Спосіб діагностики ранніх стадій туберкульозу

Спосіб діагностики ранніх стадій туберкульозу шляхом визначення активації лейкоцитів крові по кількості зв'язаного з ним кальцію, який відрізняється тим, що хворому додатково проводять пробу Манту і при підвищенні ступеня люмінісценції лейкоцитів крові після цієї проби в 1,5 і більше разів діагностують туберкульоз. (19) (21) 97126237 (22) 25.12.1997 (24) 16.10.2000 (33) UA (46) 16.10.2000, Бюл. № 5, 2000 р. (72) Сидоренко Ольга Миколаївна, Слінченко Микола Зіновійович, Філіпченко Лідія Лаврентіївна (73) УКРАЇНСЬКИЙ НАУКОВО-ДОСЛІДНИЙ ІНСТИТУТ ПРОМИСЛОВОЇ МЕДИЦИНИ 29052 В сегментоядерних лейкоцитах, що містять накопичення катіонів кальцію, спостерігається яскрава золотисто-біла флуоресценція. Ядра клітин виглядають темними фігурами характерної для кожної клітинної популяції форми. Часто ядра не виявляються. Еритроцити не флуоресціюють. Оцінюють реакцію в мікроскопі швидко, рухаючи препарат, щоб уникнути знебарвлення лейкоцитів при довгому опромінюванні. Чим вища функціональна активність клітин, тим більше в них накопичується кальцію і отже тим яскравіша їх люмінісценція (Ю.А. Владимиров, Т.Е. Добрецов, 1980; Дж. Смоулен, Дж. Вайссманн, 1984). Різниця в інтенсивності люмінесценції клітин в залежності від їх фізіологічного (чи патологічного) стану настільки значна, що відпадає необхідність використання люмінесцентних фотометричних приставок, чи дуже коштовних мікроспектрофлуориметрів. Тут цілком достатнє напівкількісне визначення рівня люмінесценції у вигляді цифрових показників. "0" - люмінісценція клітин на рівні фонової; "1" - яскравість клітин ледве перевищує фонову; "2" - помірна, але чітка люмінісценція клітин; "З" - дуже яскраві клітини. Спосіб пояснюється такими прикладами: Приклад 1 Гірник С., 38 років, 11 років пилового стажу (кріпильник, дробильник). Скарги на сухий кашель, задишку, субфебрильну температуру, підвищену пітливість, слабкість. Вважає себе хворим протягом останніх 5 років, коли з'явився сухий кашель вранці. Рентгенографія: Корені тяжисті, ущільнені. Куполи діафрагми рівні, чисті. Серце без особливостей. Аналіз крові: Эр. - 4,9; Нв. - 144; цв.п. - 0,8; Л - 4,5; э - 1; п - 4,5; с - 49; л - 41,5; СОЕ - 8. Цитограма бронхо-альвеолярного лаважу /БАЛ/: результати цитограми показують на вірогідний розвиток силікотуберкульозу з прихованим перебігом. Відмічається зниження рівня місцевого клітинного імунітету (СМФ-66,5%), поява 1,5% гігантських клітин Пірогова-Лянгганса, зменшення кількості лімфоцитів в 3 рази та поява 30% коніофагів. Реакція Манту: 1´1,5 см. Концентрація протитуберкульозних антитіл за даними імуно-ферментного аналізу (ІФА) дорівнює 0,257 (норма - 0,12). Клінічний діагноз: Хронічний катаральний необструктивний бронхіт в фазі нестійкої ремісії. Дихальна недостатність 0-1 ст. В оброблених мазках крові до проведення проби Манту люмінісценція лейкоцитів оцінена як "1". Після проби Манту люмінісценція лейкоцитів дорівнювала "3" тобто, підвищилася в 3 рази. Висновок: Рання стадія туберкульозу. Приклад 2 М., 41 рік, 21 рік підземного стажу ГРОЗ (гірник очисного забою). Скарги на кашель з мокротою, підвищену втомлюваність, знаходиться на "Д" обліку по хронічному бронхіту 3 останніх роки. Аналіз крові: Эр. - 4,6; Нв. - 130; цв.п. - 0,84; Л - 4,0; э - 1,5; П - 7; с - 48,5; л - 39; м - 4; СОЕ - 6. Рентгенографія: Легеневий малюнок нерізко посилений. Корені зниженої структурності. Куполи діафрагми на рівні VІ ребра. Серце без особливостей. Цитограма БАЛ: результати цитограми показують на розвиток силікотуберкульозу з прихованим перебігом. Відмічається зниження місцевого клітинного імунітету (СМФ-61%), зниження кількості лімфоцитів в 3-3,5 рази, поява 1,5% гігантських клітин Пірогова-Лангганса і 36% коніофагів. Реакція Манту від'ємна. Концентрація протитуберкульозних антитіл за даними імуноферментного аналізу (ІФА) дорівнює 0,303 (норма - 0,12). Клінічний діагноз: Пиловий бронхіт в фазі загострення. Емфізема легенів 1 ст. ДН-1 ст. В мазках крові до проведення проби Манту люмінісценція лейкоцитів оцінена як "2". Після проби Манту люмінісценція лейкоцитів дорівнювала "3". Висновок: Рання стадія туберкульозу. Приклад 3 С., лікар, 35 років. Скарг немає. Аналіз крові: Эр. - 4,1; Нв. - 120; цв.п. - 0,89; Л - 6,85; э - 3; п - 2; с - 56; л - 28; м - 10; СОЕ - 8. Рентгенографія: Очагових тіней немає. Легеневий малюнок не змінений. Корені структурні. Серце без особливостей. Реакція Манту від'ємна. В мазках крові до проведення проби Манту люмінісценція лейкоцитів оцінена як "1". Після проби Манту люмінісценція лейкоцитів дорівнювала "1". Висновок: Здоровий. Приклад 4 П., науковий співробітник, 40 років. Скарг немає. Аналіз крові: Эр. - 5,2; Нв. - 148; цв.п. - 0,88; Л - 7,75; э - 6; п - 1; с - 54; л - 32; м - 6; СОЕ - 5. Рентгенографія: Очагових тіней не виявлено. Легеневий малюнок не змінений. Корені трохи зниженої структурності. Серце без особливостей. Реакція Манту: 0,5´0,5 см. В мазках крові до проведення проби Манту люмінісценція лейкоцитів оцінена як "2". Після проби Манту люмінісценція лейкоцитів не змінилася і дорівнювала "2". Висновок: Здоровий. Спосіб заснований на результатах досліджень 30 хворих з клінічним діагнозом пиловий бронхіт та 18 здорових осіб. Кількісний вираз діагностично значущих показників одержували шляхом поділу показників ступеню люмінісценції лейкоцитів після проби Манту на показники до цієї проби. Для підтвердження діагнозу у хворих визначались суб’єктивні показники (скарги), "профмаршрут", проводились аналіз крові, рентгенографія легенів, реакція Манту, бронхо-альвеолярний лаваж (БАЛ). Статистична обробка результатів спостережень проведена за загальноприйнятою методикою (А.Н. Венчиков, В.А. Венчиков. "Основные приемы статистической обработки результатов наблюдений в области физиологии". М.: Медицина, 1974). Дані показані в таблиці. Запропонований спосіб є допоміжним, він простий і дозволяє проводити діагностику ранніх стадій туберкульозу, які клінічно часто проявляються під масками інших легеневих захворювань, напри 2 29052 клад, хронічного бронхіту та інших. Рання діагностика цього захворювання дає можливість своєчасно проводити патогенетичне лікування. Для здійснення способу потрібні туберкулін, метанол, док сациклін, люмінесцентний мікроскоп або люмінісцентний освітлювач типу ОЛ-18 до звичайного мікроскопу. Таблиця Люмінісценція лейкоцитів Статистичні показники п М±m Р Контрольна група (здорові особи) До Манту 18 1,89±0,11 після Манту 18 1,94±0,13 >0,5 Хворі до Манту 30 1,60±0,15 __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 34 прим. Зам._______ __________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 __________________________________________________________ 3 після Манту 30 2,80±0,088