Спосіб діагностики ендокардиту стафілококової етіології

Спосіб діагностики ендокардиту стафілококової етіології, що включає дослідження сироватки крові хворого з використанням антигену стафілококів, який відрізняється тим, що як антиген використовують тейхоєву кислоту, яку 3 30934 4 про наявність стафілококової інфекції. [Г.М. Дослідження показали, що при застосуванні Воробйова, А.В. Руденко, З.Т. Баланнік, Т.Ю. тест-системи на основі тейхоєвої кислоти взагалі Шляхтиченко. Спосіб діагностики інфекційного не виявляли перехресних реакцій до ТК таких ендокардиту стафілококової етіології. Патент № бактерій, як Staphylococcus saprophyticus та 97084277. 16.10.2000, Бюл. №5, 2000р.]. Micrococcus luteus у групі хворих на ендокардит, Недоліком вказаного способу є довготривалий тоді як специфічні антитіла до тейхоєвої кислоти час його підготовки і проведення, та невисока Staphylococcus aureus були виявлені у 99,0-99,7% чутливість, яка становить 87,5-87,9%. обстежених. Тому тест-система є високочутливою, В основу корисної моделі поставлена задача і забезпечує діагностику ендокардиту у 99,0-99,7% створити спосіб діагностики ендокардиту хворих. стафілококової етіології, шляхом виявлення Таким чином, в результаті отриманих даних специфічних антитіл до тейхоєвої кислоти щодо розробки та апробації тест-системи для Staphylococcus aureus Wood 46, який би діагностики стафілококового ендокардиту, було забезпечив можливість експресної діагностики виявлено специфічні антитіла до тейхоєвої ендокардиту ста філококової етіології, за рахунок кислоти Staphylococcus aureus, а також визначено скорочення часу його проведення, і мав високу їх середні та діагностичне значимі титри. чутливість завдяки використанню Стафілококову етіологію захворювання імуноферментного аналізу та розробці на його встановлювали на основі клінічних спостережень, основі тест-системи з оптимальними умовами даних анамнезу і підтверджували виділенням проведення. Staphylococcus aureus з урахуванням його Поставлене завдання вирішується тим, патогенних властивостей. що в способі діагностики ендокардиту У даній сукупності ознак з використанням стафілококової етіології, який полягає у тейхоєвої кислоти Staphylococcus aureus штаму дослідженні сироватки крові хворих з Wood - 46 та сироватки крові хворого на використанням антигена стафілокока, згідно з ендокардит, встановлено, що тейхоєва кислота корисною моделлю, в якості антигена виступає в ролі специфічного діагностикума. використовують тей хоєву кислоту, яку адсорбують Спосіб, що пропонується є експресним і дозволяє на тверду фазу, для запобігання неспецифічної проводити ідентифікацію протягом 2,5-3 годин, з реакції, блокують вільні місця зв'язування, моменту одержання сироватки крові хворого. відмивають систему тверда-фаза - антиген від [Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б., незв'язаного антигену, вносять досліджувані Гаврилова Е.М. Теория и практика сироватки крові для виявлення гомологічних, иммуноферментного анализа. - М.: Высш.шк., первинних, специфічних антитіл, систему 1991.-288 с.]. відмивають від молекул, що не зв'язалися, вносять Приклад конкретного використання: антитіла проти імуноглобулінів людини, які мічені У лунки планшета вносили тейхоєву кислоту пероксидазою хріну для утворення імунного та інкубували в термостаті протягом 30 хвилин, комплексу, відмивають від молекул, що при температурі 37°С, додавали розчин бичачого незв'язалися, вносять розчин хромоген-субстрата сироваткового альбуміну, інкубували протягом 30 для проявлення реакції, зупиняють реакцію хвилин при температурі 37°С, після кожної внесенням двох молярної сірчаної кислоти, інкубації планшети відмивали розчином твіну-20 вимірюють оптичну густину розчину, визначають при перемішуванні, вносили досліджувані титр специфічних антитіл, за значенням якого сироватки крові, розведені у твін-фосфатному діагностують ендокардит стафілококової етіології. буфері, інкубували впродовж 30 хвилин при У здорових осіб, сироватки крові не містять температурі 37°С, планшети відмивали в специфічних антитіл, і які відповідно не зв'язали описаному вище режимі, вносили антитіла проти кон'югованих з пероксидазою імуноглобулінів, імуноглобулінів людини, мічені пероксидазою хріну спостерігаються низькі значення показників у робочому розведенні 1:800 (в ТФБ), планшети оптичної густини, в зв'язку з тим, що відновлення інкубували протягом години при 37°С, відмивали хромоген субстрату відбувається на низькому чотири рази розчином твіну-20 в ЗФР рівні, тому значення титру специфічних антитіл (Фізіологічний розчин NaCI забуферений буде низьким. фосфа тами), для проявлення реакції в лунки При стафілококовому ендокардиті найбільш планшета вносили розчин хромоген-субстрата, що часто виявляли антитіла до тейхоєвої кислоти містить ортофенілендиамін і перекис водню, Staphylococcus aureus, яка складає близько 50% зупиняли реакцію внесенням двох молярної маси клітинної стінки і викликає в організмі імунну сірчаної кислоти в лунки планшета, вимірювали реакцію, про що свідчить високий рівень антитіл у оптичну густину одержаного розчину, визначали сироватці крові хворих різних вікових груп, тому титр специфічних антитіл, який порівнювали з визначення антитіл до тейхоєвої кислоти має контрольними показниками. Час проведення діагностичне значення [Tenenbaum M.J., Gordon A. реакції становив 2,5-3 години. - South, med. J., 1980, v.73, p. 140-143]. Специфічні антитіла виявляли у 99,0-99,7% Нами були проаналізовані сироватки хворих обстежених хворих, що вказує на високу на наявність перехресне реагуючих антитіл не чутливість способу. Стафілококова етіологія лише до тейхоєвої кислоти Staphylococcus aureus, захворювання підтверджувалася клінічними а й інших видів грампозитивних бактерій, зокрема спостереженнями, даними анамнезу та таких як Staphylococcus saprophyticus та мікробіологічним дослідженням крові хворого. Micrococcus luteus. 5 30934 Таким чином, запропонований спосіб діагностики є високочутливим і може бути використаний для експресної діагностики ендокардиту стафілококової етіології. 6