Спосіб одержання липосомальної форми протипухлинного препарату

Изобретение относится к фармации, а именно к способу получения липосомального препарата, который может быть использован в качестве противоопухолевого средства. Известен способ получения липосомального препарата путем эмульгирования липидов в водной среде, содержащей углевод и препарат платины, с последующим замораживанием и оттаиванием (Каледин В.И., Попова Н.А., Николин В.П., Стеценко А.И. Влияние условий приготовления липосом и схемы введения платина в липосомах мышам линии А/Неї с опухолью ГА-1 на его противоопухолевые и токсические свойства. Эксперим. онкология, 1992, т. 14, № 2, с. 60-64). Данный способ имеет ряд существенных недостатков: длительность процесса, низкий выход целевого продукта, высокий индекс окисленности продукта, высокая обсемененность микроорганизмами, что затрудняет промышленное внедрение препарата. Наиболее близким к предлагаемому способу является способ получения препарата путем высушивания смеси липидов: лецитина (фосфатидилхолина) и холестерина в вакууме, эмульгирования липидов в водной среде, содержащей углевод и препарат платины, получения липосом методом 7-кратного замораживания в жидком азоте и размораживания в водяной бане при комнатной температуре (Каледин В.И., Попова НА, Стеценко А.И., Яковлев К.И. Противоопухолевая эффективность свободного и заключенного в липосомы плаксанта у мышей линии А/Не с метастазами опухоли ГА-1 в печени. -Эксперим. онкология, 1993, т.15, № 5, с. 7576). Данный способ имеет ряд недостатков: окисление фосфолипидов в процессе получения липосом, длительность процесса за счет низкой производительности оборудования, низкий процент включения антибиотика в липосомы, нестабильность физико-химических свойств в процессе получения и хранения. В основу изобретения поставлена задача создать способ получения липосомальной формы противоопухолевого препарата, в котором технологические стадии и параметры процесса позволили бы получить препарат с низким индексом окисленности и стабильными физикохимическими свойствами, повысить процент включения антибиотика в липосомы и сократить длительность технологии. Поставленная задача решается тем, что в способе получения липосомальной формы противоопухолевого препарата, включающем высушивание фосфолипидов в вакууме, эмульгирование фосфолипидов в водной среде, содержащей углевод и препарат платины, получение липосом, согласно изобретению, эмульгирование проводят в среде, содержащей глюкозу или лактозу в количестве 7-20 мас. %, при соотношении препарат платины: фосфолипиды 1:(22-40), а процесс получения Липосом осуществляют гомогенизацией липидной эмульсии при давлении 5,3 -10f-6,4 -107 Па. В табл. 1-3 приведены данные, обосновывающие достаточность выбранных соотношений для достижения обеспечиваемого изобретением технического результата. Как видно из данных, приведенных в табл. 1, оптимальным является содержание глюкозы или лактозы 7-20 мас.%. Использование концентраций ниже указанных приводит к увеличению оптической плотности, а увеличение концентрации приводит к снижению включения препарата платины в липосомы. Как видно из данных, приведенных в табл. 2, оптимальным является соотношение препарат платины: фосфолипиды 1:(22-40). Использование соотношений ниже указанных приводит к неполному включению препарата платины в липосомы, а увеличение соотношения приводит к увеличению оптической плотности, что затрудняет стерилизующую фильтрацию продукта. Как видно из данных, приведенных в табл. 3, оптимальным является давление 5,3 * 10*6,4 *10 Па. Использование давления ниже указанного не дает эмульсии необходимой оптической плотности, а использование более высокого давления приводит к увеличению индекса окисленности, что в свою очередь приводит к нестабильности препарата. Преимущества предлагаемого способа по сравнению с прототипом приведены в табл. 4. Пример 1. Спиртовый раствор природных фосфолипидов, содержащий 88 г фосфа тидилхолина яичного желтка, высушивают в вакууме при температуре 35-37°С до получения тонкой липидной пленки. Полученную пленку фосфолипидов эмульгируют в 10 л водного раствора, содержащего 4 г препарата платины и 0,7 кг глюкозы или лактозы. Смесь перемешивают в течение 1 ч и для получения липосом переносят в реактор гомогенизатора типа "a-Laval", где подвергают обработке, которую проводят при температуре 35-40°С и давлении 5,3х х107 Па. Время проведения гомогенизации в течение одного цикла - 5 мин. Затем в течение 10 мин проводят охлаждение реакционной смеси до температуры 33-35°С, после чего процесс повторяют при указанном режиме. После проведения 7 циклов и достижения оптической плотности не более 0,08-0,14 при 540 нм процесс прекращают. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации и разливу во флаконы. Выход целевого продукта составляет 9,6 л. Продолжительность процесса получения 1 л препарата -12 мин. Индекс окисленности -0,30. Включение препарата платины в липосомы 85%. Пример 2, Спиртовый раствор природных фосфолипидов, содержащий 120 г фосфа тидилхолина яичного желтка, высушивают в вакууме при температуре 35-37°С до получения тонкой липидной пленки. Полученную пленку фосфолипидов эмульгируют в 10 л водного раствора, содержащего 4 г препарата платины и 1,5 кг глюкозы или лактозы. Смесь перемешивают в течение 1 ч и для получения липосом переносят в реактор гомогенизатора типа "a-Laval", где подвергают обработке, которую проводят при температуре 35-40°С и давлении 5,8х х10 Па. Время проведения гомогенизации в течение одного цикла - 5 мин. Затем в течение 10 мин проводят охлаждение реакционной смеси до температуры 33-35°С, после чего процесс повторяют при указанном режиме. После проведения 7 циклов и достижения оптической плотности не более 0,08-0,14 при 540 нм процесс прекращают. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации и разливу во флаконы. Выход целевого продукта составляет 9,4 л. Продолжительность процесса получения 1 л препарата -16 мин. Индекс окисленности -0,32. Включение препарата платины в липосомы - 88%. Примерз. Спиртовый раствор природных фосфолипидов, содержащий 160 г фосфа тидилхолина яичного желтка, высушивают в вакууме при температуре 35-37°С до получения тонкой липидной пленки. Полученную пленку фосфолипидов эмульгируют в 10 л водного раствора, содержащего 4 г препараты платины и 2,0 кг глюкозы или лактозы. Смесь перемешивают в течение 1 ч и для получения липосом переносят в реактор гомогенизатора типа "a-Laval", где подвергают обработке, которую проводят при температуре 35-40°С и давлении 6,4х х10 Па. Время проведения гомогенизации в течение одного цикла - 5 мин. Затем течение 10 мин проводят охлаждение реакционной смеси до температуры 33-35°С, после чего процесс повторяют при указанном режиме. После проведения 7 циклов и достижения оптической плотности не более 0,08-0,14 при 540 нм процесс прекращают. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации и разливу во флаконы. Выход целевого продукта составляет 9,5 д. Продолжительность процесса получения 1 л препарата - 20 мин. Индекс окисленности -0,34. Включение препарата платины в липосомы - 89%.