Спосіб одержання липосомальної форми протипухлинного антибіотика

Изобретение относится к фармации, а именно к способу получения липосомального препарата, который может быть использован в качестве противоопухолевого средства. Известен способ получения липосомального препарата путем эмульгирования фосфолипидов в водной среде, содержащей антибиотик, с последующим воздействием ультразвука [1]. Данный способ имеет ряд существенных недостатков: длительность процесса, низкий выход целевого продукта, высокий индекс окисленности продукта, что затрудняет промышленное внедрение препарата. Наиболее близким к предлагаемому способу является способ получения препарата путем высушивания смеси липидов: фосфатидилхолина, кардиолипина (дифосфатидилглицерина) и холестерина в вакууме, эмульгирования липидов в водной среде, содержащей антибиотик, получения липо-сом дезинтегрированием ультразвуком с по-следующим отделением несвязанного антибиотика диализом, стерилизующей фильтрации и разлива [2]. Данный способ имеет ряд недостатков: окисление фосфолипидов в процессе ультразвукового воздействия, длительность процесса за счет низкой производительности оборудования и диализа, нестабильность физико-химических свойств в процессе получения и хранения, нестандартность состава. В основу изобретения поставлена задача создать способ получения липосомальной формы противоопухолевого антибиотика, в котором технологические стадии и параметры процесса позволили бы получить препарат с низким индексом окисленности и стабильными физическими свойствами, сократить длительность технологии и за счет этого повысить выход целевого продукта. Поставленная задача достигается тем, что в способе получения липосомальной формы противоопухолевого антибиотика, включающем высушивание фосфолипидов в вакууме, эмульгирование липидов в водной среде, содержащей антибиотик, получение липосом, стерилизующую фильтрацию, согласно изобретению, эмульгирование проводят в среде, содержащей глюкозу в количестве 18-22 мас.%, при соотношении антибиотик :фосфолипиды 1:(17-20), а процесс получения липосом осуществляют гомогенизацией липидной эмульсий при температуре 35-40°С и давлении 5,4 · 10 -5,8 · 107Па. В табл. 1-4 приведены данные, обосновывающие достаточность выбранных соотношений для достижения обеспечиваемого изобретением технического результата. Как видно из данных, приведенных в табл, 1, оптимальным является содержание глюкозы 18-22 мас.%. Использование концентраций ниже указанных приводит к увеличению оптической плотности, а увеличение концентрации приводит к снижению включения антибиотика в липосомы. Как видно из данных, приведенных в табл. 2, оптимальным является соотношение антибиотик:фосфолипиды 1:(17—20). Использование соотношений ниже указанных приводит к неполному включению антибиотика в липосомы, а увеличение соотношения приводит к увеличению оптической плотности, что затрудняет стерилизующую фильтрацию продукта. Как видно из данных, приведенных в табл. 3, оптимальной является температура 35-40°С. Использование температуры менее указанной величины не приводит к получению эмульсии с необходимой оптической плотностью, а повышение температуры приводит к окислению препарата, т.е. к увеличению индекса окисленности. Как видно из данных, приведенных в табл. 4, оптимальным является давление 5,4х χ 10 - 5,8 · 107 Па. Использование давле : ния ниже указанного не дает эмульсии необходимой оптической плотности, а использование более высокого давления приводит к увеличению индекса окисленности, что в свою очередь приводит к нестабильности препарата. Преимущества предлагаемого способа по сравнению с прототипом приведены* в табл. 5. Возможность осуществления изобретения иллюстрируется следующими примерами. Πример 1. Спиртовый раствор природных фосфолипидов, содержащий 60 г фосфатидилхолина яичного желтка и 8 г дифосфатидилглицерина крупного рогатого скота, высушивают в вакууме при температуре 35-37°С до получения тонкой липидной пленки, Полученную пленку фосфолипидов эмульгируют в. 10 л водного раствора, содержащего 4 г доксорубицина (или любого другого антибиотика антрациклинового ряда: карминомицина, фарморубицина, адриабла-стина и др.) и 1,8 кг глюкозы. Смесь перемешивают в течение 1 ч и для получения липосом переносят в реактор гомогенизатора типа "α-Laval", где подвергают обработке, которую проводят при темпер этуре 35°С и давлении 5,4 -107 Па. Время проведения гомогенизации в течение одного цикла - 5 мин. Затем в течение 10 мин проводят охлаждение реакционной смеси до температуры 3335°С, после чего процесс повторяют при указанном режиме. После проведения 10 циклов и достижения оптической плотности не более 0,25-0,27 при 540 нм процесс прекращают. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации и розливу во флаконы. Выход целевого продукта составляет 9,4 л. Продолжительность процесса получения 1 л препарата - 20 мин. Индекс окисленности - 0,38. Пример 2. Спиртовый раствор природных фосфолипидов, содержащий 65 г фосфатидилхолина яичного желтка и 9 г дифосфатидилглицерина крупного рогатого скота, высушивают в вакууме при температуре 35-37°С до получения тонкой липидной пленки. Полученную пленку фосфолипидов эмульгируют в 10 л водного раствора, содержащего 4 г доксорубицина и 2 кг глюкозы. Смесь перемешивают в течение 1 ч для получения липосом переносят в реактор гомогенизатора типа "α-Laval", где подвергают обработке, которую проводят при температуре 37°С и давлении 5,6 · 10 Па. Время проведения гомогенизации в течение одного цикла - 5 мин. Затем в течение 10 мин проводят охлаждение реакционной смеси до температуры 33-35°С, после чего процесс повторяют при указанном режиме. После проведения 10 циклов и достижения оптической плотности не более 0.25-0,27 при 540 нм процесс прекращают. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации и розливу во флаконы. Выход целевого продукта составляет 9,6 л. Продолжительность процесса получения 1 л препарата - 23 мин. Индекс окисленности - 0,4. Пример 3. Спиртовый раствор природных фосфолипидов, содержащий 70 г фосфатидилхолина яичного желтка и 10 г дифосфатидилглицерина крупного рогатого скота, высушивают в вакууме при температуре 35-37°С до получения тонкой липидной пленки. Полученную пленку фосфолипидов эмульгируют в 10 л водного раствора, содержащего 4 г доксорубицина и 2,2 кг глюкозы. Смесь перемешивают в течение 1 ч и для получения липосом переносят в реактор гомогенизатора типа "а-Laval", где подвергают обработке, которую проводят при температуре 40°С и давлении 5,8· 10 Па. Время проведения гомогенизации в течение одного цикла - 5 мин. Затем в течение 10 мин проводят охлаждение реакционной смеси до температуры 33-35°С, после чего процесс повторяют при указанном режиме. После проведения 10 циклов и достижения оптической плотности не более 0,25-0,27 при 540 нм процесс прекращают. Полученный раствор подвергают стерилизующей фильтрации и розливу во флаконы. Выход целевого продукта составляет 9,5 л. Продолжительность процесса получения 1 л препарата - 25 мин. Индекс окисленности -0.42. ·