Кон’югати макролідних сполук, специфічних для імунних клітин, з протизапальними сполуками для покращеного клітинного націлювання протизапальної терапії, спосіб їх одержання (варіанти)

1. Сполука формули І UA (21) 2003076135 (22) 03.01.2002 (24) 15.11.2006 (86) PCT/HR02/00001, 03.01.2002 (31) P20010018A (32) 09.01.2001 (33) HR (46) 15.11.2006, Бюл. № 11, 2006 р. (72) Мерчеп Младен , HR, Месіч Мілан , HR, Томасковіч Лінда , HR, Комач Маріяна , HR, Хрвачіч Бошка , HR, Марковіч Стрібор , HR (73) ПЛІВА-ІСТРАЗІВАЦКІ ІНСТІТУТ Д.О.О., HR (56) ROMO D.; ET AL: "Total Synthesis and Immunosuppressive Activity of (-)-Pateamine A and Related Compounds: Implementation of beta-Lactam Based Macrolzyztion"; JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, 1998, Vol. 120, No. 47, P.: 12237-12254; XP002200620 WO, 97/41255, A1, 03.11.1997 DATABASE CA 'Online! CHEMICAL ABSTRACTS SERVICE, COLUMBUS, OHIO, US; GRIFFITH ERIC C. ET AL: "Yeast three-hybrid system for detecting ligand-receptor interactions", retrieved from STN Database accession no. 135:147811 XP002200621 DATABASE CA 'Online! CHEMICAL ABSTRACTS SERVICE, COLUMBUS, OHIO, US; SCHENTAG J.J.; ET AL: "Relationships between serum, intracellular, and infection site concentrations of macrolide and 2 (19) 1 3 77166 4 R4 може бути будь-якою алкільною групою, що має 1-4 атомів вуглецю, більш прийнятно, метильною групою; , де М являє собою макролідну субодиницю, яка має властивість накопичуватись в запальних клітинах і яку вибирають з групи, що складається з: R2 O OR1 N O O O HO R4 R5 O O , М1 де R1 є воднем чи метильною групою, R2 i R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR’R”, де R’ та R” можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури O O R4 O R5 OH OCH3 , R4 i R5 можуть також разом утворювати карбонільну групу, за умови, що тоді R1 є метильною групою, R2 R3 HO N O , M3 де R1 є воднем чи метильною групою, R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR'R", де R' та R" можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури O O OH OCH3 , R4 i R5 можуть також разом утворювати карбонільну групу, за умови, що тоді R1 є метильною групою; R2 O R4 O O OR1 HO R3 HO R3 HO N R2 O R3 HO N OH OR1 O O HO O R4 OH OR1 O O HO O O O , M2 де R1 є воднем чи метильною групою, R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR’R”, де R’ та R” можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, O , M4 де R1 є воднем чи метильною групою, R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR’R”, де R’ та R” можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури 5 O 77166 6 R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури O O OH OCH3 ; OH OCH3 R2 R5 , R5 може бути будь-якою алкільною групою, що має 1-4 атомів вуглецю, більш прийнятно, метильною групою, і А означає протизапальну стероїдну субодиницю, вибрану з групи, що складається з: R3 O N OH O OR1 O O HO O Z R4 O O HO H3 C , М5 де R1 є воднем чи метильною групою, R2 i R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR’R”, де R’ та R” можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури: O CH3 O C R1 R1 " R2 X1 O X2 , A1 де Z означає кисень або NH групу, R1 являє собою водень або гідроксильну чи Oацильну чи О-алкільну групу, R2 є воднем чи метильною групою, яка може бути орієнтована у чи положенні, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром, 1,2-положення може бути подвійним або одинарним вуглець-вуглецевим зв'язком, CH2OR2 OH OCH3 , R5 може бути будь-якою алкільною групою, що має 1-4 атомів вуглецю, більш прийнятно, метильною групою, CH3 HO CH3 C O R1 Z C O HN O R2 R5 N O R3 R1O O X1 OH O O HO O R4 O , M6 де R1 є воднем чи ацетильною групою, R2 i R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR’R”, де R’ та R” можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, X2 , А2 де Z означає кисень або NН групу, R1 являє собою водень або гідроксильну чи Oацильну чи О-алкільну групу, R2 є воднем чи ацильною групою, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром, 7 77166 8 або її стереоізомерні форми, де 1,2-положення означає насичений або ненасичений подвійний зв'язок, R1 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-4 атомами вуглецю, R2 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-10 атомами вуглецю, за умови, що R1 і R2 одночасно не є воднем, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром; Z CH3 HO CH3 O C O O CR1R2 X1 O X2 A3 або її стереоізомерні форми, де 1,2-положення означає насичений або ненасичений подвійний зв'язок, де Z є киснем або NH групою, R1 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-4 атомами вуглецю, R2 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-10 атомами вуглецю, за умови, що R1 і R2 одночасно не є воднем, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром; O Z C CH3 HO CH3 C O O O CR1R2 R1 X1 O X2 А4 або її стереоізомерні форми, де 1,2-положення означає насичений або ненасичений подвійний зв'язок, де Z є киснем або NH групою, R1 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-4 атомами вуглецю, R2 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-10 атомами вуглецю, за умови, що R1 і R2 одночасно не є воднем, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром; O R3 O CH CH3 HO CH3 X2 , A6 де Z означає кисень або NH групу, R1 являє собою водень або гідроксильну групу з вільним воднем або гідроксильну групу чи О-ацильну чи О-алкільну групу, R2 є воднем чи метильною групою, яка може бути орієнтована у чи положенні, R3 є воднем або радикалом кислоти, що містить 14 атоми вуглецю, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром, 1,2-положення може бути подвійним або одинарним вуглець-вуглецевим зв'язком, а L означає лінкер, що зв'язує субодиницю М з А, або її фармацевтично прийнятна сіль чи сольват. 2. Сполуки, їх солі та сольвати структури І , які відрізняються тим, що М є макролідною субодиницею формул R2 R3 HO OR1 O HO O O O O HO CR1R2 R1 R4 R5 O O X1 O X2 R2 X1 O HO CH3 " O N C R1 R1 O CH3 Z C A5 , М1 де R1 є воднем чи метильною групою, R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або 9 77166 10 R2 є аміногрупою субструктури -NR’R”, O де R’ та R” можуть бути, незалежно один від одноO го, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, OH R4 є гідроксильною або кладинозильною групою OCH3 структури , R4 і R5 можуть також разом утворювати карбонільну групу, за умови, що тоді R1 є метильною груO пою; O R2 OH OCH3 , R4 і R5 можуть також разом утворювати карбонільну групу, за умови, що тоді R1 є метильною групою; OH O OR1 O R4 O R3 HO N OH OR1 O O HO O O O , M2 де R1 є воднем чи метильною групою, R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR’R”, де R' та R” можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 може бути будь-якою алкільною групою, що має 1-4 атомів вуглецю, більш прийнятно, метильною групою; R2 O , M4 де R1 є воднем чи метильною групою, R2 i R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR’R”, де R’ та R” можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури O O OH OCH3 R5 O OH OR1 O O O O O R3 O N OR1 N ; R2 R3 HO O HO R2 R4 R3 HO N O O HO R4 O R5 , M3 де R1 є воднем чи метильною групою, R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR’R”, де R’ та R” можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури R4 O , М5 де R1 є воднем чи метильною групою, R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR’R”, де R’ та R” можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури 11 O 77166 12 Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром, 1,2-положення може бути подвійним або одинарним вуглець-вуглецевим зв'язком, O CH2OR2 OH OCH3 , R5 може бути будь-якою алкільною групою, що має 1-4 атомів вуглецю, більш прийнятно, метильною групою; CH3 HO CH3 O C R1 Z C O X1 HN O R5 N O R2 X2 R3 R1O OH O O O HO O R4 O , M6 де R1 є воднем чи ацетильною групою, R2 i R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR’R”, де R’ та R” можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, щотоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури O O OH OCH3 , R5 може бути будь-якою алкільною групою, що має 1-4 атомів вуглецю, більш прийнятно, метильною групою; і А є протизапальною субодиницею формул: , А2 де Z означає кисень або NН групу, R1 являє собою водень або гідроксильну чи О-ацильну чи Оалкільну групу, R2 є воднем чи ацильною групою, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром, Z HO CH3 CH3 O O X2 A3 або їх стереоізомерні форми, де 1,2-положення означає насичений або ненасичений подвійний зв'язок, де Z є киснем або NH групою, R1 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-4 атомами вуглецю, R2 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-10 атомами вуглецю, за умови, що R1 і R2 одночасно не є воднем, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром; Z C O R1 R1 " R2 CH3 HO CH3 X1 O CR1R2 O O C O C X1 Z HO H3 C CH3 C O O O CR1R2 R1 X1 O X2 , A1 де Z означає кисень або NН групу, R1 являє собою водень або гідроксильну чи О-ацильну чи Оалкільну групу, R2 є воднем чи метильною групою, яка може бути орієнтована у чи положенні, Х1 є воднем або галогеном, X2 А4 або їх стереоізомерні форми, де 1,2-положення означає насичений або ненасичений подвійний зв'язок, де Z є киснем або NH групою, R1 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-4 атомами вуглецю, 13 77166 14 R2 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим во містить водень, або С1-С4 алкільною або аривуглеводневим ланцюжком з 1-10 атомами вуглельною групою, або R1, R2, R3, R4, R5, R6 можуть цю, за умови, що R1 і R2 одночасно не є воднем, також разом утворювати один чи кілька подвійних Х1 є воднем або галогеном, чи потрійних зв'язків у ланцюжку, таким чином Х2 є воднем або галогеном, утворюючи алкеніл або алкініл, за умови, що припричому галоген означає фтор, хлор або бром; наймні одна метиленова група розташована в положенні, в якому зв'язувальна група L зв'язана з субодиницею А. 3. Сполука та сіль за будь-яким з пп. 1-2, які відріO зняються тим, що макролідна субодиниця М структури І подана загальною структурою М1, O де C CH3 R1 є метильною групою, HO O R2 є диметиламіногрупою, CR1R2 R1 CH3 за умови, що тоді R3 є воднем, O R4 означає кладинозу, R4 і R5 можуть також разом утворювати карбонільX1 ну групу, O і стероїдна субодиниця структури І являє собою одну з структур А1 - А4 і А6, X2 A5 де А1 визначена у пп. 1 і 2, або їх стереоізомерні форми, де 1,2-положення де Z являє собою кисень або NH групу, означає насичений або ненасичений подвійний R1 являє собою гідроксильну групу, яка може мати зв'язок, вільний водень або додатково алкілована алкільR1 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим ною групою R', що має 1-4 атомів вуглецю, більш вуглеводневим ланцюжком з 1-4 атомами вуглеприйнятно, метильною групою, цю, R2 є воднем чи метильною групою, R2 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим X1 є воднем або фтором, вуглеводневим ланцюжком з 1-10 атомами вуглеХ2 є воднем, цю, за умови, що R1 і R2 одночасно не є воднем, де А2 визначена у пп. 1 і 2, Х1 є воднем або галогеном, де Z являє собою кисень або NН групу, Х2 є воднем або галогеном, R1 є воднем, причому галоген означає фтор, хлор або бром; R2 є воднем, X1 є фтором, O Х2 є воднем, Z C де А3 визначена у пп. 1 і 2, R3 O де Z являє собою кисень або NН групу, CH 1,2-положення є ненасиченим, R1 і R2 являють собою метильні групи, CH3 R1 HO Х1 є фтором, CH3 R2 Х2 є фтором, де А4 визначена у пп. 1 і 2, X1 де Z являє собою кисень або NH групу, O 1,2-положення є ненасиченим, R1 і R2 являють собою метильні групи, X2 , A6 Х1 є фтором, де Z означає кисень або NH групу, R1 являє собою Х2 є фтором, водень або гідроксильну групу з вільним воднем де А6 визначена у пп. 1 і 2, або гідроксильну групу чи О-ацильну чи О-алкільну де Z являє собою кисень або NH групу, групу, 1,2-положення є подвійним вуглець-вуглецевим R2 є воднем чи метильною групою, яка може бути зв'язком, R1 є гідроксильною групою, орієнтована у чи положенні, R3 є воднем або радикалом кислоти, що містить 1R2 є воднем чи метильною групою у або 4 атоми вуглецю, положенні, більш прийнятно, в положенні, X1 є воднем або галогеном, R3 є воднем, Х2 є воднем або галогеном, Х1 є воднем, фтором або хлором, причому галоген означає фтор, хлор або бром, Х2 є воднем або фтором, 1,2-положення може бути подвійним або одинарде ланцюжок L такий, як визначено у п. 2, ним вуглець-вуглецевим зв'язком, де R1 - R4 є воднем, і n дорівнює 1-10. і L є ланцюжком формули 4. Сполука та сіль за будь-яким з пп. 1-2, які відрі-CR1R2(CR3R4)nCR5R6-, зняються тим, що макролідна субодиниця М струде R1, R2, R3, R4, R5, R6 можуть бути воднем, C1ктури І подана загальною структурою М2, C4-алкілом, арилом, метокси, галогеном, гідрокси де або меркапто групами, де n є 1-10, і одна чи кілька R1 є воднем, -СR3R4-груп можуть бути заміщені киснем, сіркою, R2 є диметиламіногрупою, ароматичним ядром чи аміногрупою, що додаткоR1 " 15 77166 16 за умови, що тоді R3 є воднем, R1 є воднем, R4 є метильною групою, R2 є воднем, і стероїдна субодиниця структури І являє собою Х1 є фтором, одну з структур А1 - А4 і А6, Х2 є воднем, де А1 визначена у пп. 1 і 2, де А3 визначена у пп. 1 і 2, де Z являє собою кисень або NH групу, де Z являє собою кисень або NH групу, R1 являє собою гідроксильну групу, яка може мати 1,2-положення є ненасиченим, вільний водень або додатково алкілована алкільR1 і R2 являють собою метильні групи, ною групою R', що має 1-4 атомів вуглецю, більш Х1 є фтором, прийнятно, метильною групою, Х2 є фтором, R2 є воднем чи метильною групою, де А4 визначена у пп. 1 і 2, Х1 є воднем або фтором, де Z являє собою кисень або NH групу, Х2 є воднем, 1,2-положення є ненасиченим, де А2 визначена у пп. 1 і 2, R1 і R2 являють собою метильні групи, де Z являє собою кисень або NH групу, Х1 є фтором, R1 є воднем, Х2 є фтором, R2 є воднем, де А6 визначена у пп. 1 і 2, Х1 є фтором, де Z являє собою кисень або NH групу, Х2 є воднем, 1,2-положення є подвійним вуглець-вуглецевим де А3 визначена у пп. 1 і 2, зв'язком, де Z являє собою кисень або NH групу, R1 є гідроксильною групою, 1,2-положення є ненасиченим, R2 є воднем чи метильною групою у або R1 і R2 являють собою метильні групи, положенні, більш прийнятно, в положенні, X1 є фтором, R3 є воднем, Х2 є фтором, Х1 є воднем, фтором або хлором, де А4 визначена у пп. 1 і 2, Х2 є воднем або фтором, де Z являє собою кисень або NН групу, де ланцюжок L такий, як визначено у п. 2, 1,2-положення є ненасиченим, де R1 - R4 є воднем, і n дорівнює 1-10. R1 і R2 являють собою метильні групи, 6. Сполука та сіль за будь-яким з пп. 1-2, які відріХ1 є фтором, зняються тим, що макролідна субодиниця М струХ2 є фтором, ктури І подана загальною структурою М4, де А6 визначена у пп. 1 і 2, де де Z являє собою кисень або NH групу, R1 є воднем, 1,2-положення є подвійним вуглець-вуглецевим R2 є диметиламіногрупою, зв'язком, за умови, що тоді R3 є воднем, R1 є гідроксильною групою, R4 є кладинозою або гідроксильною групою, R2 є воднем чи метильною групою у або і стероїдна субодиниця структури І являє собою положенні, більш прийнятно, в положенні, одну з структур А1 - А4 і А6, R3 є воднем, де А1 визначена у пп. 1 і 2, Х1 є воднем, фтором або хлором, де Z являє собою кисень або NH групу, Х2 є воднем або фтором, R1 являє собою гідроксильну групу, яка може мати де ланцюжок L такий, як визначено у п. 2, вільний водень або додатково алкілована алкільде R1 - R4 є воднем, і n дорівнює 1-10. ною групою R’, що має 1-4 атомів вуглецю, більш 5. Сполука та сіль за будь-яким з пп. 1-2, які відріприйнятно, метильною групою, зняються тим, що макролідна субодиниця М струR2 є воднем чи метильною групою, ктури І подана загальною структурою М3, Х1 є воднем або фтором, де Х2 є воднем, R1 є воднем, де А2 визначена у пп. 1 і 2, R2 є диметиламіногрупою, де Z являє собою кисень або NH групу, за умови, що тоді R3 є воднем, R1 є воднем, R4 і R5 можуть разом утворювати карбонільну груR2 є воднем, пу, Х1 є фтором, і стероїдна субодиниця структури І являє собою Х2 є воднем, одну з структур А1 - А4 і А6, де А3 визначена у пп. 1 і 2, де А1 визначена у пп. 1 і 2, де Z являє собою кисень або NH групу, де Z являє собою кисень або NН групу, 1,2-положення є ненасиченим, R1 являє собою гідроксильну групу, яка може мати R1 і R2 являють собою метильні групи, вільний водень або додатково алкілована алкільХ1 є фтором, ною групою R’, що має 1-4 атомів вуглецю, більш Х2 є фтором, прийнятно, метильною групою, де А4 визначена у пп. 1 і 2, R2 є воднем чи метильною групою, де Z являє собою кисень або NН групу, Х1 є воднем або фтором, 1,2-положення є ненасиченим, Х2 є воднем, R1 і R2 являють собою метильні групи, де А2 визначена у пп. 1 і 2, Х1 є фтором, де Z являє собою кисень або NH групу, Х2 є фтором, 17 77166 18 де А6 визначена у пп. 1 і 2, де де Z являє собою кисень або NH групу, R1 є воднем, 1,2-положення є подвійним вуглець-вуглецевим R2 є диметиламіногрупою, зв'язком, за умови, що тоді R3 є воднем, R1 є гідроксильною групою, R4 є кладинозою або гідроксильною групою, R5 є метильною групою, R2 є воднем чи метильною групою у або і стероїдна субодиниця структури І являє собою положенні, більш прийнятно, в положенні, одну з більш прийнятних структур А1 - А4 і А6, R3 є воднем, де А1 визначена у пп. 1 і 2, Х1 є воднем, фтором або хлором, де Z являє собою кисень або NH групу, Х2 є воднем або фтором, R1 являє собою гідроксильну групу, яка може мати де ланцюжок L такий, як визначено у п. 2, вільний водень або додатково алкілована алкільде R1 - R4 є воднем, і n дорівнює 2-10. ною групою R', що має 1-4 атомів вуглецю, більш 7. Сполука та сіль за будь-яким з пп. 1-2, які відріприйнятно, метильною групою, зняються тим, що макролідна субодиниця М струR2 є воднем чи метильною групою, ктури І подана загальною структурою М5, Х1 є воднем або фтором, де Х2 є воднем, R1 є воднем, де А2 визначена у пп. 1 і 2, R2 є диметиламіногрупою, де Z являє собою кисень або NH групу, за умови, що тоді R3 є воднем, R1 є воднем, R4 є кладинозою або гідроксильною групою, R2 є воднем, R5 є метильною групою, Х1 є фтором, і стероїдна субодиниця структури І являє собою Х2 є воднем, одну з структур А1 - А4 і А6, де А3 визначена у пп. 1 і 2, де А1 визначена у пп. 1 і 2, де Z являє собою кисень або NH групу, де Z являє собою кисень або NH групу, 1,2-положення є ненасиченим, R1 являє собою гідроксильну групу, яка може мати R1 і R2 являють собою метильні групи, вільний водень або додатково алкілована алкільХ1 є фтором, ною групою R’, що має 1-4 атомів вуглецю, більш Х2 є фтором, прийнятно метильною групою, де А4 визначена у пп. 1 і 2, R2 є воднем чи метильною групою, де Z являє собою кисень або NH групу, Х1 є воднем або фтором, 1,2-положення є ненасиченим, Х2 є воднем, R1 і R2 являють собою метильні групи, де А2 визначена у пп. 1 і 2, Х1 є фтором, де Z являє собою кисень або NH групу, Х2 є фтором, R1 є воднем, де А6 визначена у пп. 1 і 2, R2 є воднем, де Z являє собою кисень або NH групу, Х1 є фтором, 1,2-положення є подвійним вуглець-вуглецевим Х2 є воднем, зв'язком, де А3 визначена у пп. 1 і 2, R1 є гідроксильною групою, де Z являє собою кисень або NH групу, R2 є воднем чи метильною групою у або 1,2-положення є ненасиченим, R1 і R2 являють собою метильні групи, Х1 є фтором, Х2 є фтором, де А4 визначена у пп. 1 і 2, де Z являє собою кисень або NH групу, 1,2-положення є ненасиченим, R1 і R2 являють собою метильні групи, Х1 є фтором, Х2 є фтором, де А6 визначена у пп. 1 і 2, де Z являє собою кисень або NH групу, 1,2-положення є подвійним вуглець-вуглецевим зв'язком, R1 є гідроксильною групою, R2 є воднем чи метильною групою у або положенні, більш прийнятно, в положенні, R3 є воднем, Х1 є воднем, фтором або хлором, Х2 є воднем або фтором, де ланцюжок L такий, як визначено у п. 2, де R1 - R4 є воднем, і n дорівнює 2-10. 9. Сполука 1 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою положенні, більш прийнятно, в положенні, R3 є воднем, Х1 є воднем, фтором або хлором, Х2 є воднем або фтором, де ланцюжок L такий, як визначено у п. 2, де R1 - R4 є воднем, і n дорівнює 2-10. 8. Сполука та сіль за будь-яким з пп. 1-2, які відрізняються тим, що макролідна субодиниця М структури І подана загальною структурою М6, O N O HO NH OH HO HO N OH O O OH O O OH O Cl F O O . 10. Сполука 2 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою 19 77166 20 N N HO N O NH OH HO O O OH O O O OH O HO O OH HO HO N NH OH HO OH OH O O O OH O O O O O . 11. Сполука 3 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою O O F . 16. Сполука 8 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою N HO N O NH OH OCH3 HO N O OH O HO NH OH O OH OH HO O O HO N O O O OH O HO O O O O O . 12. Сполука 4 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою OH O O O . 17. Сполука 9 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою N N O NH HO N O OH O NH O HO OH O HO O OH OH HO OH F O OH O HO O HO N O O OH O O O O . 13. Сполука 5 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою N F O O O F . 18. Сполука 10 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою N O NH HO N O O OH HO O HO OH O HO O O H N O N O O O OH OH HO O O OH O OH O HO O . 14. Сполука 6 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою N O F . 19. Сполука 11 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою O O HO O H N O O O N O OH OH HO N OH O O OH HO O . 15. Сполука 7 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою HO N O OH O HO HO F NH OH O O OH O O Cl O O O . 20. Сполука 12 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою 21 77166 22 N O HO N NH O O OH OH O N O OH HO O HO O O O OH O OH F O O OH OH HO OH O O . 21. Сполука 13 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою HO N NH O O F . 26. Сполука 18 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою N N O HO HO N NH O OH OH O O HO O O O OH O OH O F O O OH OH HO O O O HO HO N NH OH O F . 22. Сполука 14 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою O O . 27. Сполука 19 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою N O HO O O HO N NH O OH O O O OH HO N HO O OH OH HO OH F O F . 23. Сполука 15 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою O OH O O F O HO N NH O O . 28. Сполука 20 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою N N O HO NH O OH O O OH O HO HO O HO OH N HOHC O OH OH HO NH O HO N O O OH OH O OH Cl O O O F . 24. Сполука 16 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою O . 29. Сполука 21 за будь-яким з пп. 1, 2 і 4, яка характеризується формулою OH N N O HO NH OH HO O HO N O OH O OH OH O OH O O O O O O OH O O O O F . 25. Сполука 17 за будь-яким з пп. 1, 2 і 6, яка характеризується формулою O HO OH F O . 23 77166 30. Сполука 22 за будь-яким з пп. 1, 2 і 7, яка характеризується формулою 24 N O O N O OH OH O O O O OH O OH O O O O HO O HO N OH O O N OH OH O OH O O HO O F HO O O F . 31. Сполука 23 за будь-яким з пп. 1, 2 і 7, яка характеризується формулою N F . 35. Сполука 27 за будь-яким з пп. 1, 2 і 7, яка характеризується формулою OH N O O O O OH O O OH O O O O O O O HO N OH OH O OH O O HO O F N OH OH O HO . 32. Сполука 24 за будь-яким з пп. 1, 2 і 7, яка характеризується формулою O O N OH O O O O OH O HO Cl O F . 36. Сполука 28 за будь-яким з пп. 1, 2 і 3, яка характеризується формулою O N O O O HO O N OH HO OH OCH3 O O O O HO Cl N O O HO OH OH O O F . 33. Сполука 25 за будь-яким з пп. 1, 2 і 7, яка характеризується формулою N O O O OH O HO O OH O OH N OH O HO O R2 R3 OH O . 34. Сполука 26 за будь-яким з пп. 1, 2 і 7, яка характеризується формулою HO . 37. Спосіб одержання сполук загальної структури І, де всі символи і радикали мають значення, наведені у пп. 1 і 2, який відрізняється тим, що сполуки одержують з відповідної стероїдної частини, поданої структурними формулами А1 - А4 та А6, де всі радикали та символи мають значення, наведені для субструктур А1 - А4 та А6, і макролідної проміжної сполуки, поданої структурною формулою М11 O F O F O L HO O O N NH2 R1O OH R4 O O , M11 шляхом з'єднання їх через відповідні ланцюжки, подані структурою L, де для формування амідного зв'язку з карбонових кислот стероїдних субодиниць, поданих формулами А1 - А4 і А6, використовують активацію карбоксидіімідом та бензотриазолом (НОВТ) в безводному дихлорметані у 25 77166 26 присутності основи, такої як триетиламін, при кімпроміжної сполуки, поданої структурною формунатній температурі у потоці придатного інертного лою М10 (CH2)nBr газу. R2 38. Спосіб одержання сполук загальної структури І, де всі символи і радикали мають значення, навеO R3 HO дені у пп. 1 і 2, який відрізняється тим, що сполуN ки одержують з відповідної стероїдної частини, OR1 поданої структурними формулами А1 - А4 та А6, O O HO де всі радикали та символи мають значення, наведені для субструктур А1 - А4 та А6, і макролідної HO проміжної сполуки, поданої структурною формуR4 лою М7 O R2 O R5 R3 O N OH O OR1 O HO O R4 O , M7 шляхом з'єднання їх через відповідні ланцюжки, подані структурою L, де для формування складноефірного зв'язку з карбонових кислот стероїдних субодиниць, поданих формулами А1 - А4 і А6, проводять реакцію з К2СО3 в безводному диметилформаміді у потоці придатного інертного газу. 39. Спосіб одержання сполук загальної структури І, де всі символи і радикали мають значення, наведені у пп. 1 і 2, який відрізняється тим, що сполуки одержують з відповідної стероїдної частини, поданої структурними формулами А1 - А4 та А6, де всі радикали та символи мають значення, наведені для субструктур А1 - А4 та А6, і макролідної проміжної сполуки, поданої структурною формулою М9 , M10 шляхом з'єднання їх через відповідні ланцюжки, подані структурою L, де для формування складноефірного зв'язку з карбонових кислот стероїдних субодиниць, поданих формулами А1 - А4 і А6, проводять реакцію з К2СО3 в безводному диметилформаміді у потоці придатного інертного газу. 41. Спосіб одержання сполук загальної структури І, де всі символи і радикали мають значення, наведені у пп. 1 і 2, який відрізняється тим, що сполуки одержують з відповідної стероїдної частини, поданої структурними формулами А1 - А4 та А6, де всі радикали та символи мають значення, наведені для субструктур А1 - А4 та А6, де синтез здійснюють шляхом змішування стероїдної проміжної сполуки А8 і макролідної проміжної сполуки, поданої структурною формулою М12 R2 O R2 OH OR1 O O HO O (CH2)nBr O O O O O N N O R4 R5 O O O R3 O N R3 HO OR1 O R4 R5 O (CH2)nBr , М9 шляхом з'єднання їх через відповідні ланцюжки, подані структурою L, де для формування складноефірного зв'язку з карбонових кислот стероїдних субодиниць, поданих формулами А1 - А4 і А6, проводять реакцію з К2СО3 в безводному диметилформаміді у потоці придатного інертного газу. 40. Спосіб одержання сполук загальної структури І, де всі символи і радикали мають значення, наведені у пп. 1 і 2, який відрізняється тим, що сполуки одержують з відповідної стероїдної частини, поданої структурними формулами А1 - А4 та А6, де всі радикали та символи мають значення, наведені для субструктур А1 - А4 та А6, і макролідної , M12 в ацетонітрилі при температурі від 20 до 60°С у потоці придатного інертного газу. 42. Спосіб одержання сполук загальної структури І, де всі символи і радикали мають значення, наведені у пп. 1 і 2, який відрізняється тим, що сполуки одержують з відповідної стероїдної частини, поданої структурними формулами А1 - А4 та А6, де всі радикали та символи мають значення, наведені для субструктур А1 - А4 та А6, де естерифікаційний синтез здійснюють, використовуючи стероїдну проміжну сполуку А9 O O CH3 HO CH3 C (CH2)nCOOH O O O CR1R2 X1 O X2 A9 27 77166 28 і макролід, що має вільну реактивну гідроксильну ними поліпами, кишковими захворюваннями, тагрупу, кими як хвороба Крона, колітами, виразковими колітами, дерматологічними запаленнями, такими як екзема, псоріаз, алергічний дерматит, нейродерматит, свербіж, кон'юнктивітами і ревматоїдними артритами. 46. Застосування сполук за пп. 1-36 при лікуванні , та профілактиці запальних станів та захворювань, шляхом змішування їх з півалоїлхлоридом як актиспричинених надлишковим нерегульованим проватором при кімнатній температурі у присутності дукуванням цитокінів і посередників запалення, в основи, такої як триетиламін, у потоці придатного якому придатні фармацевтичні препарати можуть інертного газу. вводитись топічно, парентерально або перора43. Застосування сполук за пп. 1 - 36 в медицині та льно. ветеринарії. 47. Застосування сполук за пп. 1 - 36 як активних 44. Застосування сполук за пп. 1-36 при лікуванні речовин у фармацевтичних препаратах для перопацієнтів з запальними станами та захворюванрального, ректального, парентерального, підшкірнями. ного та інгаляційного введення людям і тваринам. 45. Застосування сполук за пп. 1 - 36 при лікуванні пацієнтів з астмою, алергічними ринітами, назаль Даний винахід стосується нових протизапальних сполук загальної структури І, їх солей і сольватів, способів їх приготування та використання цих сполук у лікуванні запальних захворювань та станів людей і тварин. Протизапальні ліки можна поділити на стероїдні та нестероїдні. Стероїдні протизапальні сполуки все ще є найбільш ефективними для лікування запальних захворювань та станів, таких як астма, хронічне обструктивне легеневе захворювання, запальні назальні захворювання, такі як алергічні риніти, назальні поліпи, кишкові захворювання, такі як хвороба Крона, коліт, виразковий коліт, дерматологічні запалення, такі як екзема, псоріаз, алергічний дерматит, нейродерматит, свербіж, кон'юнктивіт і ревматоїдний артрит. На додаток до відмінної активності та ефективності ліки цього типу також мають численні несприятливі дії, наприклад, на обмін вуглеводів, резорбцію кальцію, секрецію ендогенних кортикостероїдів, а також фізіологічні функції гіпофізу, кори надниркових залоз і тимуса. Розроблені до цього часу стероїди високо ефективні проти запальних станів і процесів, оскільки вони інгібують багато медіаторів запалення, а їх системні несприятливі ефекти зменшені. Патентні заявки WО 94/13690, WO 94/14834, WO 92/13873 і WO 92/13872 розкривають так звані "м'які" стероїди або кортикостероїди, що піддаються гідролізу, призначені для місцевого застосування на місці запалення, із зменшеною системною несприятливою дією завдяки нестабільності "м'яких" стероїдів у сироватці: активний стероїд дуже швидко гідролізується в неактивну форму. Проте, ідеальний стероїд, позбавлений несприятливої дії у довгостроковому чи безперервному лікування, яке потрібне у випадку таких захворювань, як астма або хвороба Крона, все ще має бути винайдено. Проводиться інтенсивна робота з пошуку та розробки стероїдів з покращеними терапевтичними характеристиками. Нестероїдні протизапальні ліки різного механізму дії впливають на певні медіатори запалення, таким чином забезпечуючи терапевтичний ефект. Через різницю механізмів дії та різницю в інгібуванні конкретних медіаторів запалення стероїдні та нестероїдні ліки мають різну протизапальну активність, отже за конкретних умов вони використовуються по черзі чи преференційно. На жаль, нестероїдні протизапальні ліки також не є абсолютно специфічними і виявляють несприятливу дію при застосуванні у більших концентраціях або протягом трипалого часу. Відомо, що багато нестероїдних протизапальних ліків діють як інгібітори ендогенного ферменту СОХ-1, що є дуже важливим для підтримання цілісності слизової оболонки шлунку. Таким чином, застосування зазначених ліків спричинює пошкодження слизової оболонки шлунку та кровотечу у численних пацієнтів. Для деяких протизапальних сполук (теофілін) відомо, що їх терапевтичний індекс дуже вузький, а це обмежує їх застосування. Макролідні антибіотики нагромаджуються у різних клітинах організму, особливо у фагоцитних клітинах, таких як мононуклеарні клітини периферичної крові, очеревинних і альвеолярних макрофагах, а також рідкому оточенні бронхоальвеолярного епітелію [Glaude R. P. et al, Antimicrob. Agents Chemother., 33 1989, 277-282; Olsen K. M. et al, Antimicrob. Agents Chemother., 40 1996, 25822585]. Крім того, в літературі описана також відносно слабка запальна дія деяких макролідів. Отже, недавно було описано протизапальну дію похідних еритроміцину [J. Antimicrob. Chemother., 41, 1998, 37-46; WO 00/42055] і похідних азитроміцину [ЕР 0283055]. Протизапальна дія деяких макролідів також відома з досліджень іn vitro та in vivo на лабораторних тваринах, таких як індукований зимосаном перитоніт у мишей [J. Antimicrob. Chemother. 30, 1992, 339-348] та викликане ендотоксином накопичення нейтрофілів у трахеях щурів [J. Immunol. 159, 1997, 3395-4005]. Модулюючий ефект макролідів на цитокіни, такі як інтерлейкін 8 (IL-8) [Am. J. Respir. Crit. Care. Med. 156, 1997, 266271] або інтерлейкін 5 (IL-5) [ЕР 0775489 і ЕР 0771564], також відомий. 29 77166 30 Сполуки структури І відрізняються від досі віпою структури домих сполук своїм новим механізмом дії, що відрізняється селективним накопиченням в органах та клітинах - мішенях у зазначених вище запальних станах та захворюваннях. Така дія нових сполук, представлених структурою І, спричиняється макролідною частиною Μ завдяки зазначеним специфічним фармакокінетичним властивостям. Ці R4 і R5 можуть також разом утворювати карбофармакокінетичні властивості дають змогу сполунільну групу, за умови, що тоді R1 є метильною кам, представленим структурою І, діяти виключно групою; в місці запалення у самих запальних клітинах шляхом інгібування продукування медіаторів запалення. Таким чином, вдається уникнути несприятливого системного впливу як кортикостероїдних, так і нестероїдних протизапальних сполук. Після місцевого застосування молекули швидко накопичуються в запальних клітинах, де вони діють шляхом інгібування продукування цитокінів і хемокінів, а також інших медіаторів і, таким чином, пригнічуючи запалення. Згідно з відомим та виявленим рівнем техніки сполуки структури І, що є предметом цього винаходу, їх фармакологічно прийнятні де солі та фармацевтичні препарати, які їх містять, R1 є воднем чи метильною групою, досі не були описані. Крім того, жодна з сполук, які R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють є предметом даного винаходу, не була описана ані зв'язок, або як протизапальна речовина, ані як інгібітор еозиR2 є аміногрупою субструктури нофільного нагромадження в запальних тканинах. -NR'R" Предметом цього винаходу є нові сполуки, їх де R' та R" можуть бути, незалежно один від солі та сольвати структури І одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 може бути будь-якою алкільною групою, що має 1-4 атомів вуглецю, більш прийнятно, метильде Μ являє собою макролідну субодиницю, що ною групою; має властивість накопичуватись в запальних клітинах, А означає протизапальну субодиницю, яка може бути стероїдом чи нестероїдом, і L означає ланцюг, що зв'язує Μ та А, а також покращена терапевтична дія цих сполук у лікуванні запальних захворювань і станів. Більш конкретно, цей винахід стосується сполук, їх солей та сольватів структури І, де Μ означає макролідну субодиницю формул де R1 є воднем чи метильною групою, R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR'R" де R' та R" можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною гру де R1 є воднем чи метильною групою, R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR'R" де R' та R" можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури 31 77166 R4 і R5 можуть також разом утворювати карбонільну групу, за умови, що тоді R1 є метильною групою; де R1 є воднем чи метильною групою, R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR'R" де R' та R" можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури 32 де R1 є воднем чи ацетильною групою, R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR'R" де R1 та R" можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури R5 може бути будь-якою алкільною групою, що має 1-4 атомів вуглецю, більш прийнятно, метильною групою, і А є протизапальною субодиницею формул: де R1 є воднем чи метильною групою, R2 і R3 обидва є воднем або разом утворюють зв'язок, або R2 є аміногрупою субструктури -NR'R" де R' та R" можуть бути, незалежно один від одного, воднем чи будь-якою алкільною або циклоалкільною групою, що має 1-6 атомів вуглецю, за умови, що тоді R3 є воднем, R4 є гідроксильною або кладинозильною групою структури R5 може бути будь-якою алкільною групою, що має 1-4 атомів вуглецю, більш прийнятно, метильною групою; де Ζ означає кисень або ΝΗ групу, R1 являє собою водень або гідроксильну чи О-ацильну чи О-алкільну групу, R2 є воднем чи метильною групою, яка може бути орієнтована у - чи -положенні, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром, 1,2-положення може бути подвійним або одинарним вуглець-вуглецевим зв'язком; 33 де Ζ означає кисень або ΝΗ групу, R1 являє собою водень або гідроксильну чи О-ацильну чи О-алкільну групу, R2 є воднем чи ацильною групою, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром; або її стереоізомерні форми, де 1,2положення означає насичений або ненасичений подвійний зв'язок, де Ζ є киснем або ΝΗ групою, R1 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-4 атомами вуглецю, R2 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-10 атомами вуглецю, за умови, що R1 і R2 одночасно не є воднем, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром; або її стераоїзомерні форми, де 1,2положення означає насичений або ненасичений подвійний зв'язок, де Ζ є киснем або ΝΗ групою, R1 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-4 атомами вуглецю, R2 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-10 атомами вуглецю, за умови, що R1 і R2 одночасно не є воднем, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген 77166 34 означає фтор, хлор або бром; або її стереоізомерні форми, де 1,2положення означає насичений або ненасичений подвійний зв'язок, R1 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-4 атомами вуглецю, R2 є воднем, нерозгалуженим або розгалуженим вуглеводневим ланцюжком з 1-10 атомами вуглецю, за умови, що R1 і R2 одночасно не є воднем, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром, більш прийнятно, фтор; де Ζ означає кисень або ΝΗ групу, R1 являє собою водень або гідроксильну групу з вільним воднем або гідроксильну групу чи О-ацильну чи Оалкільну групу, R2 є воднем чи метильною групою, яка може бути орієнтована у а- чи b-положенні, R3 є воднем або радикалом кислоти, що містить 1-4 атоми вуглецю, Х1 є воднем або галогеном, Х2 є воднем або галогеном, причому галоген означає фтор, хлор або бром, більш прийнятно, фтор, 1,2-положення може бути подвійним або одинарним вуглець-вуглецевим зв'язком, і L є ланцюжком формули CR1R2(CR3R4)nCR5R6-, де R1, R2, R3, R4, R5, R6 можуть бути воднем, С1-С4-алкілом, арилом, метокси, галогеном, гідрокси або меркапто групами, де n є 1-10, і одна чи кілька -CR3R4- груп можуть бути заміщені киснем, сіркою, ароматичним ядром чи аміногрупою, що додатково містить водень, або С1-С4 алкільною або арильною групою, або R1, R2, R3, R4, R5, R6 можуть також разом 35 77166 36 утворювати один чи кілька подвійних або потрійі макролідних проміжних сполук, поданих загальних зв'язків у ланцюжку, таким чином утворюючи ними структурними формулами М1 - М6, шляхом алкеніл чи алкініл, за умови, що, принаймні, одна з'єднання їх через відповідні функціональні L груметиленова група розташована в кінці групи L, що пи. В аналогічний спосіб можливо також приготузв'язує. вати сполуки структури І з не стероїдними протиЛанцюжок ковалентно зв'язує субодиниці Μ і А запальними субодиницями через їх вільні через функціональні групи, такі як аміди, уреати, функціональності, придатні для зв'язування. карбамати, прості ефіри, складні ефіри або через З карбонових кислот стероїдних субодиниць, алкіл-алкільні чи вуглець-вуглецеві зв'язки. поданих структурними формулами А1 - А4 і А6, Якщо не зазначено іншого, терміни, що вжиприготованих, як описано в літературі [(Suzuki, Т. ваються тут мають наведені нижче значення. et al, Chem. Soc, Perkin Trans. 1 1998, 3831-3836), "Алкіл" означає моновалентний алкан (вугле(McLean, H. M. et al, J. Pharm. Sci. 1994, 83, 476водень), з якого походить радикал, що може бути 480), (Little, R. J. et al, Pharm. Res. 1999, 16, 961нерозгалуженим, розгалуженим, циклічним або 967), (Kertesz D. J. et al, J. Org. Chem. 1986, 51, поєднанням нерозгалужених і циклічних вуглевод2315-2328), (Bodor N. S. US Patent 4,710,495, нів та розгалужених і циклічних вуглеводнів. Більш 1987)], можна приготувати сполуку загальної форприйнятні нерозгалужені або розгалужені алкіли мули, причому для утворення амідного зв'язку завключають метильні, етильні, пропільні, ізостосовується активація карбоксидіімідом і бензотпропільні, бутильні, втор-бутильні і т-бутильні груриазолом (НОВТ) в безводному дихлорметані в пи. Більш прийнятні циклоалкіли включають цикприсутності основи, такої як триетиламін, при кімлопентильні і циклогексильні групи. Алкіл також натній температурі у потоці аргону (Схема 1). означає нерозгалужені або розгалужені алькільні групи, що включають циклоалкільну частину або перериваються нею. "Алкеніл" означає вуглеводневий радикал, що може бути нерозгалужених, розгалуженим, циклічним або поєднанням нерозгалужених і циклічних вуглеводнів та розгалужених і циклічних вуглеводнів та містить, принаймні один подвійний вуглецьвуглецевий зв'язок. Тут в основному маються на увазі етенільні, пропенільні, бутенільні та циклогексенільні групи. Як вже зазначалось вище для "алкілів", алкеніли також можуть бути нерозгалуженими, розгалуженими або циклічними, де частина алкенільної групи може включати подвійні зв'язки і можуть також бути заміщеними, якщо розглядаються заміщені алкенільні групи. Алкеніл також означає нерозгалужені або розгалужені алкенільні групи, що включають циклоалкенільну частину або перериваються нею. "Алкініл" означає вуглеводневий радикал, що може бути нерозгалуженим або розгалуженим та містить, принаймні, один і, максимум, три потрійні вуглець-вуглецеві зв'язки. Тут в основному маються на увазі етинільні, пропінільні та бутинільні групи. "Арил" означає ароматичне кільце, таке як фенільна група, заміщений феніл або аналогічні групи, а також злиті кільця, такі як нафтил та ін. Коли зв'язування макролідних субодиниць з Арил включає, принаймні, одне кільце, що містить, стероїдними субодиницями відбувається через принаймні, б атомів вуглецю або два кільця, які складноефірний зв'язок, синтез проводиться за разом містять 10 атомів вуглецю, що мають передопомогою макролідної проміжної сполуки М7. міжні подвійні (резонансні) зв'язки між атомами вуглецю (в основному, фенільні та нафтильні кільця). Арильні групи можуть бути додатково заміщені одним чи двома замісниками, що можуть бути галогеном (фтор, хлор або бром) і гідрокси, С1-С7 алкільними, С1-С7 олкокси або арилокси, С1-С77 алкілтіо або арилтіо, алкілсульфонільними, ціано або аміно групами. Ще один предмет цього винаходу стосується способу приготування сполук структури І. Ці сполуки можна одержати з відповідної стеЕстєрифікація в положенні 2' макроліду може роїдної частини, поданої загальними структурними проводитись шляхом реакції з галоген-заміщеною формулами АІ - Аб, де всі радикали та символи кислотою у сухому дихлорметані в присутності мають значення, наведені для субструктур Α1 - А6, 37 77166 півалоїл хлориду, триетиламіну та диметиламінопіридину (DMAP) з утворенням проміжних сполук М7 для зв'язування з карбоновими кислотами субодиниці А (Схема 2). Така проміжна сполука може далі реагувати з карбоновою функціональністю субодиниці А у випадку стероїдної субодиниці, такої як подана структурами А1 - А4 та А6. Реакцію проводять у сухому DMF у присутності основи, такої як карбонат калію (К2СО3) у потоці аргону з одержанням калієвої солі кислоти, яка у реакції з макролідною проміжною сполукою дає сполуку І відповідно до цього винаходу (Схема 3). 38 Естерифікація карбоновою групою субодиниці А відбувається селективно через захищену 2' гідроксильну групу макроліду М9, яка також є реактивною. Якщо макролідна субодиниця означає М2 (макролід без кладинози в положенні 3), можливо також провести з'єднання з протизапальною субодиницею А через складноефірний зв'язок. У цьому випадку необхідне приготування проміжних сполук М8 і М9 (Схема 4). Синтез сполуки структури І з макролідної субодиниці, позначеної М1, здійснюється, виходячи з проміжної сполуки, синтез якої описаний в [Agouridas С, J. Med. Chem. 1998, 41, 4080-4100], у спосіб та із застосуванням реагентів, описаних там. Виходячи з зазначеної проміжної сполуки М10, синтезують сполуку структури І шляхом реакції з протизапальною субодиницею А, яка містить карбонову функціональність, з використанням карбонату калію у сухому DMF при кімнатній температурі (Схема 6). 39 Сполуки загальної структури І, що містять сполуку М3 в якості макролідної субодиниці, синтезують шляхом зв'язування модифікованої протизапальної субодиниці А8 з макролідом М3, одержаним у зазначений вище спосіб [Agouridas С, J. Med. Chem. 1998, 41, 4080-4100]. Протизапальна проміжна сполука А8 готується з кислоти протизапальної сполуки і відповідного захищеного діаміну (Вос-захист лише з одного боку) у присутності гідроксибензотриазолу і EDC у підхожому розчиннику, більш прийнятно, дихлорметані або DMF. Після одержання відповідного аміду А7 здійснюють зняття захисту з кінцевої аміногрупи, використовуючи TFA у дихлорметані при кімнатній температурі (Схема 7). Проміжна сполука, одержана відповідно до Схеми 7, реагує в ацетонітрилі у потоці азоту з макролідною субодиницею M12, яка активується карбоксидіімідом і містить захищені гідроксильні групи в положеннях 2' 4" (Схема 8). 77166 40 Якщо стероїдна субодиниця описується, як зазначено для загальної структури А5, де всі групи і радикали мають значення, подані у наведених вище визначеннях, реакція сполучення з макролідною групою проводиться шляхом естерифікації проміжної сполуки А9, одержаної відповідно до літератури [HU 55409], і макролідної гідроксильної групи (Схема 9). Ще один предмет даного винаходу стосується використання сполук загальної структури І в якості протизапальних, протианафілактичних та імуномодулюючих агентів, які, залежно від місця запалення, можуть вводитись різними шляхами, наприклад, підшкірно, перорально, через щоку, ректально, парентерально або шляхом вдихання у випадку, коли потрібне топічне нанесення у дихальних шляхах. Ще один об'єкт цього винаходу стосується приготування таких фармацевтичних форм сполук для досягнення оптимальної біодоступності активної сполуки І. Для підшкірного введення сполука І 41 77166 42 може готуватись у формі мазі чи крему, гелю або XhoI/BamHI рсДНК3.1 гідро(+)плазміди (Invitrogen). лосьйону. Мазі, креми і гелі можуть готуватись на 1 105 COS-1 клітин приміщували у 12-лунковий водній чи масляній основі з додаванням відповідпланшет (Falcon) у середовищі DMEM (модифіконого емульгатора або гелеутворюючого агента, ване у спосіб Дульбекко середовище Ігла) (Life якщо йдеться про приготування гелевої форми. Technologies) з 10% FBS (сироваткою плоду короФормула особливо важлива для респіраторних ви) (Biowhitaker) та культивували до 70% злиття інгаляцій, де сполука І може бути у формі аерозопри 37°С в атмосфері із 5% СО2. Середовище вилю під тиском. Для всіх форм аерозольних препалучали, і в кожну лунку додавали 1мкг ДНК, 7мкл ратів рекомендується мікронізувати сполуку І, пореагенту PLUS і 2мкл Ліпофектаміну (Life передньо гомогенізовану у лактозі, глюкозі, вищих Technologies) у 500мкл DMEM (модифіковане у жирних кислотах, натрієвій солі діоктилсульфобуспосіб Дульбекко середовище Ігла). Клітини інкурштинової кислоти або, найбільш прийнятно, у бували при 37°С в атмосфері з 5% СО2 і через 5 карбоксиметилцелюлозі, з метою досягнення розгодин додавали такий самий об'єм 20% FBS (симіру 5мкм для більшості частинок. Для приготуроватки плоду корови)/DMEM (модифікованого у вання препарату для інгаляції аерозоль можна спосіб Дульбекко середовища Ігла). Через 24 гозмішати з пропелентом, що служитиме для розпдини середовище повністю заміняли. Через 48 рискування активної речовини. годин після трансфекції додавали тестові сполуки Сполука І для інгаляцій може вводитись у фоу різних концентраціях та 24нМ [3Н] дексаметазону рмі сухого порошку з мікронізованими частинками. (Pharmacia) у середовищі DMEM (модифіковане у Сполука може входити до складу препарату спосіб Дульбекко середовище Ігла). Клітини інкудля лікування хвороби Крона і вводитись перорабували протягом 90 хвилин при 37°С в атмосфері льно або ректально. Препарат для перорального 5% СО2, промивали тричі буфером PBS (фізіологівведення має формулюватись так, щоб забезпечний розчин з фосфатним буфером) (Sigma), охочити біодоступність сполуки у запаленій частині лоджували до 4°С (рН=7,4) і потім лізували в букишки. Це може досягатись різними комбінаціями фері Tris (рН=8,0) (Sigma) 0,2% SDS препаратів із затриманим вивільненням. Сполука І (додецилсульфат натрію) (Sigma). Після додавантакож може застосовуватись для лікування хвороня сцинтиляційної рідини UltimaGold XR (Packard) би Крона і запалення кишечнику при введенні спозалишкову радіоактивність визначали луки у формі клістиру, для чого може використовусцинтиляційним лічильником Tricarb (Packard). ватись відповідний препарат. Сполуки 9, 10 і 27 були здатні конкурувати з Відповідні препарати сполук, що є об'єктом радіоактивним дексаметазоном у сайті зв'язування цього винаходу, можуть використовуватись для глюкокортикоїдного рецептора. профілактики та лікування різних захворювань і Тест на введення стероїду у клітини патологічних запальних станів, включаючи астму, Клітини СНО (клітини яєчника китайського хохронічне обструктивне легеневе захворювання, м'ячка) і COS-1 культивували до злиття у 75см2 запальні назальні захворювання, такі як алергічні флаконах в середовищі Hamm F 12 (Life риніти, назальні поліпи, кишкові захворювання, Technologies) з 10% FBS (сироватка плоду корови) такі як хвороба Крона, коліт, запалення кишечнику, (СНО) або у середовищі DMEM (модифіковане у виразковий коліт, дерматологічні запалення, такі спосіб Дульбекко середовище Ігла) з 10% FBS як екзема, псоріаз, алергічний дерматит, нейроде(сироватка плоду корови) (COS-1). 1мкМ радіоакрматит, свербіж, кон'юнктивіт і ревматоїдний арттивної сполуки 10 із загальною активністю 2мкКі рит. додавали у клітини та інкубували протягом 90 хвиТерапевтичний ефект сполук цього винаходу лин при 37°С в атмосфері з 5% СО2. Надосадову було визначено у таких експериментах in vitro та іл рідину клітин збирали, клітини лізували, а потім vivo. вимірювали радіоактивність у клітинному лізаті та Тест на зв'язування з глюкокортикоїдним ренадосадовій рідині клітин. Сполука 10 була здатна цептором людини накопичуватись в клітинах у більшій концентрації, Ген альфа-ізоформи глюкокортикоїдного реніж в надосадовій рідині. цептора людини клонували шляхом зворотної лаТест на інгібування проліферації гібридоми 13 нцюгової полімеразної реакції. Повну РНК виділяТ-клітин миші внаслідок індукції апоптозу ли з лімфоцитів периферійної крові людини У 96-лунковому планшеті здійснювали потрійвідповідно до інструкцій виробника (Qiagen), транне розведення тестового стероїду у середовищі скриптували у кДНК зворотною транскриптазою RPMI (Imunoloski zavod) 10% PBS (фізіологічним AMV (вірусу лейкозу птахів) (Roche), і ген розмнорозчином з фосфатним буфером). До розчинів жили специфічними праймерами сполук додавали 20000 клітин на лунку і інкубува1) 5' ли протягом ночі при 37°С в атмосфері з 5% СО2, ATATGGATCCCTGATGGACTCCAAAGAATCATTAA потім додавали 1мкКі [3Н] тимідину (Pharmacia) та CTCC3' інкубували ще 3 години. Клітини збирали шляхом 2) 5' висмоктування над фільтром GF/C (Packard). До ATATCTCGAGGGCAGTCACTTTTGATGAAACAGA кожної лунки додавали 30мкл сцинтиляційної ріAG3' дини Microscynt О (Packard), і комбіновану радіоаОдержаний продукт реакції клонували у сайт ктивність визначали b-сцинтиляційним лічильниXhoI/BamHI плазміди Bluescript KS (Stratagene), ком (Packard). Специфічність індукції апоптозу яку піддавали секвенуванню дидезокси флуоресглюкокортикоїдами доводилась антагонізмом процентним методом із використанням праймерів М13 ліферації інгібування міфепристоном (Sigma). і M13rev (Mycrosynth), а потім клонували у сайт Сполуки 8, 9, 10 і 27 демонструють інгібування 43 77166 44 проліферації клітинної гібридоми 13. щем RPMI, a потім додавали 50000 клітин на лунку Тест на інгібування продукування інтерлейкіта інкубували у середовищі з розчиненням тестону-2 вих сполук чи без нього. Концентрацію IL-2 у надоУ 96-лунковий планшет (Nunc) додавали 15нг садовій рідині вимірювали ELISA (імуносорбенткий 2С11 антитіл (Pharmingen) на лунку та залишали аналіз із застосуванням фіксованих ферментів), адсорбуватись у буфері PBS (фізіологічний розчин специфічним для мишачого IL-2 (R&D Systems). з фосфатним буфером) (рН=7,4) протягом ночі при Сполуки 9, 10 і 27 демонструють інгібування 4°С. PBS (фізіологічний розчин з фосфатним бупродукування інтерлейкіну-2, індуковане стимуляфером) вилучали, планшет промивали середовицією через CD3 рецептор. Таблиця 2 Зв'язування з глюкокортикоїдним рецепто- Індукування апоптозу кліром тин Н13 5 НВ 8 + + 9 + + 10 + + 11 НВ 27 + + дексаметазон + + Сполука Інгібування синтезу IL-2 + + + + + НВ - не визначено Модель набряку вуха, індукованого кротоновим маслом Самців щурів Sprague Dawley з масою тіла 200-250г випадково поділяли на групи, маркували та вимірювали початкову товщину вуха цифровим товщиномером. У контрольній групі наносили на вухо 50мкл розчинника (ацетон, Kemika). У такий саме спосіб наносили тестову сполуку у дозі 1мг/вухо або стандартну сполуку (1мг/вухо дексаметазону, Krka), розчинену в ацетоні. Через тридцять хвилин індукували набряк вуха 20% кротоновим маслом (Sigma). Запалення досягало максимальної інтенсивності через п'ять годин після нанесення кротонового масла. Процент інгібування набряку вуха визначали шляхом порівняння вух оброблених тварин з контрольною групою. У цій моделі випробовували сполуку 10, яка продемонструвала активність, аналогічну протестованому стандарту. Модель еозинофілії легень у мишей Самців мишей Balb/C з масою тіла 20-25г випадково поділяли на групи. їх сенсибілізували внутрішньочеревною ін'єкцією яєчного альбуміну (OVA, Sigma) в нульовий день та в чотирнадцятий день. На двадцятий день мишей піддавали провокаційному тесту шляхом внутрішньоназального введення OVA (позитивний контроль або тестові групи) або PBS (фізіологічний розчин з фосфатним буфером) (негативний контроль). Через 48 годин після інтраназального введення OVA тварин анестезували і легені промивали 1мл PBS (фізіологічного розчину з фосфатним буфером). Клітини відділяли на центрифузі Cytospin 3 (Shandon). Клітини підфарбовували у Diff-Quick (Dade), та визначали процент еозинофілів шляхом диференційного підрахунку, принаймні, 100 клітин. Флутіказон і беклометазон використовували в якості стандартних речовин у позитивному та негативному контролі. Сполуки вводили щоденно інтраназально або внутрішньочеревно у різних дозах за 2 дні до про вокативного тесту і до закінчення випробування. Сполуки 8, 9 і 10 статистично значно (t-тест, р