Вакцина, що гіперекспресує гомологічний антиген, та спосіб імунізації хребетного від бруцельозу

1 Вакцина для імунізації профілактики або лікування хребетного у випадку ризику або страж­ даючого ВІД бруцельозу, яка відрізняється тим що вказана вакцина включає атенуйований чи авірулентний штам іншої патогенної бактерії роду Brucella, причому зазначений штам надекспресує принаймні один гомологічний антиген, кодований принаймні одним геном з зазначеної бактерії, при­ чому вказаний принаймні один антиген здатний індукувати захисну або терапевтичну імунну відпо­ відь у хребетного проти бруцельозу 2 Вакцина за п 1, яка відрізняється тим, що за­ значений атенуйований або авірулентний штам зазначеної бактерії додатково експресує один або більше гетерологічних антигенів від принаймні одного іншого патогену причому зазначений гетеролопчний антиген здатний індукувати захисну або терапевтичну імунну відповідь у хребетного проти зазначеного іншого патогену 3 Вакцина за п 1 або п 2, яка відрізняється тим, що бактерія вибрана з групи, яка складається з В abortus, В melitensis В suisTaB cams 4 Вакцина за п 1 або п 2 яка відрізняється тим що Brucella являє собою В abortus 5 Вакцина за п 1 або п 2, яка відрізняється тим, що Brucella являє собою В abortus штам RB51 6 Вакцина за будь-яким з пп 1 5 , яка відрізня­ ється тим, що принаймні один ген являє собою ген Cu/Zn SOD 7 Вакцина за п 6, яка відрізняється тим, що ген Cu/2n SOD одержаний з геномної бібліотеки р и с і 9 В abortus штаму 2308 8 Вакцина за будь-яким з пп 1-5, яка відрізняєть­ ся тим, що принаймні один ген є одним або двома з гену GroES та гену GroEL 9 Вакцина за п 8, яка відрізняється тим, що ген GroES та ген GroEL одержують з геномної бібліо­ теки pUC19 В abortus штаму 2308 10 Вакцина за будь-яким з пп 1-9, яка відрізня­ ється тим, що хребетний належить до роду бича­ чих 11 Атенуйований або авірулентний варіант В abortus штаму RB51, що надекспресує принаймні один гомологічний антиген, кодоааний принаймні одним геном з зазначеного штаму В abortus при­ чому вказаний принаймні один антиген здатний стимулювати захисну або імунну відповідь проти бруцельозу 12 Атенуйований чи авірулентний варіант В abortus штаму RB51 за п 11, який відрізняється тим, що принаймні один гомологічний антиген ко­ дується принаймні одним геном вибраним з групи, що включає ген Cu/Zn SOD, ген GroES та ген GroEL 13 Атенуйований чи авірулентний варіант В abortus штаму RB51 за п 11 який відрізняється тим, що атенуйований чи авірулентний штам В abortus RB51 додатково експресує один або біль­ ше гетерологічних антигенів від принаймні одного іншого патогену, причому зазначений гетерологічний антиген здатний індукувати захисну або тера­ певтичну імунну відповідь у хребетного проти за­ значеного ІНШОГО патогену 14 Спосіб імунізації, профілактики або лікування хребетного у випадку ризику або страждаючого від бруцельозу, який відрізняється тим, що спосіб включає введення ефективної кількості вакцини де зазначена вакцина включає атенуйований чи авірулентний штам іншої патогенної бактерії роду Brucella, що надекспресує принаймні один гомоло­ гічний антиген, кодований принаймні одним геном з зазначеної бактерії та де принаймні один анти­ ген здатний індукувати захисну або терапевтичну імунну ВІДПОВІДЬ у хребетного проти бруцельозу 15 Спосіб за п 14. який відрізняється тим, що атенуйований або авірулентний штам додатково з експресує один або більше гетерологічних антиге­ нів від принаймні одного іншого патогену, причому зазначений гетеролопчний антиген здатний інду­ кувати захисну або терапевтичну імунну відповідь у хребетного проти зазначеного іншого патогену 16 Спосіб за п. 14 або п. 15, який відрізняється тим, що вказаний принаймні один ген являє собою ген Cu/Zn SOD В. abortus штаму RB51 17. Спосіб за n 16, який відрізняється тим, що ген Cu/Zn SOD одержують з геномної бібліотеки р и с і 9 В abortus штаму 2308. 18 Спосіб за п 16, який відрізняється тим, що вказаний принаймні один ген є одним чи двома з гену GroES та гену GroEL В. abortus штаму RB51 19 Спосіб за п 18, який відрізняється тим, що ген GroES та ген GroEL одержують з геномної біб­ ліотеки pUC19 В abortus штаму 2308 20. Споаб за будь-яким з пп 14-19, який відрізня­ ється тим, що хребетний є людиною 21 Спосіб імунізації, профілактики або лікування хребетного у випадку ризику або страждаючого від бруцельозу, який відрізняється тим, що включає наступні стадії а) екстрагування дезоксирибонуклеїнової кислоти з Brucella, 9 4 б) ідентифікацію в дезоксирибонуклеїновій КИСЛОТІ принаймні ОДНОГО гена, що кодує принаймні один антиген, де зазначений принаймні один антиген є здатним стимулювати захисний імунітет проти Brucella; в) інсерцію вказаного принаймні одного гену в мультикопійну ппазміду, здатну до реплікації та екс­ преси в Brucella; г) трансформування атенуйованого або авірулентного штаму ІНШОЇ патогенної бактерії роду Brucella за допомогою плазміди з утворенням вакцини, і д) введення ефективної КІЛЬКОСТІ вказаної' вакцини хребетному 22. Спосіб за п. 21, який відрізняється тим, що Brucella вибирають з групи, яка включає В abortus, В. melitensis, В SUIS, В ovis, В neotomae та В cams 23 Спосіб за п 22, який відрізняється тим, що Brucella являє собою В abortus штам RB51 24. Спосіб за будь-яким з пп 21-23, який відрізня­ ється тим, що вказаний принаймні один ген являє собою ген Cu/Zn SOD. 25. Спосіб за п. 24, який відрізняється тмм, що вказаний принаймні один ген є одним чи двома з гену GroES та гену GroEL. Описаний далі винахід був зроблений під час проведення робіт за грантом, одержаним від Міні­ стерства сільського господарства США Отже, уряд США має певні права на цей винахід Даний винахід стосується вакцини, що гіперекспресує ГОМОЛОГІЧНИЙ антиген, способу її одержан­ ня та способу використання вакцини для профіла­ ктики ЧИ лікування хребетного, що страждає від патогену чи знаходиться під його загрозою Вакци­ на походить з атенуйованої чи авірулентної версії патогену І пперекспреє один чи більше генів пато­ гену, тим самим створюючи сильніший імунітет, НІЖ той, що індукується вакциною цього самого патогену без гіперекспресГі гена Рівень техніки Вакцини використовуються для захисту проти хвороб, спричинених патогенами Ці патогени є мікробними організмами, такими як бактерії та віруси, що вражають тварин, включаючи людей Вакцини переважно одержують з патогену шляхом продукування та введення а) атенуйованої чи авірулентної видозміни патогену; б) вбитого пато­ гену, в) екстрагованих захисних антигенів чи сумі­ шей антигенів патогену (гомолопчні антигени); або г) мікроорганізму, що експресує один чи більше захисних антигенів, кодованих клонованими гена­ ми, які походять з мікробного патогену, що відріз­ няється від штаму вакцини (гетерологічні патоге­ ни) Вакцини як для бактерій, так і для вірусів створюють з мікроорганізмів, що експресують один чи більше захисних антигенів, як описали К Jones and М Sheppard, Designer Vaccines. CRC Press (1997) Вакцини призначенні для продукування у реципієнта імунну відповідь, що складається з принаймні однієї антитіло-медійованої чи Т клітина-медійованої імунної' відповіді, тим самим попереджаючи наступну інфекцію патогеном чи знищуючи наявну патогенну інфекцію Зокрема, вакцини проти факультативних внутрішньоклітин­ них патогенів, ЯКІ розвиваються всередині клітин інфікованого хазяїна, повинні індукувати сильну та адекватну клітинно-медійовану імунну відповідь. Навпаки, вакцини проти облігатних позаклітинних патогенів мають індукувати адекватну антитіломедійовану імунну відповідь Часто, незалежно від патогену, належним чином поєднані антитіло- та клітинно-медійована імунні відповіді забезпечують достатній захист чи звільнення від інфекції Для того, щоб досягти цього захисту чи звільнення ВІД інфекції, вакцини можуть експресувати один чи більше ГОМОЛОГІЧНИХ антигенів, гетерологічних ан­ тигенів, або їх комбінацію Вакцини можуть бути введені хребетним як для профілактики, так і для лікування інфекцм, спричиненої патогенами. Отже, вакцини часто вводять для попередження поширення хвороби, що спричинюється патогеном Зокрема, стадних тварин, таких як корови, кози, вівці та свині, часто вакцинують для того, щоб попередити поширення хвороби ПОМІЖ членами стада Крім того, оскільки деякі хвороби можуть переноситися МІЖ хребет­ ними, включаючи перенесення між різними твари­ нами та МІЖ тваринами та людьми, вакцини вико­ ристовують для попередження поширення хвороби МІЖ різними видами, звичайно шляхом введення інфікованій тварині та неінфікованим тваринам у найближчому оточенні Однак, як про­ філактичний заход, можуть бути також вакцинова­ ні ІНШІ тварини в ЦІЙ місцевості, які мають меншу ймовірність контакту з хворобою. Наприклад, інфікована корова та Ті ще неінфі