Спосіб визначення показників до призначення антагоністів кальцію у хворих ішемічною хворобою серця

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, и может быть использовано в стационарных и амбулаторных условиях для подбора адекватного индивидуального лечения сердечнососудистых заболеваний. Известен способ определения показаний к назначению антагонистов кальция больным ИБС (см. а.с. № 1292730, МПК А 61 В 5/02) - прототип, заключающийся в определении содержания кальция в плазме и в эритроцитах до начала лечения. При соотношении содержания кальция в плазме крови и эритроцитах 1 - 1,55 считают показанным лечение антагонистами кальция (АК) и прогнозируют положительный эффект лечения в 94 % случаях. Недостаток прототипа заключается в сложности способа исследования плазмы и эритроцитов крови, предусматривающего метод плазменной фотометрии с использованием дорогостоящего ацетилена. Кроме того, использование метода плазменной фотометрии требует специальных защитных мероприятий от ультрафиолетового излучения и воздействия продуктов сгорания ацетилена. Точность способа составляет 94 %, Задача изобретения: упрощение способа при сохранении точности исследования. Для решения поставленной задачи авторами предложен способ, включающий исследование крови, при проведении которого в двух пробах эритроцитов определяют активность Са-АТФ-азы калориметрическим методом, причем первую пробу принимают за контрольную, а во вторую пробу перед исследованием добавляют ингибитор кальмодулина. При увеличении активности Са-АТФ-азы во второй пробе по сравнению с величиной этого показателя в контрольной пробе назначают антагонисты кальция (АК). Выбор авторами изобретения Са-АТФ-азы в качестве критерия адекватности лечения антагонистами кальция позволяет упростить способ по сравнению с прототипом при сохранении точности исследования. Это обусловлено тем, что для нормальной жизнедеятельности любой клетки необходимо поддержание на клеточной мембране ионных градиентов, в частности градиента ионов Са2+/Cai/Cae, где Сае -внеклеточная концентрация ионов кальция, Caj- внутриклеточная концентрация ионов Са2+ ммоль/л/. Как известно, ионы Са2+ являются универсальным внутриклеточным посредником - регулятором. Значительная часть энергии, вырабатываемой клеткой, расходуется на выброс ионов Са2+ из цитоплазмы на создание и поддержание кальциевого градиента. Одним из механизмов, осуществляющих выведение ионов Са2+ из клетки, в частности эритроцитов, является кальциевый насос мембран, использующий для этих целей энергию АТФ. Биохимическим показателем активности кальциевого насоса эритроцитов является связанный с мембраной фермент Са-АТФ-аза эритроцитов. Эффективное функционирование этого фермента на внутренней и наружной поверхности мембран эритроцитов способствует постоянному наличию кальциевого градиента Cai(Cae), являющийся производным от уровня Са-АТФ-азы. Поэтому для определения показаний к назначению антагонистов кальция больным ишемической болезнью сердца (ИБС) представляется целесообразным в качестве критерия выбрать активность Са-АТФ-азы эритроцитов, что повышает чувствительность способа исследования. Одним из регуляторов активности Са-АТФ-азы эритроцитов является кальмодулин - термостабильный белковый регулятор. Использование высокоспецифического ингибитора кальмодулина - R 24571 (кальмидазолиума) позволило выявить неоднозначную реакцию Са-АТФ-азы эритроцитов на R 24571. Проведенные исследования показали, что у части больных ИБС ингибитор кальмодулина активизирует СаАТФ-азу эритроцитов, у остальных больных кальмо-дулин снижает активность Са-АТФ-азы. Было установлено, что антиангинальная активность антагонистов кальция была высокой в группе больных, у которых кальмодулин активизирует Са-АТФ-азу. В то же время у больных, у которых кальмодулин снижает активность Са-АТФ-азы, клинический эффект АК отсутствовал. Использование калориметрического метода для осуществления предложенного способа способствует упрощению процесса исследования и улучшению условий труда по сравнению с методом плазменной фотометрии по прототипу. Применение данного способа в широкой медицинской практике позволяет упростить методику исследования и сократить срок лечения в стационаре до 16-17 дней благодаря выбору адекватной терапии с момента поступления больного в стационар. Заявляемый способ осуществляют следующим образом: 1. До начала лечения производят забор венозной крови и разделяют эритроциты на две пробы, причем первую пробу принимают за контрольную. 2. Добавляют во вторую пробу ингибитор кальмодулина - кальмидазолиум, например R 24571, доводя его концентрацию до 2 ммоль в пробе. 3. Определяют в двух пробах активность Са-АТФ-азы калориметрическим методом. 4. Назначают антагонисты кальция при увеличении активности Са-АТФ-азы относительно величины этого показателя в контрольной пробе. Возможность осуществления предложенного способа показана на примерах. Пример 1. Больной К., 50 лет. Клинический диагноз: ИБС. Стабильная стенокардия напряжения и покоя, ill функциональный класс. Постинфарктный (1984) и атеросклеротический кардиосклероз. Гипертоническая болезнь II ст. Недостаточность кровообращения (НК) II А степени. По данным коронарографии: правый тип коронарного кровообращения, сужение на 75 % просвета в проксимальном отделе передней межжелудочковой ветви, на 50 % - в проксимальном отделе огибающей ветви. По данным велоэргометрии (ВЭМ) толерантность к физической нагрузке - 50 Вт за 3 мин. Пороговая реакция: боль за грудиной - 2 балла, депрессия сегмента ST до 1,5 мм в V4-5 отведениях по ЭКГ. Потребность в нитроглицерине за одну неделю -30+4 таблетки. По предложенному способу у больного натощак производят забор крови из вены о количестве 2 мл и разделяют ее на две пробы. Первую пробу принимают за контрольную, а во вторую пробу добавляют кальмодулин, доводя его концентрацию до 2 ммоль в пробе. Определяют калориметрическим методом в двух пробах активность Са-АТФ-азы по известной методике (см. В.В. Петруняка, Е.Л. Северина и др.*// Биохимия. 1989. - Т. 54. - № 6. - С. 974 - 979). Результаты исследования: в контрольной пробе активность Са-АТФ-азы составляет 250 + 16 мкм РІ/л эритроцитов мин., во второй пробе 308 +_18 мкм Pl/л эритроцитов мим., т.е. наблюдается увеличение активности Са-АТФ-азы по сравнению с величиной этого показателя в контрольной пробе. Поэтому больному К. был назначен антагонист кальция - нифедипин в средней терапевтической дозе. После двухнедельного курса лечения у больного повысилась толерантность к физической нагрузке до 75 Вт. Пороговые реакции: боль за грудиной - 1 балл без признаков ишемии миокарда на ЭКГ. Потребность в приеме нитроглицерина за одну неделю уменьшилась до 7 + 2 таблеток. ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Оптимальный критерий к назначению АК больным ИБС по предложенному способу дает возможность повысить терапевтический эффект при индивидуальном подходе к выбору медикаментозных средств. Пример 2. Больной 3., 52 лет. Клинический диагноз: ИБС. Стабильная стенокардия напряжения, III функциональный класс. Постинфарктный кардиосклероз (1986). Гипертоническая болезнь II ст. Η К I ст. По данным коронарографии: правый тип коронарного кровообращения, сужение на 75 % просвета в средней трети передней межжелудочковой артерии, локальный стеноз (на 50 %) в проксимальном отделе огибающей ветви. Толерантность к физической нагрузке - 50 Вт за две минуты, по данным ВЭМ. Пороговые реакции: боль за грудиной - 2 балла, депрессия сегмента ST до 2 мм в V4 - 6 отведениях. Потребность в нитроглицерине за одну неделю -32+5 таблеток. По предложенному способу у больного натощак производят забор венозной крови в количестве 2 мл, которое разделяют на 2 пробы, причем первую из них принимают за контрольную. Во вторую пробу добавляют кальмодулин, доводя его концентрацию до 2 ммоль. Проводят биохимическое исследование крови, в процессе которого в двух пробах калориметрическим методом определяют активность Са-АТФ-азы по известной методике. Результаты исследования: в контрольной пробе активность Са-АТФ-азы равна 260 + 14 мкм Pl/л эритроцитов мин. и во второй пробе - 200 +_12 мкм РІ/л эритроцитов мин,, т.е. наблюдается уменьшение значения биохимического критерия по сравнению с величиной этого показателя в контрольной пробе. Больному 3. был назначен АК - нифедипин в средней терапевтической дозе. После двухнедельного курса лечения АК был подтвержден отрицательный терапевтический эффект: толерантность к физической нагрузке не повысилась. Этот показатель также не изменился после увеличения дозы нифедипина. Потребность в приеме нитроглицерина за одну неделю существенно не уменьшилась (30 ±5 таблеток). Больному 3. были подобраны другие адекватные медикаментозные средства, т.к. лечение АК ему не показано. ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Предложенный способ обеспечивает упрощение методики биохимического исследования и может прогнозировать терапевтический эффект при назначении антагонистов кальция. В таблице показано преимущество предложенного способа по сравнению с известным.