Спосіб визначення стійкості картоплі до збудника раку synchytrium endobioticum (schilb.)perc

Спосіб визначення стійкості картоплі до збудника раку Synchytrium endobioticum (Schilb)Perc, що включає зараження паростків картоплі літніми 3 17048 4 ніше визначити ступінь стійкості картоплі, ніж інсильному пожовтінні, побурінні та висиханні дошими способами, особливо способом-прототипом. льок з нанесеними на них краплями білка і опаОтже, спосіб, що заявляється, відповідає кридання дольок або цілих листків (3 ступінь). Слабке терію "новизна" та "суттєві відміни". пожовтіння окремих дольок листків з нанесеним Приклад 1. білком свідчать про слабку стійкість зразка картоЗразки бульб сортів та гібридів картоплі, коли плі (2 ступінь). У стійких рослин у зоні нанесення паростки досягають 1-2мм, заражають літніми зоокраплі білка спостерігається локальне відмирання спорангіями зі свіжих ракових наростів на протязі тканин (1 ступінь). 24 годин при 11-13°С. Для цього на верхівку бульРезультати досліджень представлено у табби картоплі навколо паросткової частини приліплиці 1 (додаток 1). люють паперове кільце за допомогою суміші паПриклад 3. рафіну та вазеліну (1:1). В кільце наливають З уражених зразків картоплі (як за прикладом дистильовану воду, кладуть шматочки свіжого ра1) беруть паростки картоплі, які помішують у кювекового наросту. Зразки залишають у клімокамері з ти і аналізують на інфрачервоному аналізаторі підвищеною вологістю і температурі 11-13°С. Час ІФА-61. При аналізі використовують довжину хвиль експозиції 24 години. Інфекцію з паперовими кіль1510нм. З метою підвищення точності аналізу за цями знімають з бульб і залишають зразки картопрезультат брали середнє з трьох значень, отрималі при температурі 17-18°С на протязі 20 діб, після них при повороті кювети на 90°. Ступінь стійкості чого відзначають реакцію паростків картоплі на картоплі до збудника раку визначали за формузараження патогеном. Для цього їх аналізують під лою: бінокулярною лупою і відрізняють ступінь ураY=K·OГ· (W), ження: де: К - константа градуйованого рівняння; 1 - некротизована тканина паростка, одиничні ОГ - оптична густина; соруси; W - аналітична довжина хвилі (1510нм); 2 - розсіяні соруси (якщо більше 5), щільні соY - ступінь стійкості паростків картоплі до збуруси без деформації паростка; дника раку (%). 3 - щільні соруси з деформацією паростка, раМатематичну обробку даних проводили по Доковий наріст. В аналізованих таким чином зразках спехову Б.А. [5]. картоплі (48шт.) (Таблиця 1, додаток 1) ступінь За результатами аналізу зразків картоплі стуураження паростків картоплі збудником раку пінь стійкості паростків збудником раку склала з склала: 13,6% до 99,2% (Таблиця 1). 1-13 зразків; Процес визначення ступеню стійкості 48 зраз2-7 зразків; ків картоплі збудником раку на інфрачервоному 3-28 зразків картоплі. аналізаторі склав 18 хвилин, а способом зараженПриклад 2 (прототип). ня - 90 хвилин. Визначення стійкості способомЗ ракових наростів виділяють білковий екстпрототипом займає 20 хвилин, але реакція рослин ракт таким чином: 10г наростів подрібнюють і розкартоплі не співпадала з реакцією рослин на прятирають з 5мл калій-фосфатним буфером, який ме зараження збудником хвороби. містить 12,5г глюкози, 1% аскорбінової кислоти, Запропонований спосіб визначення стійкості 1% метабісульфіту калію та 0,018% магнію-хлору картоплі до раку підтверджує експериментальна 2, рН доводили до 7,4 за допомогою 1н їдкого наперевірка, яка здійснювалась при ураженні збудтру. Гомогенат віджимали крізь капронову сітку і ником раку картоплі сортів та гібридів, отриманих з центрифугували 25 хвилин при 12000 об/хв. При Поліської дослідної станції Інституту картоплярстцьому білки виділяються в супернатанті, а залишва УААН. ки випадають в осад. Супернатант 7мл очищують Джерела інформації: через колонку з сефадексом G - 25, врівноважену 1. Вилкова Н.А., Шапиро И.Д., Борщева Т.А. буфером, який вміщував 4,66г трису; 0,59 ЕДТА Использование инфракрасной микроскопии для натрію та 0,3г борної кислоти на 1000 мл воли; рН диагностики повреждения и устойчивости зернобуферу - 8,6. вок к клопам. В сб. Методы исследований патолоПісля початку виходу білка відбирають 2 - 3мл гических изменений растений. - М.: Колос, 1976. і зберігають в холодильнику при 4-6°С. В отримаС.216-219. ний білковий екстракт в розведенні 1:15 додають 2. Салтыкова Л.П., Тарасова В.П. Методичесчистий безводний гліцерин і декілька кристалів кие указания по испытанию картофеля на ракоусбарвника нейтрального червоного. Краплі білка тойчивость. - Л., 1982. - 51с. наносять тонкою скляною паличкою на 8-12 до3. Салтыкова Л.П., Яковлева В.И. Лабораторльок листків кожного сорту або гібриду картоплі. ная диагностика ракоустойчивости картофеля меЛистки для нанесення білкового екстракту беруть тодом заражения ростков от свежих раковых насереднього або нижнього ярусу добре розвинутих ростов: Методические указания. - М., 1979. - 8с. здорових рослин до бутонізації. Спостереження 4. Яковлева Н.Н., Кадырматов И.Н. Способ проводять на 5-6 день після нанесення білкового определения ракоустойчивости картофеля: А.с. екстракту. №380264 от 15.05.1973 г., бюллетень №21. Реакція листків на білковий екстракт у сприй5. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта. нятливих сортів та гібридів картоплі виражається у М.: Колос, 1973. - 336с. 5 17048 6 Таблиця 1 Ступінь стійкості селекційного матеріалу картоплі до збудника раку, визначений різними способами (2001рр.) № п/п 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. 39. 40. 41. 42. 43. 44. 45. 46. 47. 48. Ступінь стійкості Сорти, гібриди картоплі Прямим способом заражен- Зараження з білковим екст- Спосіб інфрачервоної спекня рактом (прототип) троскопії, в % (M±m) П94 27-4 3 3 13,6±0,73 П94 27-6 1 3 99,2±0,56 П94 27-11 1 2 92,4±0,56 П94 27-12 3 3 17,6±0,77 П94 27-21 3 3 14,9±0,54 П94 27-22 3 3 17,6±0,77 П94 27-26 3 3 24,4±0,66 П94 27-39 1 3 88,3±0,53 П94 27-46 1 3 96,4±0,54 П94 27-49 2 3 62,5±0,49 П94 27-52 1 3 91,1±0,57 П95 49/3 1 2 93,8±0,56 П95 49/5 3 3 21,7±0,72 П95 49/21 2 3 66,7±0,43 П95 49/25 1 3 93,8±0,54 П95 49/28 1 3 97,8±0,56 П95 49/35 3 3 16,3±0,74 П95 49/48 3 3 16,3±0,74 П95 49/53 2 3 58,4±0,42 П95 49/54 3 3 17,7±0,77 П95 8-12 3 3 14,9±0,69 П95 8-15 2 3 50,2±0,46 П95 8-22 2 3 54,3±0,43 П95 8/33 3 3 13,6±0,73 П95 9-1 3 3 17,7±0,76 П95 9-6 3 3 19,0±0,66 П95 9-7 2 3 62,5±0,49 П95 9-10 2 3 61,2±0,46 П95 11/16 1 3 86,9±0,52 П95 11/22 1 3 85,6±0,51 П9511/26 3 3 16,3±0,76 П95 11/28 3 3 21,7±0,72 П95 11/30 3 3 25,8±0,53 П95 11/37 3 3 23,1±0,76 П95 11/43 3 3 20,4±0,74 П95 11/46 3 3 21,7±0,72 П95 11/47 3 3 23,1 ±0,76 П95 11/57 1 3 97,8±057 П95 11/68 3 3 19,0±0,66 П95 11/70 3 3 17,7±0,76 П95 11/75 3 3 13,6±0,73 Solami 1 2 99,2±0,57 Поліська рожева 3 3 13,6±0,73 Радич 1 2 93,7±0,56 Пост-86 3 3 17,7±0,76 Синтез 3 3 21,7±0,72 Берегиня 3 3 14,9±0,54 П88 128-7 3 3 17,7±0,76 Примітка. 1, 2, 3 - ступінь враження зразків картоплі збудником раку. Комп’ютерна верстка Л. Ціхановська Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601