Інактивована емульсин-вакцина з штаму brucella ovis 67/б проти інфекційного епідидиміту баранів

Інактивована емульсин-вакцина проти інфекційного епідидиміту баранів з імуногенного штаму і масляного ад'юванту, яка відрізняється тим, що як імуногенний штам використовується інактивована суспензія штаму Brucella ovis 67/Б В ovis 67/Б пояснюються наступними прикладами Приклад 1 Культуру вакцинного штаму В ovis 67/Б вирощували МППГГА з 10% сироватки ВРХ в умовах збільшеної КІЛЬКОСТІ СОг в атмосфері вирощування впродовж 3-х діб Культуру бактерій змивали фізіологічним 0,85% розчином натрію хлориду Суспензію бруцела овіс шактивували формаліном в концентрації 0,4% при t 37°C одну добу, досліджували на стерильність і повноту інактивації способом ВИСІВІВ на МППГГБ і МППГГА з сироваткою в умовах збільшеної КІЛЬКОСТІ СОг при 137°С Інактивовану суспензію бруцела овіс змішували на гомогенізаторі з масляним ад'ювантом, контролювали препарат на стерильність способом ВИСІВІВ на МППГГБ, МППГГА з сироваткою, середовище Кітт-Тароцці при t 37°C, а також ВИСІВІВ на середовище Сабуро при t 22 - 24°С впродовж 10 діб Суспензію бруцела овіс шактивували формаліном в концентрації 0,4% при t 37°C одну добу, контролювали на стерильність і змішували на гомогенізаторі з масляним ад'ювантом Виготовили дві мікросерм шактивованої емульсин-вакцини Двом дослідним групам морських свинок по 12 голів вводили під шкіру вакцину в дозі 20 і 200млн м к в об'ємі 0,5см3, контрольній групі (11 голів) - ад'ювант з фізрозчином Серологічні дослідження, проведені до зараження, виявили в сироватці всіх щеплених морських свинок антитіла в РТЗК в титрі 1 5 - 1 10 (0,93 ± 0,041 д) і в РІД - позитивна реакція з бруцелаовісним антигеном Через 2 МІСЯЦІ ПІСЛЯ вакцинації тварин щеплених і контрольної груп заразили вірулентним штамом В ovis 8406 підшкірно в дозі 2млрд м к Діагностичний забій, серологічні та бактеріологічні дослідження провели через со Ю 53940 45 діб після зараження У щеплених тварин бруцелаовісна серопозитивність становила в РТЗК - 1 5-1 10 (0,98 ± 0,021 д) та РІД В контрольній групі інфікованих морських свинок виявили 81,8% реагуючих в РТЗК в титрі не більше 1 5 і 36,4% тварин - в РІД Бактеріологічними дослідженнями імунітет в 1-й групі виявлено у 11 з 12 морських свинок (91,6%) і в 2-й групі у всіх 12 морських свинок (100%) В контролі культуру В ovis виділили у 10 (90,9%) морських свинок з індексом інфікованності ( I I ) - 36,8% Встановлено також, що щеплення емульсин-вакциною не викликала бруцельозної серопозитивності з S-антигеном в РБП, РА і РЗК Приклад 2 По технологи, що наведена в прикладі 1, виготовлена експериментальна серія №1 інактивованоі емульсин-вакцини Концентрація бруцел в сери вакцини склала 2,5млрд м к / с м 3 Вакцину інокулювали 5 морським свинкам підшкірне в дозі 1,25млрд м к в об'ємі 0,5см 3 , 5 морським свинкам контрольної групи препарат не вводили Через 40 діб після імунізації морських свинок заразили вірулентним шт В ovis 65939 в дозі 2млрд м к Через місяць провели діагностичний забій з відбором сироватки крові При бактеріологічному дослідженні коси і лімфовузлів культуру заражаючого штаму реїзольовано у 5 морських свинок контрольної групи з І І - 80,0%, у вакцинованих тварин культура не виділена У щеплених морських свинок встановлена більша бруцелаовісна серопозитивність в Р Т З К - 1 8 0 - 1 160 ( 2 ± 0 , 1 2 1 д ) і РІД - 1 2 - 1 8 (1,7 ± 0,811од 2 ), а в контрольній групі тільки в Р Т З К - 1 5 - 1 10 (0,88 ± 0,081 д) Приклад З Випробування шактивованої емульсинвакцини сери №1 на антигенність та імуногенність провели в двох дослідах на 10 вакцинованих і 8 контрольних баранах в ВІЦІ 9 МІСЯЦІВ Вакцину інокулювали підшкірне в області паху в дозі 5млрд м к в об'ємі 2,0см 3 Контрольним 4-м баранам вводили ад'ювант на фізрозчині, а другим чоти рьом баранам препарат не застосовували Через 6 (дослід 1) і 12 (дослід 2) МІСЯЦІВ ПІСЛЯ вакцинації щеплених та контрольних баранів заразили суспензією 3-х добової культури бруцела овіс в концентрації 5млрд м к штаму В ovis 8406 і штаму В ovis 08337 шляхом аплікації по 0,1см 3 на кон'юнктиву обох очей та по 0,8см 3 на слизову препуція Діагностичний забій і бактеріологічне дослідження провели через ЗО - 58 діб після зараження При дослідженні в РА, РТЗК, РІД з бруцелаовісним антигеном у вакцинованих баранів в двох дослідах виявили серопозитивність до зараження Бруцелаовісна серопозитивність зберігається до кінця дослідження в першому ДОСЛІДІ титри в РА б у л и - 1 2 5 - 1 100 (1,76 ±0,131д), Р Т З К - 1 10 - 1 80 (1,36 ± 0,161д), РІД - 1 4 - 1 16 (2,2 ± 0,721 одг), в другому ДОСЛІДІ титри в РА - 1 2 5 - 1 100 (1,7 ± 0,141д), РТЗК - 1 5 - 1 80 (1,3 ± 0,281 д), Р І Д - 1 3 2 - 1 64 (5,3 ± 0,551 од 2 ) Бактеріологічне дослідження після контрольного зараження через 6 і 12 МІСЯЦІВ були ВІД'ЄМНІ, ЩО показує о повному захисті щеплених тварин В контрольних інфікованих групах після зараження барани позитивно реагували в серологічних реакціях з бруцелаовісним антигеном в першому ДОСЛІДІ титри в РА - 1 25 (1,4 ± 01 д), РТЗК - 1 5 (0,35 ± 0,231 д) і в РІД - позитивно, в другому ДОСЛІДІ титри в Р А - 1 2 5 - 1 50 (1,2 ± 0,461 д), РТЗК - 1 10 (1,0 ± 01д), РІД - 1 8 - 1 16 (3,8 ± 0,281 одг) В контрольних групах ВИДІЛИЛИ культуру заражаючого штаму В ovis в першому ДОСЛІДІ у 3-х з 4-х баранів з індексом інфікованності 31,2% та у 2-х з 4-х в другому ДОСЛІДІ з 1 1 - 2 3 , 1 % Результати імуногенних властивостей шактивованої емульсин - вакцини у двох дослідах на баранах подані в таблиці Встановлено також, що щеплення шактивованою емульсин - вакциною проти IE баранів не викликає бруцельозної серопозитивності з Sантигеном в РБП, РА та РТЗК, що забезпечує можливість серологічне контролювати на бруцельоз щеплених тварин Таблиця Результати визначення імуногенності шактивованої емульсин-вакцини в дослідах на баранах Група КІЛЬКІСТЬ тварин Всього Щеплені Контроль 5 4 — 4 Щеплені 5 4 — 4 Контроль Заразилось В т о м у числі Виділено культуру Серопозитивність Дослід 1 — — 3 4 Дослід 2 — — 2 4 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24 Індекс Інфікованності % — 31,2% — 23,1%