Спосіб вибіркового виявлення еритроцитів у целоїдинових гістологічних препаратах

Спосіб вибіркового виявлення еритроцитів у целоідинових ГІСТОЛОГІЧНИХ препаратах, що включає послідовне проведення через аміачне вуглекисле срібло, формалін, гіпосульфіт, спирти, ксилоли, бальзам, який відрізняється тим, що перед гіпосульфітом препарат проводять через 1% водний розчин фосфорно-молібденової кислоти протягом 30-40 секунд і витримують у 5% водному розчині гіпосульфіту до повного візуального знебарвлення Винахід відноситься до біологи та медицини і призначений для вибіркового виявлення еритроцитів в ГІСТОЛОГІЧНИХ препаратах шляхом їх фарбування Відомий спосіб вибіркового виявлення еритроцитів шляхом фарбування їх у чорний колір з застосуванням бензидину за методом Пікворса (Ромейс Б Микроскопическая техника - М , 1954 С 484) Недоліком відомого способу є те, що він малопридатний для целоідинових ГІСТОЛОГІЧНИХ препаратів Прототипом винаходу є спосіб фарбування ГІСТОЛОГІЧНИХ препаратів з застосуванням азотнокислої солі срібла по Рю-Хортега (Ромейс Б Микроскопическая техника - М , 1954 - С 370) При фарбуванні по цьому способу ГІСТОЛОГІЧНІ препарати послідовно проводять через розчин аміачного вуглекислого срібла (його готують змішуванням 50 см 3 10% AgNO3 з 150 см 3 5% Na2CO3, після чого додають покраплинно водний розчин аміаку тільки до моменту розчинення осаду, що перед тим утворився, об'єм розчину доводять до 750 мл), 0,01% водний розчин формаліну, при необхідності - через 0,2% розчин хлорного золота, 5% розчин гіпосульфіту, спирти, ксилол, бальзам В результаті всі цитоплазматичні структури препарату і еритроцити набувають коричневого кольору різного ступеня інтенсивності (в разі застосування хлорного золота - еритроцити коричнево-червоні, а всі ІНШІ структури набувають сіро-чорного забарвлення) Ядерні структури забарвлення не набувають препарату і еритроцити в судинах малого діаметру не завжди чітко контурують на фоні цих структур В основу винаходу "Спосіб вибіркового виявлення еритроцитів в целоідинових ГІСТОЛОГІЧНИХ препаратах" поставлене завдання шляхом заміни в технологічному процесі однієї хімічної сполуки іншою забезпечити вибіркове фарбування еритроцитарних мас пстолопчнонго препарату Поставлене завдання здійснюється способом вибіркового виявлення еритроцитів в целоідинових ГІСТОЛОГІЧНИХ препаратах, який полягає утому, що препарат послідовно проводять через аміачне вуглекисле срібло, формалін, гіпосульфіт, спирти, ксилоли, бальзам, в якому, згідно з винаходом, препарат перед гіпосульфітом замість хлорного золота проводять через 1% водний розчин фосфорно-молібденової кислоти протягом 30-40 секунд і витримують у 5% водному розчині гіпосульфіту до повного візуального знебарвлення На фото представлено фіг 1 - загальнооглядове фарбування целоідинового зрізу нирки щура по методу Рю-Хортега з застосуванням хлорного золота (збільшення в 100 раз) Фіг 2 - вибіркове фарбування еритроцитів по запропонованому способу (збільшення в 100 раз) Фіг 3 - загальнооглядове фарбування целоідинового зрізу нирки щура по методу Рю-Хортега з застосуванням хлорного золота (збільшення в 400 раз) Фіг 4 - вибіркове фарбування еритроцитів по запропонованому способу (збільшення в 400 раз) На фото зображено 1 - еритроцити в капілярах клубочка 2 - канальці нефрона 3 - еритроцитарні маси в дуговій вені 4 - канальці нефрона зі знебарвленною цитоплазмою Недоліком відомого способу є те, при його застосуванні забарвлення різного ступеня інтенсивності набувають всі цитоплазматичні структури CO о (О 42603 5 - еритроцити навколоканальцевих судин 6 - непрофарбовані ядра епітеліальних клітин канальців Спосіб застосовують наступним чином: цілоїдинові зрізи проводять через дестильовану воду і переносять у розчин аміачного вуглекислого срібла (його готують змішуванням 50 см 3 10% АдІЧоз з 150 см 3 5% ЫагСОз, після чого додають покраплинно водний розчин аміаку тільки до моменту розчинення осаду, що перед тим утворився, об'єм розчину доводять до 750 мл), підігрітого до 4045°С на 1-2 хвилини (термін визначають експериментально, в залежності від товщини зрізу). Після цього препарат переносять у 0,01% розчин фор маліну на час, достатній для придбання всіма структурами препарату інтенсивного коричневого кольору. На наступному етапі гістологічний препарат занурюють у 1% водний розчин фосфорномолібденової кислоти на 30-40 секунд (залежно від товщини зрізу) і витримують у 5% водному розчині гіпосульфіту до повного візуального знебарвлення (еритроцити при цьому своє забарвлення не втрачають). Далі препарат проводять через батарею спиртів для обезводнювання, карболксилол, ксилол, бальзам. Таким чином отримують вибірково пофарбовані еритроцитарні маси на фоні інших знебарвлених структур. ФІГ. 1 Фіг. 2 42603 Фіг. З Фіг. 4 ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Киів-133, бульв Лесі Українки, 26 (044)295-81-42, 295-61-97 Підписано до друку Обсяг обл -вид арк 2002 р Формат 60x84 1/8 Тираж 50 прим Зам УкрІНТЕІ, 03680, Киів-39 МСП, вул Горького, 180 (044) 268-25-22