Спосіб виготовлення вакцини проти вірусної геморагічної хвороби кролів

1 Спосіб виготовлення вакцини проти вірусної геморагічної хвороби кролів, при якому готують вірусну сировину на забуференому фізіологічному розчині, додають хлороформ і витримують при періодичному перемішуванні, потім екстрагують і сепарують, після цього сировину інактивують розчином формаліну, після інактивації додають гель гідроокису алюмінію, який відрізняється тим, що хлороформ додають у розмірі 2 - 5% і витримують 180хв , а після сепарації в сировину додають ан Винахід відноситься до ветеринарної вірусологи, зокрема до способу виготовлення вакцини проти вірусної геморагічної хвороби кроликів (ВГХК), і може бути використане на підприємствах біологічної промисловості Відомий спосіб виготовлення шактивованої вакцини проти геморагічної хвороби кроликів (ГХК) (патент Роси на винахід №2039570, публ 20 07 1995), що включає в себе готування суспензії печінки кроликів, що пали після зараження вірулентним вірусом геморагічної хвороби, и інактивацію 1, 8, 3, 6-диэндометилен-1, 3, 6, 8тетраазатрициклодеканом у концентрації 1м на ЮООмол суспензії печінки при 27°С протягом 48ч , стабілізацію й освітлення хлороформом у співвідношенні 1 частина хлороформу до 5 частин суспензії протягом 10ч Недоліком цього способу є низька стерильність вакцини Найбільш близьким аналогом способу, що заявляється, і обраним як прототип, є спосіб готування вірусної вакцини проти геморагічної хвороби кроликів (Інструкція з виготовлення і контролю вакцини проти вірусної геморагічної хвороби кро тибактеріальні засоби, крім того, після інактивації перед додаванням гідроокису алюмінію також додають антибактеріальні засоби 2 Спосіб по п 1, який відрізняється тим, що як антибактеріальний засіб на етапі готування сировини може бути використаний тюмерсал з розрахунку 1 100000 3 Спосіб по п 1, 2, який відрізняється тим, що як антибактеріальний засіб на стадії інактивації може бути використаний ампіцилін з розрахунку 200ОД на 1 мл суспензії 4 Спосіб по п 1, 2, який відрізняється тим, що як антибактеріальний засіб на стадії інактивації може бути використаний левоміцетин з розрахунку 0,05г препарату на 1л суспензії 5 Спосіб по п 1, 2, який відрізняється тим, що як антибактеріальний засіб на стадії інактивації може бути використаний гентоміцин з розрахунку 35 мг на 1л суспензії ликів тканинної шактивованої гідроокис алюмінієвої, затверджена ДУВ СРСР 5 07 1990р ) ВІДПОВІДНО ДО ЦЬОГО способу, як вірусну сиро вину використовують 10% суспензію печінки кроликів, що пали від вірусу ГХК, приготовлену на забуференому розчині з додаванням 1% хлороформу і витримкою протягом бОхв при періодичному перемішуванні, потім ця сировина шактивується розчином формаліну при 27° - 28°С протягом 3 - 4 доби з періодичним перемішуванням Після ЦЬОГО В розчин додають гель гідрату окису алюмінію Сорбцію проводять на протязі 1 2 години з періодичним перемішуванням Приготовлена таким способом вакцина має недостатню стерильність і низький титр вірусу, після імунізації у тварин відзначаються поствакцинальні ускладнення В основу винаходу поставлена задача удосконалення способу одержання вірусної вакцини проти ГХК, у якій додаткове додавання хлороформу з наступною витримкою, а також дворазове введення антибактеріальних засобів виключає внесення в організм кроликів при профілактичних щепленнях сторонньої мікрофлори і збільшує титр вірусу, ю о> со ю 53925 що підвищує якість вакцини Поставлена задача досягається тим, що спосіб виготовлення вірусної вакцини проти ВГХК, при якому виготовлюють вірусну сировину на забуференому фізіологічному розчині, в яку додають хлороформ і витримують при періодичному перемішуванні, потім екстрагують і сепарують, після чого сировину шактивують розчином формаліну, після інактивації додають гель гідроокису алюмінію, відрізняється тим, що хлороформ додають у розмірі 2 -5% і витримують 180хв , а після сепарації в сировину додають антибактеріальні засоби, крім того, після інактивації перед додаванням гідроокису алюмінію також додають антибактеріальні засоби У способі готування вакцини як антибактеріальний засіб на етапі готування сировини може бути використаний тюмерсал з розрахунку 1 100000 У способі готування вакцини як антибактеріальний засіб на етапі інактивації може бути використаний ампіцилін з рахунку 200ЄД на 1мл суспензії У способі готування вакцини як антибактеріальний засіб на стадії інактивації може бути використаний левоміцетин з розрахунку 0,05г препарату на 1л суспензії У способі готування вакцини як антибактеріальний засіб на стадіїінактивації може бути використаний гентоміцин з розрахунку 35мг на 1л суспензії Додавання 2% хлороформу в суспензію печін ки і витримка протягом 180хв з наступним сепаруванням приводять до більш повного розщеплення тканинного детриту, що міститься в суспензії і більш повному виходу вірусу в забуферений розчин і тим самим збільшується титр вірусу в суспензії Крім того, двократне додавання в суспензію антибіотика дозволяє подавити сторонню міклофлору, тим самим зменшити поствакцинальні ускладнення при профілактичних щепленнях, що також підвищує якість вакцини Використання запропонованого способу виготовлення вакцини проти вірусної геморагічної хвороби кроликів (ВГХК) при використанні всіх ознак, включаючи і ВІДМІТНІ дозволяє одержати якісну вакцину ПРИКЛАД КОНКРЕТНОГО ВИКОНАННЯ Для виготовлення однієї серії вакцини в КІЛЬКОСТІ 200л потрібно 16кг вірусу, якій отримують при заражені 230 голів кролів віком 2 МІСЯЦІ І старше вагою 1,5 - 2,5кг, не імунних до вірусу геморагічної хвороби епізоотичним штамом ВГХК "Вороніж - 87" з активністю не нижче 10 4 0 LD5O/CH 3 Заморожену печінку - 16кг відтаюють, пропускають через м'ясорубку з додаванням ЗБФР - 160л, додають 3,2л хлороформу і витримують 180 хвилин Екстрагують і сепарують Додають 2г тюмерсала Потім шактивують і знову додають, в якості антибактеріального засобу гентоміцин в КІЛЬКОСТІ 7Г ПІСЛЯ цього додають 3% гідроокису алюмінію в КІЛЬКОСТІ 18л ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24