Спосіб одержання липосомальної форми протипухлинного цитостатика

Изобретение относится к фармации, а именно к способу получения липосомального препарата, который может быть использован в качестве противоопухолевого средства. Наиболее близким к предлагаемому способу является способ получения липосомального препарата путем высушивания смеси липидов: лецитина (фосфатидилхолина) и холестерола в вакууме, эмульгирования липидов в водной среде, содержащей цитостатик - фторурацил, получения липосом дезинтегрированием ультразвуком с последующей очисткой от невключенного цитостатика, стерилизующей фильтрации и разлива [1]. Данный способ имеет ряд недостатков: окисление фосфолипидов в процессе получения липосом, низкий процент включения цитостатика в липосомы, отсутствие пролонгированного действия при внутривенном введении (длительность обнаружения препарата в крови), длительность технологии. В основу изобретения поставлена задача создать способ получения липосомальной формы противоопухолевого цитостатика, в котором технологические стадии и параметры процесса позволили бы получить препарат с низким индексом окисленности и стабильными физико-химическими свойствами, повысить процент включения цитостатика в липосомы, увеличить лролонгированность препарата при введении и сократить длительность технологии. Поставленная задача решается тем, что в способе получения липосомальной формы противоопухолевого цитостатика, включающем высушивание липидов в вакууме, эмульгирование липидов в водной среде, содержащей цитостатик, получение липосом, стерилизующую фильтрацию и разлив, согласно изобретению, эмульгирование проводят в среде, содержащей глюкозу в количестве 10-20 мас.% или лактозу в количестве 10-15 мас. % и поливинилпироллидон в количестве 0,2-0,6 мас.% гри соотношении цитостатик: фосфолипиды 1:(10-16), а процесс получения липосом осуществляют гомогенизацией липидной эмульсии пои температуре 38-42°С и давлении 5,6*107 — 6,1*107Па. В табл. 1-6 приведены данные, обосновывающие достаточность выбранных соотношений для достижения обеспечиваемого изобретением технического результата. Как видно из данных, приведенных в табл.1 и табл.2, оптимальными являются содержание глюкозы 10-20 мас.%, а лактозы 10-15мас.%. Использование концентраций ниже указанных приводит к увеличению оптической плотности и снижению стабильности липосом, а увеличение концентраций приводит к снижению включения цитостатика в липосомы. Как видно из данных, приведенных в табл.3, оптимальным является содержание поливинилпироллидона 0,2-0,6 мас.%. Использование концентраций нижеуказанных приводит к снижению длительности обнаружения препарата в крови, а увеличение концентрации приводит к снижению включения цитостатика в липосомы и увеличению оптической плотности препарата. Как видно из данных, приведенных в табл.4, оптимальным является соотношение цитостатик: фосфолипиды 1 :(10—16). Использование соотношений ниже указанных приводит к неполному включению цитостатика в липосомы, а увеличение соотношения приводит к увеличению оптической плотности, что затрудняет стерилизующую фильтрацию продукта. Как видно из данных, приведенных в табл.5, оптимальной является температура 38-42°С. Использование температуры менее указанной величины не приводит к получению эмульсии с необходимой оптической плотностью, а повышение температуры приводит к окислению препарата, т.е. к увеличению индекса окисленности. Как видно из данных, приведенных в табл,6.,оптимальным является давление 5,6*107-6,1*107 Па. Использование давления ниже указанного не дает эмульсии необходимой оптической плотности, а использование более высокого давления приводит к увеличению индекса окисленности, что в свою очередь приводит к нестабильности препарата. Преимущества предлагаемого способа по сравнению с прототипом приведены в табл.7. Возможность осуществления изобретения иллюстрируется следующими примерами: Пример 1. Спиртовый раствор фосфатидилхолина яичного желтка, содержащий 200 г фосфатидилхолина, высушивают в вакууме при температуре 35-37°С до получения тонкой липидной пленки. Полученную пленку фосфатидилхолина эмульгируют в 10 л водного раствора, содержащего 20 г фторурацила, 1,0 кг глюкозы или 1,0 кг лактозы и 20 г поливинилпироллидона. Смесь перемешивают в течение 1 ч и для получения липосом переносят в реактор гомогенизатора типа "ct-Lava!", где подвергают обработке, которую проводят при температуре 38°С и давлении 5,6-10 Па. Время проведения гомогенизации в течение одного цикла 5 мин. Затем в течение 10 мин проводят охлаждение реакционной смеси до температуры 36-38°С, после чего процесс повторяют при указанном режиме. После проведения 10 циклов и достижения оптической плотности не более 0,20-0,23 при 540 нм процесс прекращают. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации и разливу во флаконы. Продолжительность процесса получения 1 л препарата - 4 мин. Индекс окисленности - 0,50. Включение цитостатика - фторурацила в липосомы - 75%. Длительность обнаружения препарата в крови - 12 ч. Пример 2. Спиртовый раствор фосфатидилхолина яичного желтка, содержащий 260 г фосфатидилхолина, высушивают в вакууме при температуре 35-37°С до получения тонкой липидной пленки. Полученную пленку фос-фагидилхолина эмульгируют в 10 л водного раствора, содержащего 20 г фторурацила, 2,0 кг глюкозы или 1,5 кг лактозы и 40 г поливинилпироллидона. Смесь перемешивают в течение 1 ч и для получения липосом переносят в реактор гомогенизатора типа "a -Laval", где подвергают обработке, которую проводят при температуре 40°С и давлении 5.8Ί07 Па. Время проведения гомогенизации в течение одного цикла 5 мин. Затем в течение 10 мин проводят охлаждение реакционной смеси до температуры 36-38°С, после чего процесс повторяют при указанном режиме, После проведения 10 циклов достижения оптической плотности не более 0,20-0,23 при 540 нм процесс прекращают. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации и разливу по флаконы. Продолжительность процесса получения 1 л препарата - 5 мин. Индекс окисленности -0,53. Включение цитостатика - фторурацила в липосомы - 78%. Длительность обнаружения препарата в крови - 12,5 ч. Пример 3. Спиртовый раствор фосфатидилхолина яичного желтка, содержащий 320 г фосфатидилхолина, высушивают в вакууме при температур© 35-37°С до получения тонкой липидной пленки. Полученную пленку фосфатидилхолина эмульгируют в 10 л водного раствора, содержащего 20 г фторурацила, 1,5 кг глюкозы или 1,3 кг лактозы и 60 г поливинилпироллидона. Смесь перемешивают в течение 1 ч и для получения липосом переносят в реактор гомогенизатора типа "a-Laval", где подвергают обработке, которую проводят при температуре 42°С и давлении 6.1*107Пa. Время проведения гомогенизации," в течение одного цикла 5 мин. Затем в течение 10 мин проводят охлаждение реакционной смеси до температуры 36-3ff°C после чего процесс повторяют при указанном режиме. После проведения 10 циклов и достижения оптической плотности н0 более 0,20-0,23 при 540 нм процесс прекращают. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации и разливу во флаконы. Продолжительность получения 1 л препарата - 5 мин, Индекс окисленности -0.55. Включение цитостатика - фторурацила в липосомы - 80%. Длительность обнаружения препарата в крови - 13,5 ч.