Спосіб моделювання хронічного токсико-пилового бронхіту

Изобретение относится к лабораторным способам и может быть использовано в экспериментальной медицине и биологии при проведении исследований в области патологической физиологии, фармакологии, токсикологии и экологии. Известны способы моделирования хронического бронхита (Еловская Л.Т. и соавт. Модель экспериментального пневмокониоза и пылевого бронхита при ингаляционном воздействии пыли (Макуха О.И., Ластков О.А. Воздействие малых концентраций радона и угольной пыли на развитие бронхита в эксперименте // Гигиена и санитария. - 1986. - С.19 - 22; Актуальные вопросы краевой гигиены Донбасса и физиологии труда в глубоких угольных шахтах. - Донецк, 1972. - С.85 - 87), которые основаны: в первом случае - на математическом расчете зависимости коэффициента задержки пылевых частиц и скорости их элиминации от масс-медианного аэродинамического диаметра аэрозоля, а во втором - оценивается роль сочетанного действия малых концентраций радона и угольной пыли в развитии экспериментального хронического бронхита. К недостаткам этих способов можно отнести: - сложность стандартизации бронхитогенных агентов по их дисперсности и химической чистоте [1, 2]; - наличие кристаллических форм аэрозоля с размерами частиц от 1 до 10мкм, характерных для кониопневмофиброгенеза [1]; - отсутствие токсического (не пылевого) бронхитогенного агента [1, 2]; отсутствие возможности создания унифицированной модели хронического токсикопылевого бронхита с использованием с одной стороны стандартизированных по физикохимическим свойствам бронхитогенных агентов, с другой - и х дозоэкспозиционной зависимости [1, 2]. Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является модель экспериментального пылевого бронхита [1], обеспечивающая получение бронхитогенного эффекта с помощью ингаляционных воздействий на лабораторных животных аэрозоля молотого кварца марки ПК-3 с масс-медианными аэродинамическими диаметрами 50мкм. Однако, эта модель позволяет воспроизводить в эксперименте бронхитогенное воздействие только пылевого фактора, да и то не достаточно стандартизованного из-за отсутствия надежных рекомендаций по седиментации пыли. В основу изобретения положена задача разработать способ создания модели хронического токсико-пылевого бронхита, позволяющего в лабораторных условиях на животных воспроизвести хронический бронхит профессиональной этиологии с использованием стандартизированных бронхитогенных агентов. Сущность изобретения заключается в том, что на лабораторных животных ингаляционными воздействиями стандартизованных токсического и пылевого бронхитогенных агентов, т.е. оксидов азота (II, IV) и гидрофобного аморфного диоксида кремния (белой сажи) в соответствующи х концентрациях 5 и 50 ПДК в воздухе рабочей зоны при трехмесячной экспозиции получена динамика характерных для хронического бронхита морфологических изменений в бронхах. Основными отличительными признаками предлагаемого способа является унифицированное моделирование токсического, пылевого и токсико-пылевого бронхита, как объективно наиболее распространенную разновидность хронического профессионального бронхита, заключающееся в стандартизации условий воспроизведения этой модели и определении основных признаков морфологических изменений бронхов в динамике бронхитогенеза. Способ осуществляется следующим образом: беспородные крысы 3 категории качества (по классификации, принятой Восточноевропейскими странами в апреле 1989г.) массой тела 120 - 180г подвергаются ежедневным ингаляционным воздействиям (соответствующим профессиональным экспозициям) в течение трех месяцев оксидов азота (II, IV) в естественном для атмосферного воздуха соотношении и аморфного гидрофобного диоксида кремния (белой сажи) с удельной поверхностью 100м 2/г в концентрациях 5 и 50 ПДК в воздухе рабочей зоны как при изолированном, так и при сочетанием их действии вызывают морфологические изменения воздухоносных путей, характерных для бронхита. Через 2 - 5 недель после ингаляционного воздействия оксидов азота и аморфного диоксида кремния в слизистой оболочке наблюдается дистрофия и незначительный отек с десквамацией бронхиального эпителия. В утолщенном за счет отека и лимфоидной инфильтрации эпителиальном пласте слизистой оболочки бронхов обнаруживается не резко выраженная гиперплазия бокаловидных клеток с явлениями гиперпродукции слизи. Через 7 - 8 недель после начала опыта в бронхах наблюдается заметное утолщение стенок сегментарных бронхов и бронхов более мелкого калибра за счет их выраженной лимфолейкоцитарной инфильтрации и отека эпителиального пласта слизистой оболочки бронхов. При этом, эпителиальный пласт нередко отстоит от базальной мембраны, эпителий его часто дистрофически изменен, а в межэпителиальном пространстве располагается большое число интраэпителиальных лимфоцитов. Иногда обнаруживается под-эпителиально мелкие лимфолейкоцитарные инфильтраты, располагающиеся мозаично в эпителиальном пласте (фиг.1). Большое число слущенно дистрофически измененных эпителиальных клеток на ряду с кониофагами располагается в пристеночном слое слизи, образованной гиперплазированными подслизистыми железами и бокаловидными клетками. На 10 - 12 неделе опыта в слизистой оболочке бронхов наряду с вышеперечисленными изменениями в слизистой оболочке бронхов обнаруживаются микроэррозии с воспалительной лимфолейкоцитарной инфильтрацией вокруг них и подэпителиальные лейкоцитарные инфильтраты (фиг.2). В паренхиме легких наблюдаются очаги мелкофокусной эмфиземы, отек межуточной и воспалительной инфильтрации межуточной ткани легких (фиг.3). В межуточной ткани легких обнаруживаются кровеносные сосуды замыкателыного типа с артериовенозными шунтами, что свидетельствует о гипертензии в малом круге кровообращения (фиг.4). Оксиды азота получают, смешивая капельно в колбе Вюрца 50% - ные растворы азотистокислого натрия и серной кислоты, направляя их в экспериментальную камеру потоком сжатого воздуха. Аморфный гидрофобный диоксид кремния (белая сажа) производится отечественной промышленностью действием водного раствора NH3 на (NH4)2SiF6 по действующим те хническим условиям с заданными стандартными физикохимическими свойствами. Таким образом, положительный эффект от использования предлагаемого способа заключается в унификации модели токсикопылевого бронхита, которая позволит стандартизировать условия его воспроизведения как для сопоставимости результатов исследований, так и для значительной экономии времени на их проведение по изучению патогенетических особенностей этого заболевания, и разработке новых лечебнопрофилактических средств. Способ весьма прост и удобен для использования в практике экспериментальных исследований патогенеза, профилактики и лечения хронического бронхита профессиональной этиологии.