Спосіб визначення фунгіцидів класу стробілуринів у воді

Спосіб визначення фунгіцидів класу стробілуринів у воді, що включає підготовку проб води до 3 класу стробілуринів з суміші в одній пробі, оскільки не встановлені умови хроматографування. Задачею корисної моделі є одночасне визначення залишкових кількостей фунгіцидів класу стробілуринів (крезоксим-метилу та трифлоксистробіну) в одній пробі води, що дозволить прискорити час аналізу та знизить вартість виконання досліджень. Технічний результат, який отримали в результаті вирішення задачі полягає у одночасному визначення похідних стробілуринів в одній пробі, прискоренні швидкості визначення діючих речовин пестицидів класу стробілуринів (крезоксим-метилу та трифлоксистробіну) і зменшення витрат на його проведення. Поставлена задача досягається тим, що у відомому способі визначення залишкові кількості пестицидів у воді, що включає підготовку проб води до екстракції, проведення екстракції, концентрування та власне хроматографування, згідно корисної моделі, що змінюють умови хроматографування для чіткого розходження піків речовин (трифлоксистробіну та крезоксим-метилу), що знаходяться в одній пробі, після отримання хроматограм вивчають піки кожної речовини, ідентифікують їх за часом утримання і визначають їх кількість за площею піків. Спосіб здійснюється наступним чином: Спосіб ґрунтується на екстракції похідних стробілуринів (крезоксим-метилу, трифлоксистробіну) із проб води хлороформом та визначенні методом газорідинної хроматографії з використанням електронозахватного детектора. 1000мл проби поміщають в ділильну лійку місткістю 2000мл, додають 100мл хлороформу. Суміш протягом 5-ти хвилин струшують. Після розділення шарів, хлороформний шар відділяють, а водну фазу струшують ще двічі зі 100мл хлороформу. Об'єднують хлороформний екстракт, сушать безводним сульфатом натрію (30-35г) шляхом настоювання в колбі місткістю 500мл протягом 20 хвилин. Об'єднаний екстракт переносять у колбу для відгону розчинників і концентрують на ротаційному випарнику при температурі водяної бані не вище 40 С до об'єму 0,2-0,3мл. До сухого залишку упарюють розчинник на повітрі. Сухий залишок розчиняють в 5мл ацетону, який потім видаляють повністю (етап необхідний для повного видалення слідів хлороформу, наявність якого затрудняє хроматографування). Після підготовки проби до вимірювання сухий залишок екстракту переносять в градуйовану пробірку за допомогою ацетону (загальний об'єм 1мл). Визначення вмісту крезоксим-метилу здійснюють на газорідинному хроматографі. За допомогою шприца для газорідинної хроматографії відбирають розчин проби (3мкл) та вводять в інжектор хроматографу. Проводять хроматографування кожної з двох паралельних проб по 3 рази. Умови хроматографування: Колонку скляну (1м 3мм), заповнену 5 SE30 на хроматоні N-AW-DMCS (0,16 - 0,20мм), кондиціонують у потоці газу-носія (азот особливої чистоти) за температури (230 2) С. Об'ємна витрата газу-носія протягом часу кондиціонування 47987 4 60мл/хв. Кондиціонування продовжують до отримання стабільної нульової лінії детектора на хроматограмі самописа за максимальної чутливості. Умови роботи хроматографа: - газорідинний хроматограф "Кристаллюкс 4000М" з електронозахватним детектором; - температура термостата колонки (200 2) С - температура випарника (280 2) С - температура детектора (300 2) С об'ємна витрата газу-носія (азоту) (30 2)мл/хв. Час утримання за даних умов, хв.: - крезоксим-метилу-2,43; - трифлоксистробіну - 4,07. Кількісне визначення трифлоксистробіну та крезоксим-метилу здійснюють методом абсолютного калібрування. Для цього необхідно для кожної речовини окремо побудувати градуювальну залежність площі хроматографічних піків від її масової концентрації в градуювальному розчині. Ідентифікацію піків трифлоксистробіну та крезоксим-метилу в розчинах проводять за зовнішнім стандартом. Визначають площу піку кожної речовини та обчислюють середнє значення площі піку трифлоксистробіну та крезоксим-метилу з 3 паралельних вимірювань. Отримані результати обробляють методом найменших квадратів. Градуювальна залежність описується рівнянням: S b cm, де S- площа піку трифлоксистробіну або крезоксим-метилу, мВ хв., cm - масова концентрація трифлоксистробіну або крезоксим-метилу в градуювальному розчині, мкг/мл, - масштабний коефіцієнт; b - коефіцієнт регресії. Градуювальну залежність вважають лінійною, якщо значення коефіцієнта кореляції знаходиться в межах від 0,8 до 0,99. Обчислюють середнє арифметичне значення площі піка ( Sn ) трифлоксистробіну або крезоксимметилу для кожної з паралельних проб за формулою: S1.n S2.n S3.n , де Sn 3 n - номер паралельної проби (n = 1, 2) Використовуючи відповідну градуювальну залежність, обчислюють масову концентрацію ( n , 3 мг/дм ) трифлоксистробіну або крезоксим-метилу для кожної з паралельних проб води за формулою: Vnp Sn , де n b V n - номер паралельної проби (n = 1, 2); Sn - середнє значення площі піка фенамідону, мм2 або мВ хв; - масштабний коефіцієнт; b - коефіцієнт регресії; Vnp - кінцевий об'єм екстракту n-ї проби, мл; V - об'єм проби, мл. 5 47987 Результат обчислень заокруглюють до другої значущої цифри. Розробка і апробація способу визначення фунгіцидів класу стробілуринів у воді проводилась в 6 Інституті гігієни та екології Національного медичного університету імені О.О. Богомольця. Таблиця 1 Спосіб визначення фунгіцидів класу стробілуринів у воді та ґрунті Діюча речовина Трифлоксистробін Хімічна назва за ШРАС (Е,Е)-метоксиіміно-{2-[1-(3трифторметилфеніл)етиліденаміно-оксиметил)]феніл}- оцтової кислоти метиловий ефір Емпірична фо- Молекулярна мармула са Хімічна формула O O N C20H19F3N2O4 408,4 C18H19NO4 N 313,4 COOCH3 CH Крезоксимметил метил 2-[0-(0-(0-метилфеноксиметил) фенил] - 2 (метоксиамино) ацетат O OH3 C N OCH3 O Література: 1. Г.Г.Онищенко Гигиенические аспекты обеспечения экологической безопасности при обращении с пестицидами и агрохимикатами. //Гигиена и санитария, №3, 2003, с. 3. 2. Методичні вказівки з визначення трифлоксистробіну в воді, ґрунті, яблуках, грушах, яблучному соку методом газорідинної хроматографії: MB № 252-2001 // Методичні вказівки з визначення мікрокількостей пестицидів в продуктах харчування, кормах та навколишньому середовищі. - Київ, 2004. - № 37. - С. 36-41. 3. Временные методические указания по определению крезоксим-метила в воде, почве, яблоках, винограде, яблочном и виноградном со Комп’ютерна верстка А. Крижанівський ках методом газожидкостной хроматографии: МУ № 205-2000 // Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в пищевых продуктах, кормах и внешней среде. - Киев, 2001. № 33. - С. 14-18. 4. Cabras P.; Angioni A.; Garau V. L.; Pirisi F. M.; Brandolini V. Gas chromatographic determination of azoxystrobin, fluazinam, kresoxim-methyl, mepanipyrim, and tetraconazole in grapes, must, and wine // Journal of АО AC International. - 1998. - Vol. 81, No 6. - P. 1185-1189 (8 ref.). 5. Urs Muller Chemical crop protection research. Methods and challenges // Pure Appl. Chem. - 2002. - Vol. 74, No. 12, - P. 2241-2246. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601