Спосіб тестування нецитотоксичних лікарських препаратів на протипухлинну активність

1. Спосіб тестування нецитотоксичних лікар 3 чно утруднюють передклінічні дослідження з застосування нецитотоксичних лікарських препаратів в онкології, роблячи їх багаторічною і часто досить непевною справою. Власне опис корисної моделі, що заявляється. В основу корисної моделі поставлено задачу: зменшити в кілька разів тривалість, а також матеріало- та працемісткість тестування нецитотоксичних лікарських препаратів на протипухлинну активність і, таким чином, створити новий спосіб тестування нецитотоксичних лікарських препаратів на протипухлинну активність, придатний для швидкого попереднього тестування (скринінгу) широкого спектру нецитотоксичних лікарських препаратів та режимів їх застосування. Поставлена задача вирішується тим, що для введення ЛПТ застосовують здорових тварин, а для оцінки результатів тестування використовують раніш запатентований авторами «Спосіб інтегральної оцінки неспецифічної резистентності організму щодо злоякісних пухлин за допомогою реакції канцеролізу» [2]. При виконанні способу, що заявляється, кожен ЛПТ, або ж за кожним з режимів введення препарату, що тестується, застосовують щодо невеликої групи (№ 3-4 особини) здорових тварин одного біологічного виду, одного віку та однієї статі, на протязі порівняно нетривалого періоду (наприклад, 10 діб), а в якості інтактного контролю використовують рівну за чисельністю групу рівноцінних тварин, що їх не піддають введенню ЛПТ. Через 10 діб після початку введення препарату від кожної тварини окремо, при забої або без забою тварин, збирають кров всіх піддослідних тварин, одержують з неї сироватку або плазму, далі змішують рівні об'єми сироватки або плазми, одержаної від усіх тварин кожної групи, одержуючи таким чином об'єднані зразки сироватки або плазми в кількості, що дорівнює кількості груп піддослідних тварин. Далі всі одержані таким чином зразки тестують в реакції канцеролізу, що її виконують відповідно до раніш запатентованого авторами даної заявки «Способу інтегральної оцінки неспецифічної резистентності організму щодо злоякісних пухлин за допомогою реакції канцеролізу» [2]. Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю ознак способу, що заявляється, та технічним результатом корисної моделі наступний. Застосування здорових тварин для введення ЛПТ, скасовує всі чотири недоліки традиційного способу тестування, зазначені вище. Справді, недолік 1 скасовується за визначенням (назвою) 51141 4 способу, що заявляється. При застосуванні здорових тварин замість тварин з перещепленими або індукованими пухлинами автоматично зникає потреба в проведенні повномасштабного онкологічного експерименту, тобто виключаються тривалі терміни очікування результату (недолік 2) та виключається потреба у великих, близько 10 особин, групах тварин, яка у випадку класичного способу тестування викликається гетерогенністю будь-якої популяції тварин за параметрами протипухлинної резистентності (недолік 3), завдяки чому скасовується і недолік 4, тобто з'являється можливість у кілька разів розширити спектр тестованих лікарських препаратів або доз та схем застосування одного препарату. Можливість застосування здорових тварин в способі, що заявляється, обумовлена використанням для оцінки результатів тестування раніш запатентованого авторами даної заявки «Способу інтегральної оцінки неспецифічної резистентності організму щодо злоякісних пухлин за допомогою реакції канцеролізу» [2], оскільки викликані введенням лікарського препарату, що тестується, зміни канцеролітичного індексу сироватки або плазми крові здорових тварин, визначеного відповідно до способу [2], є практично повністю адекватним показником змін неспецифічної протипухлинної резистентності цих самих тварин. Приклад практичного застосування корисної моделі Досліджували зв'язок між впливом фітопрепарату, виготовленого на основі зеленого чаю (препарат 1), та фармакопейного гормонального імунодепресанту (препарат 2) на канцеролітичну активність сироватки крові здорових щурів та протипухлинною активністю цих препаратів щодо карциносаркоми Уокер W-256 щурів. Обидва препарати в застосованих дозах не мають цитотоксичних властивостей. Препарат 1 давали здоровим тваринам у вигляді розчину в питній воді на протязі 10 днів, препарат 2 вводили здоровим тваринам шляхом підшкірних ін'єкцій тричі на протязі 10-денного терміну. Вплив препаратів на канцеролітичну активність сироватки крові цих тварин показано в таблиці 1. Канцеролітичні індекси сироватки тварин,що споживали досліджувані препарати, розраховували відносно контрольних (інтактних) тварин, канцеролітичний індекс сироватки яких приймали за умовний нуль. В контрольній (інтактній) та кожній з дослідних груп було по 3 тварини. Таблиця 1 Вплив 10-денного курсу препаратів 1 та 2 на канцеролітичну активність сироватки крові здорових щурів Група тварин Інтактні щурі (контроль) Щурі, що одержували препарат 1 Щурі, що одержували препарат 2 В таблиці 2 наведені дані щодо впливу введення досліджуваних препаратів щурам з карциносаркомою Уокер W-256 на середню масу пухлин Канцеролітичний індекс Умовний нуль +22% -19% на стандартний день забою тварин. В якості контролю використовували щурів, що їм перещеплювали пухлини відповідного штаму так само, як і 5 51141 тваринам дослідних груп, але не вводили жодного лікарського препарату. Введення досліджуваних препаратів проводили за терапевтичною схемою, 6 тобто з дня перещеплення пухлин до стандартного дня забою тварин. В кожній з груп було 10 тварин. Таблиця 2 Вплив терапевтичного курсу препаратів 1 та 2 на швидкість росту карциносаркоми Уокер щурів, за критерієм середньої маси пухлин на стандартний день забою тварин Група тварин Інтактні щурі Щурі, які одержували препарат 1 Щурі, які одержували препарат 2 Середня маса пухлин (г, М±m) 12,6±2,2 6,4±2,0* 23,3±3,3* Примітка: * - відмінність групи від контрольної статистично значуща (Р