Композиція для підвищення біосумісності імплантатів з організмом реципієнта та спосіб підготовки імплантанта/трансплантанта

1 Речовина для підвищення бюсумісності імплантатів з організмом реципієнта, що містить білок сироватки крові та розчин натрію хлориду, яка відрізняється тим, що як білок містить альбумін сироватки крові та додатково містить Винахід відноситься до медицини, хірурги і може бути використаний при імплантації єндопротезів суглобів, судин (стенти, кавафільтри), рогівки, шкіри, запровадженні гемо- та плазмасорбцм Відомий склад для заживления тканин (см заявку на патент Роси № 2193897, A61L15/32, дата публікації 2002 12 10) що містить колаген, фактор згортання крові, воду та фармакологічно активні речовини Недоліком відомого складу є те - що він може використовуватись тільки для загоєння пошкоджень та те що до його складу входять фактори згортання крові, які є активаторами проліферативної та запальної реакції в організмі Відомий склад для з'єднання і заживления тканин, при травматичних пошкодженнях паренхіматозних органів (см заявку на патент Роси № 97116118/14, А61В17/56, дата публікації 1999 08 10) що містить тахикомбову колагенову стрічку с біологічним клеєм та фактором згортання крові Недоліком такого складу є те що його необхідно додатково фіксувати на поверхні рани протягом не менше 3 хвилин, і те, що завдяки пласкій формі він діє лише на частину раневої поверхні, і може використовуватися лише на пласких поверхнях дипдрофосфат натрію (ІЧагНРО^ при наступному співвідношенні інгредієнтів (мас%) альбумін сироватки крові 0,1-6,0 хлорид натрію 0,7-1,0 дипдрофосфат натрію 0,10-0,20 вода решта 2 Речовина по п 1, яка відрізняється тим, що додатково містить пдрофосфат калію при наступному співвідношенні компонентів (мас %) альбумін сироватки крові 0,1-6,0 хлорид натрію 0,7-1,0 дипдрофосфат натрію 0,10-0,20 пдрофосфат калію 0,10-0,20 вода решта Недоліком відомого складу також є те - що він може використовуватись тільки для загоєння поверхневих пошкоджень та те що до його складу входять фактори згортання крові, які є активаторами проліферативної та запальної реакції в організмі Відомий склад для сполуки і загоєння тканин (див Патент України № 10419, МПК А 61К 3/14, дата публікації 25 12 1996, номер бюлетеня 4), що містить білки сироватки крови а саме фібриноген людини, тромбін людини і фібронектин, альфаннпбггор протеїназ, альфагмікроглобулін, ХШ фактор згортання крові, контрикал, розчини натрію і кальцію хлориду, при наступному співвідношенні компонентів фібриноген людини 30-60 мг/мол ХШ фактор згортання 4,10 -9, • 10 мкмоль крові путресцина/(хв/мол), 10-100 NIHefl/мол, тромбін людини 500-1000 АТрЕ/мол, контрикал 1,9-5,0мг/мол, фібронектин альфаі-інгібітор протеїназ 0,017-0,070мг/мол, альфаг-микроглобулин 0,063-0,154мг/мол, 0,9% розчин натрію хлориду 1,0мл, 0,44% розчин кальцію хлориду 1,0мл О (О о> (О ю 56960 Недоліком відомого складу є те - що він може використовуватись тільки для загоєння пошкоджень, те що до його складу входять фактори згортання крові, які є активаторами проліферативної та запальної реакції в організмі і не можуть використовуватись у току крові, тому що мають властивості до формування тромбу Зазначена речовина сприяє очищенню рани, але при її використанні залишається вірогідність омертвляння клітин та неоднорідність процесу грануляції ран тому, що в наслідок зазначеного формування тромбу вивільнюється значна КІЛЬКІСТЬ факторів росту, що нерівномірно впливають на загоєння ран При використанні такої речовини грануляція ран наступає лише на 3 - 4 добу Змінюється ОСМОТИЧНИЙ ТИСК усередині клітини, що перешкоджає нормальному функціюванню та її поділенню, нормальному життєвому циклу (проліферації) Завданням винаходу є створення речовини для підвищення бюсумісності імплантатів з організмом, в якої шляхом зміни складу та вмісту інгредієнтів підібраних на підставі емпіричних досліджень, забезпечується покращення бюсумісності імплантату, завдяки модифікації його поверхні, зменшується можливість накопичення вільних радикалів, які можуть призвести до мутагенних змін у клітинах, які контактують з імплантатом Не викликається зростання ділення клітин, як наслідок прискорюється швидкість проліферативних процесів, котрі виникають завдяки подразненню тканин Для досягнення цього завдання речовина для підвищення бюсумісності імплантатів з організмом включає в себе білок сироватки крови та розчин натрію хлориду Новим у речовині є те, що вона в якості білка він містить альбумін сироватки крови та додатково Дипдрофосфат натрію (ІЧагНРСч) при наступному співвідношенні інгредієнтів (мас %) Альбумін сироватки крови 0,1 - 6,0 Хлорид натрію 0,7 -1,0 Дипдрофосфат натрію 0,10 - 0,20 Вода решта В конкретних застосуваннях винаходу речовина для підвищення бюсумісності імплантатів з організмом додатково містить Гідрофосфат калію (КН2РО4) при наступному співвідношенні інгредієнтів (мас %) Альбумін сироватки крови 0,1 - 6,0 Хлорид натрію 0,7 -1,0 Дипдрофосфат натрію 0,10 - 0,20 Гідрофосфат калію 0,10 - 0,20 Вода решта Як показують результати ДОСЛІДІВ запропонована речовина для модифікації поверхні імплантатів сприяє покращанню стану клітин, здатності їх до ділення як наслідок прискорюється грануляція ран, підтримується рН необхідне для природних процесів загоєння при цьому не відбувається накопичення вільних радикалів яке може призвести до мутагенних змін Для приготування речовини за прототипом та запропонованим способом використовували дистильовану воду та Хлорид натрію, Дипдрофосфат натрію, Гідрофосфат калію марки ЧДА та Альбумін Фірми "Серва" якій містив 99,99 Альбуміну сироватки крови та 0,01 Хлориду натрію Інші інгредієнти зазначені в Таблиці 1 також виробництва Фірми "Серва" При приготуванні речовини за прототипом та запропонованим способом в склянку обсягом 1л наливали воду та додавали інгредієнти в КІЛЬКОСТІ зазначеної в Таблиці 1 Суміш перемішували до розчинення інгредієнтів Імплантанти шкубували на протязі 10-60 хвилин при температурі 20 - 40°С Таблиця 1 Інгредієнти Альбумін сироватки крови, гр NaCI, гр Na2HPO4, гр КН2РО04, гр фібриноген людини, гр ХШ фактор згортання крові, мкмоль путресцина/(хв/мол) тромбін людини, NIH ед/мол контрикал, гр фібронектин , гр Альфаннгібггор протеїназ, гр Альфаг-микроглобулин, гр СаСІ2, гр Н2О, гр Приклади Прототип 4,0- 1 0 50 0,35 0,35 0,035 0,011 0,44 98,7 В перший серії ДОСЛІДІВ вивчали вплив запропонованої речовини на біологічну сумісність імплантату з реципієнтом при використанні цієї речовини Оцінку здійснювали шляхом визначення площі фіброзної тканини навколо 3 4 5 0,35 0,70 0,12 2 2 0,60 0,10 1 0,3 1 0,1 0,60 0,80 0,15 0,10 2,00 0,90 0,14 0,13 6,00 1,00 0,20 0,20 99,20 96,83 98,35 96,73 92,60 імплантату на стандартизованих зрізах в умовних одиницях Зменшення або відсутність фіброзної тканини навколо імплантату свідчить про менше подразнення та про більше споріднення імплантату з організмом реципієнта 56960 У дослідженні було використано 53 тваринсамців породи «Серий великан», вагою 3 - 3,5кг у ВІЦІ від 0,5 до 1 року Z-образні елементи з дроту нержавіючої сталі (марка 18ХВ), діаметром 0,18мм оброблялися розчинами складу за Таблицею 1 заздалегідь, відповідної для групи концентрацією Елементи вводилися в аорту кролям під дією гексеналового наркозу у черевну аорту Досліджували реакцію стінки аорти кроля на зазначені елементи після обробки розчинами електролітів Три тварини були для дослідження властивостей речовини за прототипом Усі тварини, якім встановили елементи оброблені однаковими розчинами електролітів, були поділені на 5 груп, по 10 тварин у групі, та утримувалися на перебігу 8 тижнів після операції у звичайних умовах По закінченню терміну експерименту тварини були виведені з нього шляхом ін'єкції летальної дози гексенала Для одержання ГІСТОЛОГІЧНИХ препаратів судин були запроваджені ГІСТОХІМІЧНІ аналізи Препарати офарбовували гематоксиліном та еозином, по Ван Гізону, по Хочкінсу - Мак Манусу, та альдегід фуксином Морфометрію проводили на мікроскопі фірми "Olympus" під збільшенням х 20, окуляр х 10, за програмою, автоматично Оцінювали площу інтими в неуражених атероматозом ділянках на стандартизованих зрізах в умовних одиницях Одержані результати опрацьовували за допомогою методів непараметричної статистики із квантуванням ознак на 4 інтервали і порівнянням одновимірних розподілів по Колмогорову - Смирнову Препарати отримані у різних груп тварин вивчались за допомогою світової мікроскопи Цифрові значення вимірів у 6 груп тварин з достовірністю р