Спосіб диференціальної діагностики активного та неактивного атеросклерозу

Способ дифференциальной диагностики активного и неактивного атеросклероза, включающий исследование периферической крови, в процессе которого выделяют моноциты и определяют уровень диагностического критерия, отличающийся тем, что в качестве диагностического кри 28368 - При содержании липидсодержащих моноцитов менее 40% относительно общего количества моноцитов диагностируют неактивный атеросклероз. Использование цитологического показателя – числа липидсодержащих моноцитов в качестве диагностического критерия обусловлено тем, что в развитии атеросклероза моноциты играют большую роль. Прогрессирование атеросклероза характеризуется повреждением эндотелия артерий, увеличением сосудистой проницаемости и проникновением в интиму артерий компонентов плазмы крови и форменных элементов крови. При обостении течения атеросклероза инфильтрация интимы артерий моноцитами на участках повреждений достигает 80% от общего числа клеток сосудистой стенки. Для осуществления предложенного способа необходимо приготовить цитологический мазок из выделенных моноцитов. Выбранный диагностический критерий служит интегральным показателем тяжести течения и фазы атеросклеротического процесса у человека. По предлагаемому способу проведены исследования в клинике Института терапии АМН Украины на трех группах лиц: здоровых (6 человек), больных коронарным атеросклерозом с неактивной фазой течения заболевания (15 человек) и больных коронарным атеросклерозом в фазе обострения и быстрого прогрессирования заболевания (17 больных нестабильной стенокардией). По результатам исследования установлено, что содержание липидсодержащих моноцитов, равное более 40% относительно общего количества моноцитов, характерно для фазы активного атеросклероза, а содержание липидсодержащих моноцитов, равное менее 40% относительно той же величины, характерно для неактивного атеросклероза. Достоверность предлагаемого способа диагностики - 95%. Отличительные признаки соответствуют критерию "новизна" и требованиям изобретательского уровня. Использование данного способа диагностики в медицинской практике позволяет упростить способ без снижения достоверности исследования, уменьшить количество биологического материала - крови, необходимой для осуществления способа (до 5 мл), снизить продолжительность исследования (до 3-х часов), а также дает возможность проводить контроль эффективности лечения путем индивидуального подбора адекватной терапии. Предлагаемый способ осуществляют следующим образом: 1. Производят забор крови из локтевой вены натощак в количестве от 2,5 до 5 мл. 2. Выделяют из крови суспензию моноцитов в градиенте плотности путем градиентного центрифугирования по известной методике. 3. Фиксируют моноциты в парах нейтрального альдегидного фиксатора (рН 7,0) в течение 15 минут. 4. Отмывают моноциты от фиксатора в изотоническом растворе фосфатного буфера (рН 7,0). 5. Готовят цитологический мазок, который сушат на воздухе. 6. Окрашивают цитологический мазок на липиды. 7. Исследуют цитологический мазок с помощью светового микроскопа под иммерсионным объективом при увеличении ´ 900 в 20 случайных полях зрения не менее и определяют количество липидсодержащих моноцитов в общей популяции и среди них количество всех моноцитов. 8. Диагностируют активный атеросклероз при содержании липидсодержащих моноцитов более 40% относительно общего количества моноцитов. 9. Диагностируют неактивный атеросклероз при содержании липидсодержащих моноцитов менее 40% относительно общего количества моноцитов. Примеры 1. Больной Б., 56 лет, поступил в клинику Института терапии АМН Украины с жалобами на загрудинные боли при быстрой ходьбе и физической нагрузке, которые купировались после приема нитроглицерина. В клинике больной Б. прошел обследование, ему поставлен диагноз: ИБС, стабильная стенокардия напряжения III функциональный класс. Атеросклеротический кардиосклероз. Недостаточность кровообращения (НК-llа). Для подтверждения диагноза был взят для исследования биологический материал - кровь из вены в количестве 5 мл. По предлагаемому способу проводят исследование периферической крови, в процессе которого выделяют моноциты и определяют цитологический показатель - число липидсодержащих моноцитов в популяции мононуклярных клеток крови. Для этого фиксируют моноциты в нейтральном альдегидном фиксаторе, отмывают их в изотоническом физиологическом растворе, готовят цитологический препарат, клетки которого окрашивают на липиды. Путем микроскопии определяют количество липидсодержащих моноцитов в общей популяции. Результат исследования крови у больного Б.: число липидсодержащих моноцитов составило 32,4% от общего количества моноцитов, т.е. менее 40%, что свидетельствует о неактивной фазе атеросклероза, Заключение: Полученные данные подтверждают, что для лиц с неактивным атеросклерозом, стабильной стенокардией напряжения, Іll функциональный класс характерно наличие в крови менее 40% липидсодержащих моноцитов. После адекватного подбора антиангинальной терапии клиническое состояние больного Б. стабилизировалось, процентное содержание липидсодержащих моноцитов было снижено до 2%. Больной Б. выписан из клиники в удовлетворительном состоянии. 2. Больной С., 52 лет, поступил в клинику Института терапии АМН Украины и острыми болями в области сердца, которые начались ночью и не прекратились после приема нитроглицерина. В клинике больной С. был обследован, поставлен диагноз: ИБС: прогрессирующая стенокардия напряжения. Атеросклеротический и постинфарктный (1994 год) кардиосклероз, НК-llа. Для подтверждения диагноза проведено исследование крови, для чего у больного С. взяли из вены кровь в количестве 2,5 мл. По предлагаемому способу провели исследование по методике, 2 28368 описанной в примере 1, и определили цитологический показатель - число липидсодержащих моноцитов в популяции мононуклярных клеток крови. Результат исследования: в крови больного С. процентное содержание липидсодержащих моноцитов составило 51,6% от общего числа мононуклярных клеток крови, т.е. более 40% относительно общего количества моноцитов. Уточнен диагноз: обострение и быстрое прогрессирование атеросклероза, т.е. активный атеросклероз. Заключение: Полученные данные подтверждают, что у больных прогрессирующей стенокардией характерно наличие в крови более 40% липидсодержащих моноцитов. После антиангинальной терапии состояние больного оставалось прежним, процентное число липидсодержащих моноцитов снизилось на 2% и составило 49,4%. У больного С. на 4-ый день пребывания в стационаре течение нестабильной стенокардии осложнилось обширным инфарктом миокарда, и ему назначено адекватное лечение. __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 35 прим. Зам._______ ____________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 ___________________________________________________________ 3