Спосіб визначення ступеня забрудненості рибогосподарських водоймищ

Спосіб визначення ступеня забруднення рибо вище стан водойм вважають загрозливим для життя риб Винахід відноситься до галузі рибництва, зокрема до біологічних способів визначення ступеня забрудненості рибогосподарських водоймищ, і може бути використаний для підвищення продуктивності і якості продукції рибогосподарських водоймищ з різними формами власності Відомий спосіб дослідження води на вміст в ній розчинених речовин /АС СРСР 7445 394601 №27/46/, який полягає у подразненні хемосенсорних полей певних ділянок поверхні риб і вимірювання параметрів біопотенціалу згідно якого роблять висновок про рівень забрудненості води Відомий також „Спосіб оцінки ступеня токсичності води (АС СРСР №1445397 №33/18/, який передбачає внесення в пробу води досліджуваного водного середовища тест-об'єкта - найпростіших Stentor roesebi, а про ступінь токсичності роблять висновок за їх фізіологічним станом Відомий „Спосіб визначення біохімічного забруднення води великих рік в зимових умовах АС СРСР №1682924601 №33/00, в якому використовують біологічний об'єкт - мікроводорослі ісландської мелозіри в пробах якої після висушування визначають рівень важких металів і за одержаними результатами роблять висновок про ступінь забрудненості водного середовища Відомий спосіб визначення токсичного впливу ХІМІЧНИХ речовин, що містяться у водному середовищі на культуру планктонних гідробіонтів (АС СРСР №1688161 MI1K5G01 №33/18 Всі перераховані вище ВІДОМІ способи є громіздкими, незручними у виконанні і, головне - малоефективними Найбільш близьким по суті до способу, що за являється є спосіб, описаний Житнева Д Д , Полтавцеві Т Г , Рудницкая О А Атлас нормальных и патологических изменений клеток крови рыб 1989) Спосіб передбачає тест-об'єктом риб, що населяють досліджуване водоймище 3 крові риб виготовляють мазки, їх фарбують, досліджують під мікроскопом і аналізують При цьому наявність в досліджуваних мазках крові риб патологічних змін в еритроцитах (гемоліз, плазмоліз, поліхромазія, пойкілоцитоз) свідчать про токсичність водного середовища Недоліком відомого способу є те, що він не дозволяє виявити мутагенний вплив водного середовища на ранніх етапах токсичної дії, крім того патологічні зміни в еритроцитах можуть відбутися внаслідок приготування мазків крові' Заявлений спосіб усуває недоліки прототипу і забезпечує оптимальне і швидке виявлення впливу мутагенних факторів на еритроцити крові коропа В основу винаходу поставлено завдання розробити новий, високоефективний і швидкий спосіб на виявлення наявності мутагенних факторів водного середовища Технічний результат досягають шляхом визначення в мазках крові риб еритроцитів з мікроядрами Наявність мікроядер в еритроцитах крові вища ніж 7%о свідчить про накопичення у воді мутагенних факторів, які спричиняють порушення обміну речовин у гідробіонтів Оцінка мутагенного впливу полягає у збільшенні КІЛЬКОСТІ мікроядер в еритроцитах риб до 12,8% внаслідок підвищення вмісту у воді біогенних елементів, зокрема, амонійного азоту, нітритів, господарських водоймищ шляхом дослідження еритроцитів у мазках крові риб, який відрізняється тим, що в еритроцитах риб визначають наявність мікроядер і при збільшенні їх КІЛЬКОСТІ до 7%о досліджуване водоймище вважають таким, що потребує заходів покращення водоі газообміну, а при збільшенні їх КІЛЬКОСТІ ДО 12%О І со Ю 53244 нітратів В основі формування мікроядер можуть лежати різні молекулярні механізми, які мають загальне морфологічне виявлення, вони можуть утворюватися з цілих хромосом, а також з їх фрагментів, не включених в дочірні ядра під час мітозу, при багатополюсному МІТОЗІ, ЯКЩО ядерний матеріал нерівномірно розприділюється між дочірніми клітинами У виявленні в еритроцитах крові мікроядер в КІЛЬКОСТІ від 7%о і більше, необхідно запобігти нагромадженню у воді мутагенних факторів, зокрема покращити водо-та газообміни ставів При підвищенні КІЛЬКОСТІ мікроядер до 12%о, риба погано бере корм, а отже понижується рибопродуктивність ставів Відомо (Китнева Л Д , Полтавцева Т Г , Рудницкая О А Атлас нормальных и патологически измененных клеток крови рыб),- технічне рішення, яке містить найбільшу КІЛЬКІСТЬ ознак, спільних з заявленим способом (Ступінь забрудення рибогосподарських водоймищ визначають шляхом дослідження мазків еритроцитів крові риб), однак наявність зазначених, спільних із прототипом ознак є недостатня для отримання технічного результату, який забезпечує заявлений спосіб Ознаки, які відрізняють заявлений спосіб від прототипу і забезпечують досягнення технічного результату використання для визначення ступеня забруднення рибогосподарських водоймищ КІЛЬКОСТІ мікроядер в еритроцитах риб з досліджуваного водоймища і при збільшенні їх до 7%о досліджуване водоймище вважають таким, що потребує заходів покращення водо- і газообміну, а при збі льшенні їх до 12% і вище - стан водоймищ вважають загрозливим для життя риби Заявлений винахід належить до галузі рибництва, зокрема до біологічних способів визначення ступеня забрудненості рибогосподарських водоймищ і може бути використаний для рибогосподарських підприємств з різними формами власності Спосіб здійснюють наступним чином У водному середовищі, яке піддається ОЦІНЦІ виловлюють 6-9 екземплярів риб Пастерівську піпетку промивають розчином гепарину, відбирають кров і краплю наносять на предметне скельце, шліфованим скельцем виготовляють мазки, висушують і фіксують 3-5хв в метанолі Фарбують барвником Гімза-Романовського Під збільшенням мікроскопа хЮОО проводять підрахунок мікроядер в одній тисячі еритроцитів При виявленні мікроядер до 7%о роблять висновок, що у воді наявні токсичні речовини, проте в малих кількостях При виявленні мікроядер в КІЛЬКОСТІ 12%о вважаємо, що вода не придатна для життя риб Приклади конкретного виконання Ефективність заявленого способу і переваги його перед прототипом підтверджено прикладами конкретного виконання Дослідження проводили у ставах двох дослідних господарств „Великий Любінь" та „Стрий" В ставку господарства „Великий Любінь" гідрохімічні показники не перевищували нормативних, проте у воді дослідного ставу господарства „Стрий" дані показники в значній мірі перевищували нормативи (табл 1) Таблиця 1 Показники Амонійний азот мг N/л Нітрити мг N/л Нітрати мг N/л ГДК ОСТ 15 372-37 до 1,0 до 0,1 до 2,0 В еритроцитах крові риб виловлених в ставі господарства Великий Любінь спостерігалося утворення мікроядер в КІЛЬКОСТІ 7,3±0,51%о Будьяких інших змін в еритроцитах риб не спостерігалося При проведенні мікроядерного тесту в риб господарства „Стрий" встановлено, що вміст мікро Великий Любінь 0,02 0,064 0,3 Стрий 4,8 0,3 10,5 ядер 12,8±0,31%о, що на 43% перевищувало дане значення в еритроцитах крові риб виловлених в ставах господарства „Великий Любінь" Водночас в еритроцитах риб господарства „Стрий" спостерігалася наявність патологічне змінених еритроцитів, а саме гемоліз та пойкілоцитоз у 10% еритроцитів ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24