Спосіб визначення заборонених наркотиків та сильнодіючих лікарських засобів у біологічному матеріалі людини

Спосіб визначення заборонених наркотиків та сильнодіючих лікарських засобів у біологічному матеріалі людини, який здійснюють шляхом їх екс 3 56025 4 Таблиця 1 Результати хроматографічного розподілу заборонених наркотиків та деяких лікарських засобів Речовина Фенциллідин Кетамін Клофелін Дімедрол Донорміл Трамадол Р-в Драгендорфа Помаранчеве Помаранчеве Помаранчеве Помаранчеве Помаранчеве Помаранчеве Система 1 - метанол, 25 % аміак (100:15) Система 2 - етилацетат, етанол, 25 % аміак (85:10:0,5) Недоліком цього способу є те, що в рекомендованих системах розчинників 1, 2 не можливо підвищити ефективність розподілу для речовин, які підлягають аналізу. Іншим відомим способом ідентифікації кетаміну та фенциклідину є метод хроматографії в тонких шарах сорбенту де ці препарати проявляються реактивами Драгендорфа та кислого розчину йодплатинату. Після застосування наведених реактивів - проявників неможливо однозначно зробити висновок про виявлення заборонених похідних фенилцикло-гексиламину або лікарських засобів. (Е.С.Бушуев, Р.В.Бабанян, В.Н.Куклин Химикотоксикологический анализ наркотиков (учебнометодическое пособие) Санкт-Петербург 2002 г.). Найбільш близьким до рішення, яке заявляється і обраним за прототип є спосіб визначення складних сумішей методом двомірної хроматографії в тонких шарах сорбенту (Патент України № 25975 27.08.2007), який дозволяє збільшити вірогідність ідентифікації заборонених речовин у сечі людини після їх екстракції з лужного середовища за рахунок застосування системи розчинників яка складається з гексану та ацетону в певному співвідношенні. Недоліки способу пов'язані з тим, що він не дозволяє вірогідно ідентифікувати наркотики та сильнодіючі лікарські засоби. В основу корисної моделі поставлена задача удосконалення способу визначення заборонених у біологічному матеріалі людини (в сечі людини або речовому доказі - алкогольних та безалкогольних напоях), в якому за рахунок введення двох нових систем розчинників досягають низької кореляції між хроматографічною рухливістю фенциклідину та кетаміну. Їх вибір здійсняли методом оптимізації рухомих фаз «Призма» (Руководство по современной тонкослойной хроматографии. Под ред. О.Г.Ларионова. Москва, 1994г. с.106-120). Усі хроматографічні вимірювання дублювались, відтворюваність знаходилась в межах 2 %. Після чого проводили візуалізацію речовин за допомогою реактиву Драгендорфа по Мун'є. Поставлена задача вирішується в способі визначення заборонених наркотиків та сильнодіючих лікарських засобів у біологічному матеріалі людини, який здійснюють шляхом їх екстракції з наступним визначенням методом тонкошарової хроматографії із застосуванням системи розчинників, яка Забарвлення Розчин йодплатинату Коричневе Коричневе Коричневе Коричневе Коричневе Коричневе hRf в системах 1 2 68 88 67 88 66 81 70 78 67 69 68 86 складається з гексану та ацетону в певному співвідношенні, згідно з корисною моделлю, додатково використовують систему розчинників - гексан метанол (1:2), в двох системах паралельно хроматографують речовини, які досліджуються та речовину-стандарт, після проявлення їх реактивом Драгендорфа по Мун'є вираховують параметри хроматографічної рухливості, використовуючи отримані показники, по яким здійснюють ідентифікацію. Спосіб, що заявляється проводиться таким чином. 20 мл сечі пацієнта (речового доказу - алкогольного або безалкогольного напою) підкислюють хлороводневою кислотою до рН=1-2 і проводять екстракцію 20 мл діетилового ефіру. Верхній ефірний шар відокремлюють і використовують для визначення речовин кислої природи. Водну фазу підлужують 25 % розчином аміаку до рН=9-10 і екстрагують двічі з 20 мл суміші хлороформ-2пропанол (9:1). Отриманий екстракт випарюють на повітрі і сухий залишок розчиняють у 0,5 мл хлороформу, 50 мкл наносять на лінію старту хроматографічної платівки "Сорбфіл". Після закінчення хроматографування в системі 1 або 2 платівку проявляють реактивом Драгендорфа по Мун'є та визначають величину hRf (відношення відстані, яка пройдена центром плями речовини до відстані, яка пройдена системою розчинників та помножена на 100). При співпаданні величини hRf речовин, що досліджуються з табличними, а також відповідного забарвлення (див. табл. 1) роблять попередній висновок про наявність забороненого наркотика або сильнодіючого лікарського засобу. Для остаточної ідентифікації 50 мкл розчину екстракту та стандартні розчини забороненого наркотика (наприклад фенциклідину), лікарського засобу (наприклад кетаміну) та трамадолу наносять на лінію старту двох хроматографічних платівок «Сорбфіл». Після закінчення хроматографування в системах розчинників 3 та 4, платівки витягають, висушують та проявляють реактивом Драгендорфа по Мун'є, фіксуючи забарвлення та величини hRf. В подальшому виконують слідуючи дії: отримують різницю між hRf в системі 3 та 4 (наприклад плям стандартного розчину фенциклідину та плям екстракту hRf(cт.) та hRf(eкс.) (не звертаючи уваги на знак перед числом) і перемножують на hRf плями трамадолу. Отримані здобутки для плям речовини яку виявляють та стан 5 56025 дартної речовини повинні співпадати в межах 2 %. Див табл. 2. 6 Таблиця 2 Результати хроматографічного розподілу заборонених наркотиків та деяких лікарських засобів Речовина Фенциклідин Кетамін Клофелін Дімедрол Донорміл Трамадол Величина hRf в системах 3 4 54 71 75 50 63 30 44 12 16 0 44 26 Система 3 - гексан - метанол (1:2) Система 4 - гексан - ацетон (2:1) Приклад 1. Хворий X; історія хвороби №, 1978 р.н., токсикоман приймає за немедичним призначенням лікарський засіб "Кетамін". Проведення аналізу дало можливість виявити присутність кетаміну у сечі по значенням hRf та здобутку рівному 450 для стандарту та 456 для речовини яку виявляють. Приклад 2. Хворий У, 1969 р.н., звернувся до лікарні з підозрою на отруєння газованим напоєм в якому можливо знаходився клофелін. Проведення аналізу сечі та речового доказу (газований напій) дало можливість виявивати присутність клофеліну у сечі по та речовому доказу значенням hRf та Комп’ютерна верстка В. Мацело hRf -17 25 33 32 16 18 hRf x hRf трам. 306 450 594 576 288 324 здобутку рівному 594 для стандарту та 595 і 597 для речовини яку виявили в речовому доказі та сечі відповідно. Приклад 3. В якості речового доказу на дослідження представлена невідома рідина з підозрою на присутність в ній фенциклідину. Проведення аналізу дало можливість виявити фенциклідин у рідині по значенням hRf та здобутку рівному 306 для стандарту та 308 для речовини яку виявили в речовому доказі. Таким чином, запропонований спосіб визначення похідних фенилциклогексиламіну та сильнодіючих лікарських засобів дозволяє їх надійно ідентифікувати. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601