Спосіб світлооптичної візуалізації залізовмісних наночастинок у клітинах в системі in vitro

Спосіб світлооптичної візуалізації залізовмісних наночастинок у клітинах в системі in vitro, що включає гістохімічну реакцію з феро- та фериціанідом калію, який відрізняється тим, що як об'єкт дослідження використовують цитопрепарати, отримані з клітин, які росли в системі in vitro в присутності залізовмісних наночастинок. (19) (21) u201007169 (22) 10.06.2010 (24) 25.01.2011 (46) 25.01.2011, Бюл.№ 2, 2011 р. (72) НАЛЄСКІНА ЛЕСЯ АНАТОЛІЇВНА, ЛУК'ЯНОВА НАТАЛІЯ ЮРІЇВНА, ДЕМАШ ДМИТРО ВАЛЕРІЙОВИЧ, КУНСЬКА ЛЮБОВ МИКОЛАЇВНА, ЧЕХУН ВАСИЛЬ ФЕДОРОВИЧ (73) ІНСТИТУТ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЇ ПАТОЛОГІЇ, ОНКОЛОГІЇ ТА РАДІОБІОЛОГІЇ ІМ. Р.Є. КАВЕ 3 56641 Прикладами конкретного виконання способу можуть бути результати дослідження клітин раку молочної залози людини лінії MCF-7. І. Клітини лінії MCF-7 культивувались на покривних скельцях у поживному середовищі ISCOV із додаванням до нього феромагнетику у концентрації 0,01 %, після чого їх фіксували у 4 %-ному розчині параформальдегіду протягом 4 хв. Скельця два рази промили фізіологічним розчином і нанесли на них розчини феро- і фериціаніду калію. Клітини інкубували з розчинами протягом 1 год., після чого скельця двічі промили у 0,01н НСl і дофарбовували квасцовим карміном протягом 10 хв. Далі покривні скельця два рази промили у дистильованій воді, нанесли на предметні скельця і заключили у гліцерин. В результаті дослідження за допомогою світлового мікроскопу було виявлено позитивну реакцію на наявність феромагнетику (поодинокі частинки, забарвлені у синій колір, які знаходяться всередині клітин). II. Клітини лінії MCF-7 культивувались на покривних скельцях у поживному середовищі ISCOV, після чого їх фіксували у 4 %-ному розчині параформальдегіду протягом 4 хв. Скельця двічі промили фізіологічним розчином і нанесли на них розчини феро- і фериціаніду калію. Клітини інкубували з розчинами протягом 1 год., після чого скельця двічі промили у 0,01н НСl і дофарбовували квасцовим карміном протягом 10 хв. Далі покривні скельця два рази промили у дистильованій воді, нанесли на предметні скельця і заключили у гліцерин. В результаті дослідження за допомогою світлового мікроскопу реакція на присутність залі Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко 4 зовмісних сполук була негативною (було відсутнє синє забарвлення). Спосіб виконано на культурах клітин різного гістогенезу: раку молочної залози людини лінії MCF7 та лімфосаркоми людини лінії U937. Таким чином, застосування даного способу виявлення наноферомагнетиків дозволить проводити візуалізацію залізовмісних наночастинок за допомогою світлової мікроскопії у клітинах, які культивувались in vitro в присутності залізовмісних наночастинок. Джерела інформації 1. Histochemical staining of exogenous chromium and iron with the catalytic oxidation of phenylamines /Y. Sumi, Y. Koyama, T. Muraki et al. //Histochemistry and Cell Biology. - 1985. - Vol. 83. - №6. - P. 509512. 2. Nonheme-iron histochemistry for light and electron microscopy: a historical, theoretical and technical review /R. Meguro, Y. Asano, S. Odagiri et al. //Archives of histology and cytology. - 2007. Vol.70. - №1. - P. 1-19. 3. Appearance of iron-labeled blood mononuclear cells in electron microscopy /D. Horky, I. Lauschova, M. Klabusay et al. //Veterinarni Medicina. -2006. Vol.51. -№3. -P. 89-92. 4. Cell response to dextran-derivatised iron oxide nanoparticles post internalization /C.C. Berry, S. Wells, S. Charles et al. //Biomaterials. - 2004. Vol.25.- P. 5405-5413. 5. Лилли Р. Патологическая техника и практическая гистохимия. - М.: Мир, 1969. - 649 с. (Найближчий аналог). Підписне Тираж 23 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601