ІФ до 20 % визначають 1-ий ступінь ХННАТ; При площі ІФ 20-35 % визначають 2-ий ступінь ХННАТ; При площі ІФ більше 35 % визначають 3-ий ступінь ХННАТ. Приклад. У пацієнта С., 52 років, якому 5 місяців тому пересадили нирку, діагностовано порушення функції ниркового алотрансплантату, виконана нефробіопсія. При визначенні ступеня ІФ за Банффкласифікацією був встановлений 1-й ступінь. Але при визначенні площі ІФ напівкількісним методом був встановлений 2-й ступінь (30,0%), що більше відповідає ранньому розвитку дисфункції. У даного пацієнта рже на момент пересадки в HAT виявлялися тяжкі ішемічні пошкодження, а в строк 2 місяці він мав епізод гострого відторгнення. У сукупності ці фактори обумовили ранній розвиток ІФ, що було прогностичне несприятливо. Це дозволило прийняти заходи, спрямовані на подовження життя HAT. Впровадження способу визначення ступеня ХННАТ, що пропонується, дозволить підвищити якість діагностики ступеня хронічної недостатності ниркового алотрансплантату. Це сприятиме прогнозуванню долі HAT, вибору найбільш адекватного методу лікування, відновленню функції алотрансплантату, та його збереженню, що дозволяє запобігти повернення хворого до діалізу або повторної трансплантації. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601