Бактеріальна тест-система для первинного скринінгу препаратів на протипухлинну активність

Бактеріальна тест-система для первинного скринінгу препаратів на протипухлинну активність, що представлена двома ізогенними штамами E.coli AB259Hfr3000 та її MS2 індукованим мутантом E.coli Lys-23. Пропонована корисна модель відноситься до галузі мікробіології і може бути використана як бактеріальна тест-система для пошуку речовин, які мають протипухлинну активність. Відома бактеріальна тест-система, яка складається з двох ізогенних штамів St.aureus 209 і St.aureus 209 УФ-3[1]. Недоліком цієї тест-системи є її недостатня чутливість до речовин, які мають протипухлинну активність. Це стосується як вихідного штаму St.aureus 209 так і його більш чутливого похідного мутантного штаму St.aureus 209 УФ-3. У основу пропонованої корисної моделі покладено задачу створення такої тест-системи, яка б мала підвищену чутливість до речовин, що випробовуються, за рахунок створення умов, при яких вихідний штам в даній системі виконує роль індикатора на токсичні властивості тестованих речовин. Поставлена задача вирішується пропонованою бактеріальною тест-системою для первинного скринінгу препаратів на протипухлинну активність, що представлена двома ізогенними штамами E.coli AB259Hfr3000 та її MS2 індукованим мутантом E.coli Lys-23 [2, 3]. Згадані ізогенні штами E.coli AB259Hfr3000 та її MS2 індукований мутант E.coli Lys-23 описані в літературі. Вихідний штам у пропонованій тестсистемі виконує роль індикатора на токсичні властивості тестованих речовин, що відслідковується по здатності останніх пригнічувати ріст бактеріальної культури. Мутантний штам характеризується рядом властивостей, що співпадають з основними ознаками трансформованої вищої клітини. До них відносяться: 1. здатність до росту та ділення при підвищеній порівняно з диким типом концентрації клітин у рідкій культурі. 2. здатність до утворення ізольованих колоній на газоні клітин дикого типу. 3. підвищення швидкості росту, ділення і, відповідно, підвищення частоти ініціації реплікації. 4. підвищення різниці в швидкості росту та ділення на збіднених рідких середовищах. 5. стійкість до бактеоріофагу на рівні проникнення у клітину. 6. секреція клітинами нового типу ДНКвмісного бактеріофага, що містить М52-подібні послідовності [4, 5]. 7. зміна морфології клітин (збільшення розмірів, багатоядерність, зникнення жгутиків, злипання з утворенням конгломератів). 8. підвищена живучість клітин. 9. зміна структурних та функціональних властивостей мембран та оболонки (порушення транспорту вуглеводів, зміна складу клітинної стінки мозаїчне забарвлення по Граму, збіднення антигенного складу). 10. багатостадійність процесу, що веде до встановлення даного фенотипу (наявність проміжних форм, що передують кінцевому варіанту). 11. поява цілого ряду нових властивостей, пов'язаних зі змінами в межах досить невеликої ділянки на хромосомі на тлі збереження основних функцій генетичного апарату (відсутність ознак термочутливості та ауксотрофності у мутанта, що демонструє такий широкий набір фенотипових відхилень від вихідного типу). Така подібність описаного мутанта з трансформованими клітинами вищих розповсюджується і на їх чутливість до інгібуючого впливу сполук, для яких уже показана наявність протипухлинної активності. Паралельне використання клітин дикого типу дозволяє диференціювати протипухлинний ефект сполуки (визначається на клітинах мутанту E.coli Lys-23) від токсичного (визначається на клі CO ю CD Ю О) 5653 Е.соИЗООО 150 E.coli Lw-23 5 10 15 0,5 1 1,5 Концентрація препарату, мг/мл Концентрація екстракту, % Фіг З 1 2 3 4 Концентрація препарату, МІ/ШЇ Фіг. 5 ЕхоНЗООО E.coli Lys-23 100 50 100 200 300 400 Концентрація препарату, мкг/мл 500 Фіг. 6 Комп'ютерна верстка А Крулевський Підписне Тираж 28 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул Урицького, 45, м Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Глазунова, 1, м Київ - 42, 01601