Спосіб визначення резистентності еритроцитів крові

Спосіб визначення резистентності еритроцитів крові, що включає приготування біохімічної системи, інкубацію в цій системі еритроцитів та мікроскопічне дослідження цієї системи, який відрізняється тим, що при мікроскопічному дослідженні вимірюють показник різниці площі інтактних еритроцитів та еритроцитів, шкубованих в розчині хлориду натрію, і якщо він не перевищує 10 мкм2, то визначають нормальну резистентність еритроцитів Винахід відноситься до галузі медицини, зокрема - реаніматологи і може бути використаний для діагностики та корекції лікування невідкладних станів Резистентність - властивість еритроцитів протистояти руйнуванню Еритроцити в гіпертонічних сольових розчинах зморщуються, а в ГІПОТОНІЧНИХ набухають При значному набуханні виникає гемоліз клітин і гемоглобін виходить з еритроцитів в оточуюче середовище Негайна реакція еритроцитів на зміну концентрації солевих розчинів характеризує високий ступінь участі цих клітин у системі гомеостазу організму Еритроцитарна ланка крові перша реагує на зміну осмотичної активності при різних захворюваннях [1 - 3] ВІДОМІ способи визначення резистентності еритроцитів крові, основані на виконані комплексу біофізичних та фізико-хімічних досліджень [1, 3] Недоліком цих способів є їх трудомісткість, тривалість виконання та методична складність Найближчим аналогом є спосіб визначення резистентності еритроцитів крові, що включає готування системи біохімічних реактивів та розчинів, додавання до цієї системи крові та визначення величини їх осмотичної резистентності [3] При достатній об'єктивності аналогу його недоліком є складність приготування системи, трудомісткість та тривалість процедури Задачею винаходу є розробка такого способу визначення резистентності еритроцитів крові, який би за рахунок автоматичного визначення приросту площі еритроцитів крові, шкубованої в 0,6% розчині хлориду натрію спростував би технологію його виконання Поставлена задача вирішується тим, що в способі визначення резистентності еритроцитів крові, який включає приготування біохімічної системи, інкубацію в цій системі еритроцитів та мікроскопічне дослідження цієї системи, згідно з винаходом, при мікроскопічному дослідженні вимірюють показник різниці площі інтактних еритроцитів та еритроцитів шкубованих в розчині хлориду натрію, і якщо цей показник не перевищує Юмкм2, то визначають нормальну резистентність еритроцитів Вимірювання показника різниці площі інтактних еритроцитів та еритроцитів шкубованих в розчині хлориду натрію спрощує технологію визначення резистентності еритроцитів внаслідок зменшення КІЛЬКОСТІ розчинів, необхідних для виконання цього лабораторного аналізу Указаний в формулі винаходу параметр різниці показників площі - Юмкм2, знайдений в результаті лабораторних досліджень 28 проб крові здорових донорів Встановлено, що при нормальних показниках осмотичної резистентності еритроцитів остаточний їх лізис наступав в розчині хлориду натрію від 0,32% до о,48% [3] При цьому площа еритроцитів, шкубованих 8 - 12хв В 0,6% розчині хлориду натрію збільшувалась не більше як на Юмкм Спосіб виконують таким чином У два флакони один з ІЗОТОНІЧНИМ розчином хлориду натрію, другий - з 0,6% розчином хлориду натрію додають по 0,2мл крові Видержують 8 - Юхв Далі, готують із вмісту флаконів ЦИТОЛОГІЧНІ препарати, які до (О ю о ю 50561 сліджують під мікроскопом комп ютерного аналізатора зображення Отримавши результати площі еритроцитів, знаходять їх різницю і по цьому показнику визначають резистентність клітин Приклад 1 Забір крові в КІЛЬКОСТІ 1 мл виконали з ліктьової вени хворого Р У флакони з ІЗОТОНІЧНИМ розчином та 0,6% розчином хлориду натрію додали по 0,2мл крові Вмістиме флаконів перемішали, видержали 8 - 12хв і приготували ЦИТОЛОГІЧНІ препарати Під мікроскопом комп'ютерного аналізатора зображення виміряли площу еритроцитів кожного із флаконів, яка ВІДПОВІДНО дорівню2 вала 21 та 26мкм Отже, величина різниці дорівнювала 5, тобто була менше 10, що свідчить про нормальний стан резистентності еритроцитів Приклад 2 Забір крові в КІЛЬКОСТІ 1 мл виконали з ліктьової вени хворого Т У флакони з ІЗОТОНІЧНИМ розчином та 0,6% розчином хлориду натрію додали по 0,2мл крові Вмістиме флаконів перемішали, видержали 8 - 12хв і приготували ЦИТОЛОГІЧНІ препарати Під мікроскопом комп'ютерного аналізатора зображення виміряли площу еритро цитів кожного із флаконів, яка ВІДПОВІДНО дорівню2 вала 22 та 34мкм Отже, величина різниці дорівнювала 12, тобто була більша 10, що свідчитьпро ненормальний стан резистентності еритроцитів Таким чином, запропонований спосіб дозволяє спростити технологію визначення резистентності еритроцитів, зберігши точність вимірювань, що має велике значення при терапії невідкладних станів Джерела інформації 1 Лабораторные методы исследования в клинике Под ред В В Меньшикова - М , 1987 - С 119 120 2 Ройтман Е В , Дементьева И И , Азизова О А и др Изменение реологических свойств крови при активации свободорадикальных процессов Клин лаб диагностика - М , 2001, 3 С 42 - 43 3 Определение резистентности эритроцитов В кн 'Справочник по клиническим лабораторным методам исследования' Под общей редакцией Е А Коста - М , 1968 С 109 - найближчий аналог ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71