Спосіб ранньої діагностики діабетичної нефропатії у дітей з інсулінозалежним цукровим діабетом

Спосіб ранньої діагностики діабетичної нефропатії у дітей з інсулінозалежним цукровим діабетом шляхом визначення біохімічних маркерів діабетичної нефропатії у біологічних рідинах, який відрізняється тим, що визначають трансформуючий фактор росту бета-1 (ТФР-b1) у сироватці крові хворих і, якщо він складає 500 пг/мл та більше, то діагностують діабетичну нефропатію. (19) (21) u200905877 (22) 09.06.2009 (24) 25.11.2009 (46) 25.11.2009, Бюл.№ 22, 2009 р. (72) ЛЕЖЕНКО ГЕННАДІЙ ОЛЕКСАНДРОВИЧ, ПАШКОВА ОЛЕНА ЄГОРІВНА, КАМЕНЩИК АНДРІЙ ВОЛОДИМИРОВИЧ, РУДНЄВА ІННА ВОЛОДИМИРІВНА, ЧАКМАЗОВА ОЛЕНА МИКОЛАЇВНА (73) ЗАПОРІЗЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ, ЛЕЖЕНКО ГЕННАДІЙ ОЛЕКСАНДРОВИЧ, ПАШКОВА ОЛЕНА ЄГОРІВНА, КАМЕНЩИК АНДРІЙ ВОЛОДИМИРОВИЧ, РУДНЄВА ІННА 3 вже наслідком відповідних мікросудинних порушень. До того ж, у хворих на цукровий діабет, у зв'язку з відомими порушеннями імунітету, може також зустрічатися супутня патологія сечовивідної системи, наприклад латентна інфекція, що може суттєво впливати на зазначені у прототипі показники, особливо на канальцеву дисфункцію. До того ж зазначений спосіб потребує досить коштовних реактивів й обладнання. В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення способу діагностики діабетичної нефропатії у дітей з інсулінозалежним цукровим діабетом шляхом проведення визначення у сироватці крові хворих дітей рівнів трансфомуючого фактору росту (ТФР-1b), що забезпечить підвищення достовірності діагностики означеного патологічного стану та, відповідно, якість надання лікувально-профілактичних заходів дітям з цукровим діабетом. Поставлена задача вирішується тим, що у способі, який полягає у визначенні біохімічних маркерів діабетичної нефропатії у біологічних рідинах, новим є те, що визначають трансформуючий фактор росту бета-1 (ТФР-b1) у сироватці крові хворих, і якщо він складає 500пг/мл та більше, то діагностують діабетичну нефропатію. Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю ознак, що заявляються, та технічним результатом полягає у такому. В останні роки встановлено, що у виникненні діабетичної нефропатії важливу роль грають фактори росту, гіперпродукція яких приводить до порушення рівноваги між синтезом та розпадом компонентів базальної мембрани в бік посилення синтезу та диспропорції компонентів базальних мембран та Їх структурній організації. Стимулює підвищений синтез та накопичення в нирках цих факторів гіперглікемія, яка ініціює різні механізми, в тому числі активацію рецепторів до глікозильованих білків. Трансформуючий фактор росту бета1 (ТФР-bl) - найбільш вивчений поліфункціональний ростовий фактор, який відноситься до переважно протизапальних цитокінів. Мішенями ТФРb1 є різні клітини, оскільки експресія його високоафінного рецептору широко розповсюджена. При дії ТФР-b1 на імунну систему переважають ефекти, що пригнічують гемопоез, синтез запальних цитокінів, відповідь лімфоцитів на ІЛ-2, -4 та -7, формування цитотоксичних NK- та Т-клітин. В той же час він посилює синтез білків міжклітинного матриксу, сприяє загоєнню ран, оказує анаболічну дію, стимулює ангіогенез. Надлишкова активність ТФР-b1 може приводити до гіперпроліферативних процесів, таких, як гломерулонефрит, склерозування шкіри, цироз печінки, прогресуючий пухлинний ріст, тощо. У хворих на цукровий діабет підвищення ТФР-b1відбувається в мезенгіальних та ендотеліальних клітинах клубочків нирок. ТФР-b1 грає ключову роль в розвитку та прогресуванні діабетичної нефропатії. В експерименті було показано, що пригнічення синтезу ТФР-b1 приводить до попередження фіброзних змін в нирках, а застосування в лікуванні цукрового діабету поряд з належним глікемічним контролем препаратів, які 45768 4 нейтралізують дію ТФР-b1 (наприклад, специфічних антитіл або специфічного уповільнювача даного цитокіну) попереджує або уповільнює темпи розвитку діабетичної нефропатії. Проте більшість цих досліджень було проведено у дорослих пацієнтів та стосувалося екскреції ТФР-b1 з сечею. У той же час, нефропатія при цукровому діабеті є проявом системної мікроангіопатії, а, отже, виявлення ТФР-b1 у сироватці крові хворих, саме як системного маркеру мікросудинних ускладнень, може бути використаним, в тому числі, й при ранній діагностиці діабетичної нефропатії у дітей. Вибір зазначеного маркеру ранньої діагностики діабетичної нефропатії у дітей обумовлений тим, що він сприяє ремоделюванню ниркових судин та ранній дезорганізації базальної мембрани клубочків, гіпертрофічним процесам у судинах, що відбуваються на ранніх стадіях захворювання. Ці процеси відбуваються у всіх судинах на рівні мікроциркуляції, тому визначення ТФР-b1 саме у крові хворих віддзеркалює певний системний характер зазначених ранніх змін та може бути використаним у діагностиці діабетичної нефропатії у дітей. Визначення ТФР-b1 є досить простим та специфічним методом. Спосіб здійснюють таким чином. Хворій дитині натщесерце у сироватці крові проводять визначення ТФР-b1. При наявності змін, а саме при підвищеному рівні ТФР-1b (що перевищує 500пг/мл) у сироватці крові хворих дітей діагностують діабетичну нефропатію та можливий несприятливий перебіг захворювання. Приклад: Хвора Н., 1990 р.н. Знаходилась на стаціонарному лікуванні в ендокринологічному відділенні з 18.06.07 по 02.07.07. № історії хвороби 4767. Діагноз: Цукровий діабет, тип 1, тяжка форма, глікемічний контроль з високим ризиком для життя. Діабетична проліферативна ретинопатія. Діабетична нефропатія 2 ст. Діабетична полінейропатія, сенсорно-моторна форма. Страждає на цукровий діабет протягом 15 років. Отримує інсулін "Актрапід", "Протафан". Скарг не пред'являє. Об’єктивні дані Вага 64кг Зріст 160см. ІМТ 25,0 Шкіра: сухість шкіри. На стегнах-рожеві стрії. Підшкірна клітковина розвинута нормально. Дихання везикулярне, хрипів немає. Діяльність серця ритмічна, систолічний шум на верхівці серця. ЧСС 80хв. Живіт м'який, безболісний. Гепатоспленомегалія відсутня. Статевий розвиток відповідає віку. Дані лабораторного обстеження: Загальний аналіз крові 19.06.07: Ер 4,5; Нв 152 г/л, Л 8,0; Е 2%, П 1%, С 74%, М 1%, Л 22%, К.П. 1,0, РОЕ 5мм/г. Загальний аналіз сечі 19.06.07: у.в. 1021, цукор +, білок негат., ЛЦ 0-1, епітелій незнач., рН кисл. Аналіз сечі за Нечіпоренком 19.06.07: п.в.1019, білок негат., Ер негат., Лц 500. Біохімічний аналіз крові : серомук. 0,130, білок 77г/л, креатінін 95мкм/л, білірубін 8,9мкм/л, тимол. 0,69мкм/л, ACT 5 45768 0,1мкм/л, АЛТ 0,1мкм/л, Na 145,2ммоль/л, К 4,7 ммоль/л. Біохімічний аналіз крові відповідає нормі. Проба Реберга: Хв. діурез 0,35, креатінін сечі 12 500, креатінін крові 95, КФ 47,14, КР 99,2. Показники проби Реберга відповідають нормі. Глікемічний профіль 25.06.07: 11:0013,5ммоль/л; 12.30-10,4ммоль/л; 16:008,0ммоль/л; 18:00-5,3ммоль/л; 21:00-5,3ммоль/л ; 24:00-5,3ммоль; 6:00-5,1 ммоль/л (норма: 4,4-5,5 ммоль/л). ЕКГ 25.06.07: вольтаж достатній, синусова аритмія. Мікроальбумінурія 68мг/л (норма: до 30мг/л) Нв А1С: 7,4%. (норма: 4,8%-5,9%) Трансформуючий фактор росту 550пг/мл (норма: до 500пг/мл) Доплерографія судин нирок : аорта 11мм (норма: 10,01±0,39мм), максимальна швидкість кровотоку 60см/сек., (норма: 81,06±3,08см/сек.), мінімальна швидкість 21 см/сек., ( норма: 26,08±1,9 см/сек.), градієнт швидкості 1,45, (норма: 2,89±0,12), RI 0,99 (норма:0,67±0,01), РІ 2,74 (нор Комп’ютерна верстка Л. Ціхановська 6 ма: 1,03±0,02). Прояви сольового діатезу обох нирок. Інсулінотерапія: Актрапід 32 Од, Протафан 30 Од. Медикаментозна терапія: Еспа-ліпон 600,0 в/в, мілдронат 4,0 в/м, актовегін 2,0 в/в, енап 5мг, магнітотерапія на підшлункову залозу, лікувальна фізкультура. Таким чином, у хворої мало місце підвищення показників мікроальбумінурії та гликолізованого гемоглобіну, при допплерографії ниркових судин спостерігалося збільшення мінімальної та максимальної швидкості кровотоку, градієнту швидкості, індексу резистентності, зменшення пульсового індексу. Спостерігалося збільшення вмісту трансформуючого фактору росту у сироватці крові, та помірні зміни на ЕКГ, що свідчило також про формування кардіопатії, як прояву системної ангіопатії. Отже, отримані дані щодо вмісту трансформуючого фактору росту (ТФР-b1) дозволили підтвердити наявність діабетичної нефропатії та системної мікроангіопатії. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601