Лікувальна форма протипухлинного препарату для інфузій

Изобретение относится к фармакологии, в частности к лекарственным формам противоопухолевых препаратов, содержащих платину, включающим в качестве активной субстанции соединение платины с дезоксирибонуклеиновой кислотой (ДНК), которое может быть использовано в форме раствора для инфузий при лечении злокачественных опухолей в терминальных стадиях. Известна лекарственная форма противоопухолевого препарата фторурацила в виде водного раствора для инфузий, который в качестве активной субстанции содержит 5 мас.% натриевой соли фторурацила. Этот препарат широко используется в разных схемах клинической полихимиотерапии, в частности с препаратом платины платидиамом. Препарат сохраняет свою противоопухолевую активность до 36 месяцев [Булкина З. П. Противоопухолевые препараты. Справочник. - Киев.: На укова думка, 1991. - С. 274-255]. Однако по уровню противоопухолевой активности он уступает препаратам, содержащим соединения платины, и не рекомендуется для лечения заболевания в терминальных стадиях из-за высокой гематотоксичности. Токсичность препарата, характеризуемая ЛД50 = 200 мг/кг, проявляется также в виде желудочно-кишечных нарушений и повреждений кожных покровов. Известна лекарственная форма противоопухолевого препарата на основе производного платины с полианионом ДНК (Pt-ДНК), соответствующего химической формулы {[PtCI(NH 3)(H2O)]6(C 39H49O32N15P 4)}n (n 2000±200), представляющая цитратно-солевой раствор для инфузий. содержащий соединение Pt-ДНК in situ, натрий хлористый, натрий лимоннокислый и аммоний хлористый при следующем соотношении компонентов, мас.%: Соединение Pt-ДНК 0,140-0,154 Натрий хлористый 0,087-0,097 Натрии лимоннокислый 0,043-0.053 Аммоний хлористый 0,016-0,018 [Заявка па патент Украины №95083960, 29 08 1995]. Этот препарат тормозит рост перевивной опухоли животных (эритромиелоза Швеца) в терминальной фазе развития на 95% и увеличивает продолжительность жизни леченых опухоленосителей по сравнению с нелечеными на 100%, не повреждая систему кроветворения и кожные покровы. Однако его токсичность, характеризуемая ЛД50= 102 мг/кг и ЛД100= 136мг/кг, проявляется в виде желудочно-кишечных нарушений. Кроме того, срок годности препарата ограничен всего тремя месяцами. При дальнейшем хранении его противоопухолевая активность сначала падает, а затем изменяется на эффект стимулирования роста опухоли. Цель изобретения - создание лекарственной формы противоопухолевого препарата в виде раствора для инфузий, включающего в качестве активного начала соединение Pt-ДНК in situ в цитратно-солевом растворе, которая за счет введения в нее второго активного вещества - фторурацила в виде натриевой соли, обеспечила бы сохранение высокого уровня противоопухолевой активности препарата, устранение токсического действия на желудочно-кишечный тракт, систему кроветворения и кожные покровы, а также дала бы возможность увеличить срок годности препарата. Цель достигается тем, что состав лекарственной формы противоопухолевого препарата для инфузий, включающий водный раствор соединения Pt-ДНК in situ, натрий хлористый, натрий лимоннокислый и аммоний хлористый, дополнительно содержит фторурацил в виде натриевой соли, при следующем соотношении компонентов препарата, мас.%; Соединение Pt-ДНК 0,130-0,153 Натрий хлористый 0,080-0,090 Натрий лимоннокислый 0.040-0.053 Аммоний хлористый 0.015-0,018 Натриевая соль фторурацила 0,025-0,370 Приготовление лекарственной формы осуществляют следующим образом. В цитратно-солевом растворе, содержащем натрий хлористый и натрий лимоннокислый, проводят реакцию взаимодействия комплекса цисдихлородиамминплатины (ДДП) с ДНК согласно методике, описанной в заявке №95083960, и получают раствор соединения Pt-ДНК in situ, к которому добавляют раствор фторурацила. Пример приготовления лекарственной формы противоопухолевого препарата на основе производного платины с ДНК и фторурацила в виде раствора для инфузий (сокращенно Pt-ДНК-Ф). В цитратно-солевом растворе, содержащем натрий хлористый и натрий лимоннокислый, растворяют ДНК, раствор нагревают до 70-90°С и смешивают с нагретым до той же температуры цитратно-солевым раствором, содержащим ДДП. Смесь тщательно перемешивают и термостатируют при 70-90°С еще в течение 15 мин, а затем добавляют водный раствор натриевой соли фторурацила. Данные, характеризующие зависимость состава раствора препарата от количества исходных веществ, приведены в табл.1. Опытным путем установлено, что препараты Pt-ДНК-Ф, содержащие меньше 0,025 мас.% натриевой соли фтор урацила, имеют такой же срок годности, как и препарат Pt-ДНК, т.е. всего 3 месяца, а препарат Pt-ДНК-Ф, содержащий больше 0,370 мас.% фторурацила, проявляет гематотоксичность. Содержание солей натрия в препаратах Pt-ДНК-Ф обусловлено количеством активного вещества Pt-ДНК, для образования которого в водном растворе необходимо соблюдать pH = 7,0-7,5 и ионную силу m = 0,01-0,02. Биологическую активность препаратов, исследованную на белых беспородных мышах в зависимости от состава лекарственной формы и сроков ее хранения, характеризовали показатели противоопухолевого и токсических эффектов. Противоопухолевый эффект оценивали по проценту торможения роста опухоли (ТРО, %). В качестве модельной опухоли использовали перевивную саркому 180 в логарифмической (терминальной) фазе роста. Лечение опухоленосителей начинали на пятый день после перевивки опухоли. Препараты вводили внутрибрюшинно три раза с интервалом 1-2 дня. Контрольной группе опухоленосителей тем же путем и в те же сроки вводили фармацевтический растворитель. Срок годности препаратов определяли по промежутку времени прошедшему от начала приготовления препаратов до момента начала снижения уровня ТРО. Данные, характеризующие противоопухолевый эффект и срок годности препаратов с различным содержанием активных веществ, приведены в табл. 2. Как видно из табл.2, включение NaФ в лекарственную форму противоопухолевого препарата Pt ДНК-Ф не вызывает снижения уровня химиотерапевтической активности препарата и обеспечивает увеличение срока годности препарата. Токсические эффекты препаратов характеризовали проявлениями их отрицательного воздействия на желудочно-кишечный тракт, систему кроветворения и кожные покровы интактных животных, получавши х препараты однократно в токсических дозах. Желудочно-кишечную токсичность оценивали по проценту животных с диареей, длившейся два дня или больше двух дней. Гематотоксичность определяли по проценту животных с лейкопенией, термоцитопенией и лимфоцитопенией, вызванных понижением уровня лейкоцитов на 30-60%, тромбоцитов на 20-50% и лимфоцитов на 20%, соответственно. О воздействии препаратов на кожные покровы судили по проценту животных с трофическими изменениями кожи. Данные, характеризующие фармакологические свойства лекарственной формы противоопухолевого препарата в виде раствора для инфузий оптимального состава, содержащего в качестве активной субстанции производное Pt-ДНК и фторурацил, в сравнении с данными, характеризующими фармакологические свойства препаратов, содержащих по отдельности Pt-ДНК или NaO, приведены в табл. 3. Как показывает анализ данных табл. 3, препарат Pt-ДНК, хранившийся 3 месяца, действует более активно против запущенных опухолей животных, чем препарат NaO, проявляя способность тормозить рост опухоли на 90% против 55%. В этом отношении ему не уступает препарат Pt-ДНК-Ф, у которого показатель, характеризующий торможение роста опухоли, выше, чем у препарата NaO, примерно на 30-40%. Однако по длительности срока, на протяжении которого этот показатель сохраняет свое значение на уровне 86-95%, препарат Pt-ДНК-Ф превосходит препарат Pt-ДНК. Так, высокий уровень торможения роста опухоли у препарата Pt-ДНК сохраняется на протяжении всего 3 месяцев, а у препарата Pt-ДНК Ф в течение не менее 36 месяцев Препарат Pt-ДНК-Ф менее токсичен, чем препарат Pt-ДНК, и, особенно чем препарат NаФ. Так, препарат Pt-ДНК не обладает гемато- и дерматотоксичностью, но вызывает диарею у 60% животных Препарат же NaФ значительно более токсичен. Он не только повышает количество животных с диареей до 100%, но и вызывает у ни х лейкопению, термоцитопению, лимфоцитопению и трофические изменения кожи. При введении животным препарата Pt-ДНК-Ф случаи проявлений его токсического действия на желудочно-кишечный тракт, систему кроветворения и кожу не обнаружены. Таким образом, преимущество лекарственной формы противоопухолевого препарата в виде раствора, содержащего производное платины и натриевую соль фторурацила, очевидно новый состав формы обладает высоким уровнем активности против запущенных опухолей, имеет большой срок годности и не проявляет признаков желудочно-кишечной токсичности, гематотоксичности и дерматотоксичности. Заявляемая лекарственная форма была клинически испытана, в частности, на 38 неоперабельных больных раком яичников в IV клинической стадии заболевания, осложненного асцитом.Лекарственная форма вводилась трехкратно равными объемами по 0.25 л внутрибрюшинно. Суммарная доза действующих ве ществ в расчете на Pt-ДНК составила 1,00-1,10 г, а в расчете на NaФ 2,80-2,90 г на один курс лечения при повторении от 1 до 4 курсов с интервалами 1-4 месяца.Проведенные клинические исследования показали, что эффективность применения лекарственной формы противоопухолевого препарата на основе раствора производного платины с дезоксирибонуклеиновой кислотой и фторурацила превосходит эффективность применения известных противоопухолевы х средств. После введения препарата у больных исчезает асцит, повышается активность, улучшается качество жизни, а 53% из них становятся операбельными. Частичные ремиссии и стабилизация процесса наблюдается в 68% случаев, полные клинические ремиссии в 22% случаев.