Спосіб одержання тестикулярного гамма-глобуліну “тестикулонорм”

1 Спосіб одержання тестикулярного гаммаглобуліну, що включає забирання крові з тварин продуцентів антитіл, імунізованих водно-сольовим екстрактом тканини яєчок ЧОЛОВІКІВ, ЩО загинули від нещасних випадків, відділення сироватки від формених елементів крові і виділення з неї гаммаглобулінової фракції з наступною и люфілізацією, який відрізняється тим, що яктварин-продуцентів антитіл використовують парнокопитних тварин 2 Спосіб за п 1 , який відрізняється тим, що з парнокопитних використовують коней або поні, або кіз Винахід відноситься до галузі медицини, а саме, до способів одержання лікувальнопрофілактичних препаратів Відомий спосіб одержання тестикулярного гамма-глобуліну "Сексостимулін", який включає забирання крові з продуцентів антитіл, імунізованих водно-сольовим екстрактом тканини яєчок ЧОЛОВІКІВ, що загинули від нещасних випадків, відділення сироватки від формених елементів крові, виділення з неї гаммаглобулінової фракції з наступною и люфілізацією В прототипі як продуценти антитіл використовують кролів (див заявка України №94076374, МПК А61К 35/16, Бюл №3, 1996) Недоліки такого способу є малий вихід гаммаглобуліну через вибір малих за розміром тваринпродуцентів В основу винаходу покладене завдання створити такий спосіб одержання тестикулярного гамма-глобуліну, у якому шляхом заміни тварини — продуцента антитіл досягається можливість одержати більшу КІЛЬКІСТЬ гамма-глобуліну, що має велике значення для практичної медицини Для вирішення завдання запропонований спосіб одержання тестикулярного гамма-глобуліну, що включає забирання крові з тварин-продуцентів антитіл, імунізованих водно-сольовим екстрактом тканини яєчок ЧОЛОВІКІВ, що загинули від нещасних випадків, відділення сироватки від формених елементів крові, виділення з неї гаммаглобулінової фракції з наступною и люфілізацією, у якому, згідно з винаходом, яктварин-продуцентів антитіл використовують парнокопитних тварин, таких, як коней, або поні, або кіз Спосіб дозволяє за один технологічний цикл одержати значну КІЛЬКІСТЬ лікарського засобу Конкретний приклад виконання способу За тваринами доглядають ветеринарні лікарі згідно з інструкцією по їх відбору та експлуатації У процесі імунізації виміряють кожен день температуру тіла, один раз на місяць тварин зважують і обов'язково зважують перед кровопусканням Яєчка практично здорових ЧОЛОВІКІВ ВІД 18 до 45 років, які загинули від нещасних випадків, забирають не пізніше 24 годин після смерті, без порушення стерильності при здобутті органів (яєчок), вкладають їх у стерильний посуд (скляний чи металевий бюкс) Одночасно беруть кров із вен черевної порожнини для аналізу на ВІЛ-шфекцію Приготування антигену проводять після одержання результатів реакції на ВІЛ-шфекцію (результати повинні бути негативними) Наважка сім'яних канальців яєчка з попередньо видаленими білочною оболонкою, міжканальцевою сполучною тканиною, кровоносними судинами, перетирається в чашці Петрі та відмивається стерильним фізіологічним розчином Потім у стерильній фаянсовій ступці тканину розтирають з кварцовим піском (1-1,5г) і поступово додають стерильний фізіологічний розчин (0,85%) в п'ятикратній КІЛЬКОСТІ ДО маси тканини (О о> о (О Одержану масу центрифугують у стерильних центрифужних пробірках Рідину над осадом відсмоктують стерильним шприцом, фільтрують через 4 шари марлі і визначають КІЛЬКІСТЬ білка (по методу Лоурі) Антиген вводять коням внутрішньовенно 4-5 разів у підвищених дозах (30-50%) з інтервалами в 5 днів з розрахунку введення у перший раз 5-6г тканини, що приблизно відповідає 20-25мл антигену Через 7-8 діб після останнього введення антигену беруть пробу крові для визначення титру антитіл у реакції зв'язування комплементу При титрі не нижче 1 120 проводять кровопускання Кров збирають у стерильний посуд Виділення активної гамма-глобулінової фракції з сироватки крові коней проводять методом осаджування етанолом з послідуючим діалізом і фільтрацією розчину гамма-глобуліну через бактеріальний фільтр Розчин гамма-глобуліну розливають в ампули по 1мл Касети з ампулами прикривають 3 шарами марлі Потім ампули заморожують 25 хвилин у спеціальному ротаційному апараті фірми "ЮЗИФРУА" М-10 до температури 40-42°С шляхом повільного обертання у ванні з охолодженим спиртом Заморожений гамма-глобулін перед сушінням ставлять у холодильну камеру при -20-25°С на 24 Комп'ютерна верстка Н Кураєва 60976 години При необхідності заморожений розчин можна зберігати у таких умовах, але не більше одного місяця Касети з препаратом спочатку заморожують до -40°С А потім ставлять у сублімаційну камеру того ж апарату, герметично закривають кришку і вмикають вакуумний насос Через ЗО хвилин після З того, як стане вакуум 75-100-10 мм рт ст вмикають підігрів касет до 60°С Через 8 годин після початку сушки переключають регулятор на +40°С Висушують препарат протягом 14-18 годин Вакууму КІНЦІ процесу повинен бути близько 3 25-10 ммртст Залишкова волога препарату не повинна бути більше 5% Тестикулярний гамма-глобулін - це білий з жовтим ВІДТІНКОМ порошок, який добре розчиняється у фізіологічному розчині, не токсичний У хворих препарат застосовують підшкірне в розведенні 110 стерильним фізіологічним розчином Як було сказано вище, спосіб одержання тестикулярного гамма-глобуліну шляхом імунізації коней дозволяє одержати більшу КІЛЬКІСТЬ лікарського засобу, ніж за прототипом Підписне Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119