Вакцина інактивована концентрована проти інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби для внутрішньошкірного введення

Вакцина інактивована концентрована проти інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби для внутрішньошкірного введення, що містить компонент вірусу ІРТ, ад'ювант, інактиватор, перещеплювану культуру клітин, яка відрізняється тим, що використовують як вірус ІРТ штам "Молдавський", як ад'ювант - синтетичний полімер Montanide Gel, як інактиватор - формалін, як культуру клітин - перещеплювану культуру клітин нирки вівці. (19) (21) u201000715 (22) 25.01.2010 (24) 12.07.2010 (46) 12.07.2010, Бюл.№ 13, 2010 р. (72) МАЛАКЄЄВ АНДРІЙ СЕРГІЙОВИЧ, СТЕГНІЙ БОРИС ТИМОФІЙОВИЧ, КУЧЕРЯВЕНКО РОМАН ОЛЕКСІЙОВИЧ (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ НАУКОВИЙ ЦЕНТР "ІНСТИТУТ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЇ І КЛІНІЧНОЇ ВЕТЕРИНАРНОЇ МЕДИЦИНИ" 3 51311 тання у якості вірусу ІРТ штаму «Молдавський», як ад'юванта - синтетичного полімеру Montanide Gel, як інактиватора - формаліну, у якості перещеплюваної культури клітин - культури клітин нирки вівці та трахеї телят, щоб забезпечити ефективність моновалентної інактивованої концентрат-вакцини проти інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби. Порівняльний аналіз із найближчим аналогом дозволяє зробити висновок, що інактивована концентрат-вакцина проти інфекційного ринотрахеїту великої рогатої худоби містить 80% антигену вірусу інфекційного ринотрахеїту штаму «Молдавський» з активністю 10-8 ТЦД50/см3, яка концентрована на стадії репродукції в моношаровій перещеплюваній культурі клітин нирки вівці (НВ), відповідно інактивована 0,1% - 0,3% формальдегідом за температури 37°С впродовж 96 годин і синтетичного полімеру Montanide Gel. Інактивовану вакцину готують таким чином. Репродукцію, та концентрацію вірусу ІРТ проводять на перещеплюванній культурі клітин нирки вівці (НВ) за допомогою ролерної установки, у флаконах ємністю 3000 см3. Інфекційність вихідної вірусовміщуючої культуральної суспензії становить 10-8 ТЦД50/см3 (на відміну з прототипом 106,0-7,0 ТЦД50/см3). Після цього культуру клітин заражають вірусовміщуючою суспензією з розрахунку 0,5-1 ТЦД50/на клітину інкубують при (37,0±37,2)°С з щоденним контролем за розвитком цитопатичної дії (ЦПД). При ураженні 80 - 90% клітин моношару їх заморожують. Після дефростації, очистки від клітинного детриту центрифугування і перевірки на інфекційну активність антиген з активністю 10-8 ТЦД50/см3 використовують для виготовлення вакци 4 ни. Інактивацію проводять з використанням 0,1% 0,3% формальдегіду протягом 24-48 годин. Повноту інактивації перевіряють за результатами триразового послідовного пасажування досліджуваної культуральної суспензії вірусу в культурі перещеплюваних клітин. Далі беруть 80% за об'ємом антигена і додають 10% - 20% синтетичного полімеру французької фірми «Seppic» Montanide Gel, який відноситься до категорії високомолекулярних поліокрелатів (відповідає вимогам Gmp (ICHQ7a), змішують до утворення біомаси жовтуватого кольору, фасують у флакони, після чого перевіряють на стерильність, небезпечність для тварин і імуногенну активність. Приклад Випробування імуногенності запропонованої вакцини проти ІРТ здійснювали на телятах 3-4-х місячного віку. Першу групу щепили в об'ємі 0,4 см3 внутрішньошкірно, дворазово з інтервалом 21 доба. Другій групі вводили по 0,4 см3 плацебо (контроль). Через 21, 30, і 60 діб після першого щеплення у телят відбирали кров, сироватку якої досліджували у реакції нейтралізації на наявність антитіл до вірусу ІРТ. Результати оцінки імуногенності інактивованої вакцини представлені в таблиці. Вакцина, виготовлена таким способом, є нешкідливою та забезпечує утворення імунітету у 8095% щеплених тварин. Запропонована вакцина випробувана з позитивними результатами в господарствах Харківської області в 2007-2008 р. Таким чином використання вакцини дозволить знизити захворюваність інфекційним ринотрахеїтом, що сприяє підвищенню молочної та м'ясної продуктивності тварин. Таблиця Піддослідні групи Перша група (вакциновані) Друга група (контроль) Об'єм введеної вакцини, см3 0,4 0,4 Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко Титри специфічних антитіл, log2 до введення на 21 добу на 30 добу на 60 добу 3,6±0,40 5±0,32 7,6±0,40 6±0,32 3±0,41 2,75±0,25 3,25±0,48 2,50±0,29 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601