Спосіб виготовлення антигену з атенуйованих збудників eimеria tenella

Спосіб виготовлення антигену з атенуйованих збудників Eimeria tenella, що включає селекцію збудників, флотацію насиченим розчином, ізолювання та накопичення збудників еймерій, який відрізняється тим, що використовують аміачну селітру щільністю 1,3 г/см3 як насичений флотаційний розчин, ізолюють виділені ооцисти еймерій з посліду. (19) (21) u200603874 (22) 07.04.2006 (24) 15.11.2006 (46) 15.11.2006, Бюл. № 11, 2006 р. (72) Приходько Юрій Олександрович, Стегній Борис Тимофійович, Сентюрін Володимир Віталійович, Маршалкіна Тетяна Вікторівна (73) ІНСТИТУТ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЇ І КЛІНІЧНОЇ ВЕТЕРИНАРНОЇ МЕДИЦИНИ 3 18387 4 прототипі. Отже більша щільність флотаційного сформовано групу курчат 28-добового віку, вільних розчину порівняно з прототипом, дозволяє набагавід еймерій, в кількості 20 голів. Для зараження то більше ізолювати та накопичити збудників атедослідного поголів'я використовували накопичені нуйованих еймерій. ооцисти еймерій після їх споруляції. Інвазійних В основу корисної моделі поставлено задачу збудників вводили птиці ентерально в дозі 150 розробити спосіб виготовлення антигену з атенутисяч на 1кг маси курчат. Після інвазування кожної йованих збудників Eimeria tеnеllа., що включає доби від птахів відбирали послід, який досліджуселекцію збудників, флотацію насиченим розчивали на наявність ооцист еймерій. З початком паном, ізолювання та накопичення збудників еймерій тентного періоду з посліду дослідної птиці відбишляхом використання аміачної селітри щільністю рали перших виділених ооцист (погодинно, 1,3 як насиченого флотаційного розчину, ізолюпротягом першої доби). Відібрані від птиці еймерії вання виділених ооцист еймерій з посліду, щоб з прискореним розвитком використовували для забезпечити спосіб виготовлення антигену. послідуючого зараження птиці, тобто проводили Спосіб здійснюють у такій послідовності другий пасаж на курчатах по вище описаній схемі, З птахо господарств неблагополучних по ейпотім третій, четвертий і т.д. (усього провели 10 меріозу відбирали послід птиці, який досліджували пасажувань паразитів через організм молодняку на наявність ооцист еймерій. Накопичення матерікурей 28 - 30-добового віку з використанням по 10 алу проводили у тому разі, якщо при видовій іденголів у кожному пасажі) з відбором кожного разу тифікації збудників питома вага ооцист Е.tenella перших виділених з організму ооцист. становила не менше 80%, а інтенсивність інвазії Приклад 2. Визначення патогенності та імуноперевищувала 1млн. ооцист в 1см3 посліду. Збудгенності еймерій Е.tenella зі скороченим циклом ників з посліду ізольовували, застосовуючи для розвитку. Було сформовано шість груп курчат 30флотації насичений розчин аміачної селітри добового віку, вільних від еймерій, по 10 голів у (щільність - 1,3). Отриману біомасу еймерій піддакожній. Для проведення досліджень антиген привали очищенню, в декілька етапів: великі механічні готували таким чином, що 1см3 його вміщував кідомішки видаляли фільтруванням через металеве лькість спорульованих атенуйованих ооцист, яка ситечко, розміром чарунок 1мм2; дрібні домішки відповідала б абсолютній летальній дозі вихідних видаляли диференційним центрифугуванням мавірулентних збудників у розрахунку на 1кг живої теріалу триразове за такими режимами: перший ваги. Після проведення паразитологічних досліраз - при 2000об/хв. протягом 10 хвилин, другий джень птиці першої групи антиген задавали в дозі при 1500об/хв протягом 5 хвилин, третій - при 0,5см3 на 1кг маси тіла, другої - 1,0см3, третьої 700об/хв. також протягом 5 хвилин. Для інактивації 1,5см3, четвертої - 2см3. Доза ооцист для птахів супутньої мікрофлори суспензію найпростіших четвертої групи відповідала абсолютній летальній обробляли антибіотиками (пеніцилін із стрептомідозі (ЛД100) ооцист вихідних вірулентних еймерій. цином по 1000ОД на 1см3 суспензії, в якій містилоКурчата п'ятої і шостої груп були контрольними і ся 500 тисяч збудників) протягом 24 години. Після антигену не отримували. Через 21 добу після завідмивання біомаси від антибіотиків проводили стосування антигену всіх курчат, крім шостої контспоруляцію одержаних еймерій. Після чого проворольної групи, інвазували вихідними вірулентними дили зараження курчат. Кількість ооцист в 1см3 збудниками в дозі ЛД100. Дослідження показали, суспензії підрахували в камері Горяєва. З моменту що після введення антигену, до зараження у птаінвазування за птицею вели спостереження, відміхів перших трьох та контрольних груп відхилень у чаючи клінічні ознаки. Періодично від птахів відбизагальному стані не було. В четвертій групі відмірали послід і досліджували на наявність ооцист чали незначне пригнічення, зменшення апетиту; еймерій. З початком патентного періоду, з посліду через 3 доби з початку клінічного прояву стан подослідної птиці відбирали перших виділених ооголів'я повністю нормалізувався. цист (протягом першої доби). Таким чином було Розроблений антиген з атенуйованих збудниотримано найпростіших, у яких препатентний періків еймеріозу не спричиняв патогенного впливу на од менш тривалий (отже вони чинили менш патоорганізм курчат. Після зараження в третій та в чегенний вплив на клітини організму птиці), ніж у тих, твертій групах протягом періоду спостережень які виділяються з організму пізніше. Щоб отримати клінічних ознак еймеріозу не відмічали. В першій лінію збудників, у яких ця ознака (скорочений цикл та другій групах у декількох птахів реєстрували розвитку) була б закріплена генетичне, застосовуважку та легку форму еймеріозу. У контрольній вали селекційний метод. Для цього провели 10 групі захворіли і загинули всі курчата. Тобто ввепасажувань отриманих паразитів через організм дений антиген з атенуйованих збудників еймеріозу молодняка курей за описаною вище схемою з відволодів вираженими протективними властивостям бором кожного разу перших виділених з організму вакцини. ооцист. Після останнього зараження дослідного Антиген, який отриманий способом атенуюпоголів'я з посліду ізолювали виділених ооцист вання збудників еймерій курей Е.tenella, що мають протягом усього патентного періоду. Потім готувазнижену, в порівнянні з вихідними штамами вірули суспензію найпростіших в 1% розчині двохролентність і високу імунізуючу здатність, можливо мовокислого калію з розрахунку 500 тисяч в 1см3, використовувати при розробці вітчизняної протияку зберігали при температурі від 2 до - 4°С. еймерійної вакцини, яка в подальшому буде заПриклад 1. Виготовлення лінії із еймерій виду стосована в птахогосподарствах України. Е.tenella зі скороченим циклом розвитку. Було 5 Комп’ютерна верстка В. Мацело 18387 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601