2-меркапто-4-метил-7-хлорхінолін, що виявляє антиоксидантну та аналгетичну активність

2-меркапто-4-метил-7-хлорхшолш, СГ ^ N SH що проявляє антиоксидантну та аналгетичну активність явності меркаптогрупи і атому хлору забезпечує прояву антиоксидантної та аналгетичної дії Ознаками, ВІДМІННИМИ ВІД прототипу, є введення 4-метил-7-хлорхшолш-2-ільного радикалу, виражена антиоксидантна та аналгетична дія Причинно-наслідковий зв'язок між сукупністю суттєвих ознак і технічним результатом заміна залишку аланіну в цистеїні на 4-метил-7хлорхінолш-2-ільний радикал веде до підвищення антиоксидантної і аналгетичної активності за рахунок зміни структури Процес одержання заявленої сполуки включає приготування розчину 2,7-дихлор-4метилхіноліну в діоксані, приготування розчину тюсечовини в диметилформаміді, одержання реакційної суміші і подальше її нагрівання при КИП'ЯТІННІ, охолодження реакційної суміші, додавання до розчину 10% розчину калію гідрооксиду до рН 9,0, відфільтрування одержаної речовини, промивання її водою та сушку, кристалізацію з суміші диметилформамід - вода Приклад одержання заявленої сполуки ( МБ 311) до розчину 2,1г (0,01 мол) 2,7-дихлор-4метилхіноліну в 20мл діоксану додають 0,085г (0,01 мол) тюсечовини в Юмл диметилформаміду Реакційну суміш нагрівають при КИП'ЯТІННІ на протязі ЗО хвилин Після охолодження до суміші додають 10% розчин гідрооксиду до рН 9,0 Осад, що випав, відфільтровують, промивають водою, сушать Кристалізують з суміші диметилформамід 00 со ю 57389 вода Жовтий кристалічний порошок з температурою плавлення 244 - 246°С Знайдено, % С-64,39, Н-5,39, N-6,82, S-15 62, СІ-16,90 Вирахувано, % С- 64,58, Н- 5,31, N- 6,99, S15,69, СІ-16,56 Індивідуальність заявленої сполуки підтверджена методом тонкошарової хромотографм на пластинах "Silufol" в системах розчинників диметилформамід - вода (1 2), бензол-ацетон (4 1) Значення Rf-ЮО ВІДПОВІДНО системам дорівнюють 81, 57 ПМР - спектр, розчинник ДМСО-Дб+ССІ4, 5шкала, м д 2,45 СНз (с, ЗН), 2,9 SH (с, 1Н) - тюльна форма, 7,1 - 7,75 аром, протони (м, 4Н ), 13,5 NH (уш с ,1Н) -тюнна форма Мас-спектр, m/z 63/8/, 75/5/, 87/12/, 105/7/, 115/5/, 128/4/, 140/22/, 164/12/, 176/18/, 178/ 6/, 209/100/-М+, 211/32/-М+ Сполука МБ 311 являє собою жовтий кристалічний порошок, розчинний у метанолі, етанолі, диметилформаміді, не розчинний у воді Дослідження біологічної дії заявленої сполуки МБ-311 показало, що в експериментах на тваринах виявлена антиоксидантна та аналгетична активність ЛДбо визначалось за методом Кербера на білих безпородних мишах, масового тіла 18 - 25г (Беленький М А Элементы количественной оценки фармакологического эффекта - Л Медгиз, 1963 -151с ) ЛД5о для 2-меркапто-4-метил-7хлорхшоліну складає 240,0 ± 36,8мг/кг Антиоксидантну активність (АОА ) проводили in vitro на трьох моделях ініціювання вільнорадикального окислення (ВРО) неферментативне ініціювання (НФІ), ферментативне ініціювання (ФІ), інгібування супероксирадикала НФІ ВРО моделювали в суспензії яйцевих ліпопротеїдів, додаючи солі заліза (II) (Клебанов Т Н , Бабенкова И В, Телескин Ю О Определение антиоксидантной активности плазмы крови в яичных липопротеазах // Лаб дело - 1988 - № 5 - С 59 - 62 ) ФІ ВРО проводили в гомогенаті мозкової тканини білих щурів лінії Вістер, в який додавали надлишок нікотинамідаденіндинуклеотиду фосфату відновленого (НАДФН) АОА оцінювали у відсотках гальмування утворення кінцевого продукту ВРО малонового діальдепду (МДА) (Андреева Л И , Кожемякин Л А , Кишкун А А Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой//Лаб дело -1988 - № 1 1 - с 41 - 46) АОА на початковій стадії розвитку ВРО оцінювали шляхом інгібування супероксирадикала в реакції автоокислення адреналіну в адренохром у лужному середовищі, що призводить до утворення активної форми кисню - супероксирадикала (Владимиров Ю А , Арганов А И Перекисное окисление липидов в биологических мембранах- М Наука, 1972-252с) Аналгетичну дію визначали на білих щурах самцях лінії Вістар масою тіла 170 - 230 (по 7 тварин у кожній сери") На моделі "оцтовокислих судом" (Гацура В В Методи первичного фармакологического исследования биологически активных веществ -М Медицина, 1974-143 с ) Дані, представлені в таблицях 1, 2, свідчать, що заявлена сполука МБ - 311 проявляє антиоксидантну та аналгетичну активність і перевершує по силі фармакологічні аналоги- L -цистеїн (антиоксидантна дія) І анальгін (аналгетична дія) Заявлена сполука МБ-311 на моделі НФІ перевищує Lцистеїн на 11%, на моделі ФІ - на 9%, на моделі інгібування супероксирадикала - на 10% За аналгетичною дією МБ-311 перевищує аналгін в дозі 0,05 ЛД 50 на 16%, в дозі 0,1 ЛД 5 0 -20% Заявлена сполука МБ-311 має виражену антиоксидантну та аналгетичну дію і може бути використана в медичній практиці після проведення доклінічних випробувань Таблиця 1 Антиоксидантна активність Еферментативне Ініцію- Ферментативне Ініціювання Інгібування супероксирадикала вання МДА, мол/л АОА,% МДА, мол/л АОА,% оптична густина АОА,% МБ 311 79 0,90 ±0,03 56 0,130 ± 0,010 36 2,12 ±0,12 L-цистеш 2,54 ±0,10 68 0,96 ±0,06 47 0,1 35 ±0,020 26 Інтакт 1,33 ±0,12 0,60 ±0,05 Контроль 5,11 ±0,31 1,28 ±0,07 0,21 ±0,01 2- м є ркапто-4- м ети л хі нол і н 2,68 ±0,12 64 0,96 ±0,06 47 0,1 45 ±0,05 31 Примітка Сполуки, що досліджувались, використовували в дозах ФІ ВРО - 0,38ммоль/л, НФІ ВРО - 1,5ммоль/л, інгібування супероксирадикала- 0,25ммоль/л Сполука Таблиця 2 Аналгетична активність Сполука МБ311 (0,05 ЛД50) Контроль МБ311(0,1ЛД50) Аналгін (50мг/кг) Контроль 2- м є ркапто-4- м ети л хі нол і н КІЛЬКІСТЬ ОЦТОВОКИСЛИХ судом 4,0 ± 1,5 20,0 ±1,9 4,0+ 0,3 9,0 ±0,6 25,0 ±1,1 24,0 ±1,3 % до контролю 20,0 16,0 36,0 96,0 Аналгетична активність, % 80,0 84,0 64,0 4,0 57389 ФІГ.1 H-S-CH2-CH-COOH NH2 Фіг-2 N Фіг.З Комп'ютерна верстка Т Чепелєва Підписано до друку 05 07 2003 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна