Поживне середовище для вирощування соматичних структур макроскопічних грибів

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для промышленного выращивания высших съедобных базидиомицетов, в частности ве шенки обыкновенной. Известна питательная среда для выращивания соматических структур макроскопических грибов, содержащая кукурузный экстракт, картофельную муку в качестве источника углерода и солевые добавки фосфа т калия, сульфат аммония, сульфат магния. Однако, данная питательная среда не обеспечивает достаточной скорости роста мицелия и необходимого урожая биомассы. В основу изобретения поставлена задача создания питательной среды для выращивания соматических структур макроскопических грибов, которая за счет изменения источника углерода и дополнительного введения дисперсного неорганического компонента, обеспечивала бы ускорение роста мицелия и повышение урожая биомассы. Поставленная задача достигается тем, что в питательную среду для выращивания соматических структур макроскопических грибов, содержащую кук урузный экстракт, калия фосфат, магния сульфат, аммония сульфат, источник углерода и воду, согласно изобретения, в качестве источника углерода вводят глюкозу и дополнительно аэросил, при следующем соотношении компонентов, г/л воды; Кукур узный экстракт 15,0-20,0 Глюкоза 30,0-50,0 Калия фосфат 0,4-0,5 Магния сульфа т 0,4-0.5 Аммония сульфат 2,5-3,0 Аэросил 0,9-1,0 Вода остальное до 1 л Сущность изобретения поясняется методикой приготовления составов по разработанной рецептуре, а также описанием метода выращивания гриба вешенка обыкновенная на различных питательных средах. в том числе и на среде, не содержащей аэросил (контроль). Объектом культивирования служит штамм И МБ Г-1300 высшего съедобного базидального гриба. Методика. В подготовленный стерильный раствор, содержащий на 1 л воды 50,0 г глюкозы, 15.0 г кукурузного экстракта, солевые добавки: 0,4 г фосфа та калия, 0,4 г сульфата магния, 2,5 г сульфата аммония (см. рецептур у № 1) вносят порошок аэросила в количестве 0,9 г, предварительно обработанный сухим жаром при 130°С в течение двух часов. После внесения аэросила колбы со средой, стерилизованные в автоклаве, инокулировалисъ предварительно гомогенизированным мицелием гриба вешенки обыкновенной и размещены на качалках. Контроль проводили в течение всего периода роста, а именно на 3-й сутки, а также на 5-е и 7-е сутки культивирования. Для этого сухую массу мицелия, предварительно промытую дистиллированной водой, взвешивали после высуши вания в тарированных стеклянных флаконах при 105°С. Учитывали также рН среды, содержание в культураль-ной жидкости редуцирующи х веществ (РВ), Полученные результаты представлены далее в таблице 2. Пример 1. Аэросил в количестве 0,95 г вносят в колбу с питательной средой (по рецептуре 2) и с оптимальным содержанием глюкозы (30 г) при рН среды 5,5. Инокулировали мицелием вешенки обыкновенной согласно вышеописанной методике. Отмечен замедленный рост культуры. Пример 2. 0,9 г аэросила добавили к питательной среде, приготовленной согласно рецептуре 3. Дальнейшее выращивание и контроль за ним проводился согласно методике. Пример 3. Аэросил в количестве 1,0 г прибавляют к 1 л водного раствора компонентов, взятых согласно рецептуре 4. Далее - согласно вышеуказанной методике. Пример 4. 1,1 г аэросила добавили к 1 л приготовленной питательной среде (рецептуре 5), взболтали и внесли мицелий вешенки обыкновенной. Результаты опыта обработаны и представлены в таблице 2. Несмотря на увеличение количества вводимого аэросила выход мицелия не увеличился существенно. Пример 5. К 1 литру питательной среды, приготовленной по рецептуре 6 (с повышенным содержанием глюкозы), добавили 1,1 г аэросила, затем инокулировали мицелием гриба вешенки обыкновенной. Контроль проведен на 3-е и 5-е сутки. Рост мицелия показан в таблице 2. Пример 6. 20,0 г кукурузного экстракта, 25,0 г глюкозы и солевые добавки (см. рецептур у 7) растворили в 1 л дистиллированной воды, добавили 0,9 г аэросила, взболтали и инокулировали мицелием вешенки. Результаты опыта подтвердили повышение роста мицелия. Пример 7 (контроль). Питательная среда приготовлена по рецептуре № 8, аэросил не добавляли. Выход мицелия был принят за 100%. Из данных таблицы 2 согласно культивированию в течение контрольного периода, рост грибов на среде с 50 г глюкозы, в которую был добавлен аэросил. лучше, чем на среде без аэросила. Уменьшение урожая биомассы на 7-е сутки культивирования объясняется сильным введением рН среды и расходом в ней. Из данных таблицы 2 также очевидно, что уже на третьи сутки культивирования рост грибов на питательных средах с содержанием аэросила значительно выше, в 2-2,5 раза, чем на среде без добавки аэросила. Качество грибов оценивалось по количеству содержащегося в получаемой биомассе белка, его качественным составом и усвояемостью. Проведенное исследование токсичности и патогенности глубинного мицелия показало его доброкачественность. Введение аэросила в количестве от 0,9 до 1,0 г/л приводит к увеличению выхода сухого мицелия в 2-2,6 раза уже не третьи сутки культивирования. Скорость роста грибов обеспечивается и на пятые сутки в достаточной степени – в 2-1,5 раза и лишь на седьмые сутки - скорость роста замедляется. Питательная среда обеспечивает быстрый рост мицелия при резких перепадах рН среды. Введение аэросила в состав питательной среды, приводит к угнетению роста продуктов метаболизма, что обеспечивает увеличение скорости роста грибов в 1,5-2 раза по сравнению с выращиванием в известной ранее среде. Введение повышенного содержания глюкозы (до 50 г/л) обеспечивает увеличение урожая биомассы лишь в присутствии аэросила. Состав прост в употреблении и пригоден для промышленного выращивания высших съедобных грибов.