Спосіб прогнозування перебігу віл-інфекції у дітей

Спосіб прогнозування перебігу ВІЛ-інфекцм у дітей, що містить визначення рівня оптичної ЩІЛЬНОСТІ в сироватці крові, коефіцієнта розвитку ризику вірусного імунодефіциту людини, обчислення коефіцієнта розвитку ризику та остаточне прогнозування, який відрізняється тим, що після обчис Винахід відноситься до медицини, а саме, до досліджень або аналізу матеріалів особливими способами, переважно біологічних, здебільшого периферійної крові, та може бути використаним у КЛІНІЦІ інфекційних хвороб, для оцінки ризику виникнення захворювання у дітей на вірусний імунодефіцит людини Відомий спосіб прогнозування перебігу ранніх відхилень в імунному статусі новонароджених, що містить відбір та аналіз прогностичних показників з остаточним прогнозуванням перебігу, ВІДПОВІДНО до якого за показник перебігу імунодефіцитного стану взято міграційний індекс лейкоцитів та рівень імуноглобулінів класу М Значення міграційного індексу лейкоцитів та рівень імуноглобулінів класу М у пуповинній крові показують раннє відхилення в імунному статусі доношеної новонародженої дитини [1] До причин, що стримують досягнення означеного вище технічного результату, належить те, що показник, який використаний авторами, може бути застосований лише при ОЦІНЦІ імунного статусу доношених новонароджених, і не є інформативним у випадках передчасного народження 3 іншого боку, показники пуповинної крові не в повній мірі відображують імунний гомеостаз новонародженої дитини, а здебільшого відображають імунний статус вагітної У відомому способі прогнозування параметри відхилень в імунному статусі лення коефіцієнта розвитку ризику прогнозують незначний ризик виникнення захворювання на інфекцію вірусного імунодефіциту людини, якщо він більший за 30%, та високий ризик, якщо він менший або дорівнює 30%, а коефіцієнт розвитку ризику обчислюють за формулою К=[(ОЩ2-Ю0) ОЩ1]-100% де К - коефіцієнт розвитку ризику вірусного імунодефіциту людини, ОЩі - значення оптичної ЩІЛЬНОСТІ сироватки пуповинної крові, ум од , ОЩг - значення оптичної ЩІЛЬНОСТІ сироватки крові, ум од оцінуються одноразово в момент народження, і не досліджуються у подальшому розвитку дитини Крім того, запропонований маркер не є таким, що використовується в рутинній КЛІНІЧНІЙ практиці, він потребує складного обладнання та реактивів (зарубіжних виробників, найчастіше із Росії) Рівень техніки, що досліджений заявником, інформує про відсутність у джерелах патентної та науково-технічної інформації відомостей про використання інших "об'єктів того ж призначення", що дозволяє вважати відоме рішення найбільш близьким В основу винаходу поставлена задача розробити спосіб прогнозування перебігу вірусного імунодефіциту людини у дітей, в якому шляхом аналізу неспецифічних показників сироватки крові, а саме динаміки рівня оптичної ЩІЛЬНОСТІ, підвищується ефективність прогнозування перебігу захворювання при використанні Означений вище технічний результат при здійсненні винаходу досягається тим, що в способі прогнозування перебігу вірусного імунодефіциту людини інфекції у дітей, що містить визначення рівня оптичної ЩІЛЬНОСТІ в сироватці крові, коефіцієнту розвитку ризику вірусного імунодефіциту людини, обчислення коефіцієнту розвитку ризику та остаточне прогнозування, у ВІДПОВІДНОСТІ З ви находом, після обчислення коефіцієнту розвитку ризику прогнозують незначний ризик виникнення 1 о (О 60197 захворювання на інфекцію вірусного імунодефіцисаме рівня оптичної ЩІЛЬНОСТІ ВІЛ-антитіл у сироту людини, якщо він більше 30% та високий ризик, ватці крові хворих уже на ранніх стадіях захворюякщо він менше чи дорівнює 30%, а коефіцієнт вання розвитку ризику обчислюють за формулою ВІДОМОСТІ, ЩО підтверджують можливість здійснення способу прогнозування перебігу вірусного К=[(ОЩ2 х 100) ОЩі]-100% імунодефіциту людини у дітей, що заявляється, де К - коефіцієнт розвитку ризику вірусного полягають у наступному імунодефіциту людини, ОЩі - значення оптичної ЩІЛЬНОСТІ сироватки Для досягнення означеного технічного резульпуповинної крові, ум од, тату заявником були застосовані співвідношення рівнів оптичної ЩІЛЬНОСТІ ВІЛ-антитіл сироватки ОЩг - значення оптичної ЩІЛЬНОСТІ сироватки крові, взятої у новонародженої дитини із пуповинкрові, ум од ної крові та у тієї ж дитини у декретовані терміни Причинно-наслідковий зв'язок сукупності (3,6, 9,12 М І С Я Ц І В ) істотних ВІДМІННИХ ознак, що заявляються, з вищезгаданим технічним результатом полягає в настуДля здійснення способу необхідне таке облапному днання і матеріали, стандартні тест-системи (ІФА) для визначення рівня антитіл до вірусу імунодефіУстановлено, що багаточисельні етюпатогенециту людини першого та другого типів, лаборатортичні фактори розвитку ВІЛ-інфекцм ведуть до пона центрифуга та стандартний спектрофотометр із рушення в системі імунокомпетентних клітин, що довжиною хвилі 492нм Для визначення конценспричиняє неадекватну ВІДПОВІДЬ на антиген у витрацій, шуканих агентів у біологічних середовищах гляді ппер-, чи ппопродукцм антитіл ВІЛ-спеціфічні було проведено 65 досліджень Для дослідження антитіла зв'язуються з антигенами, утворюючи оптичної ЩІЛЬНОСТІ ВІЛ-антитіл у сироватці крові комплекси антиген-антитіло [1,2] Концентрація використовували кров з кубової вени в обсязі 3ВІЛ-спеціфічних антитіл в сироватці крові прямо5мл, яку розміщували у стерильну пробірку Напропорційна оптичній ЩІЛЬНОСТІ контрольних негадалі, її центрифугували зі швидкістю 1500об/хв тивних та позитивних зразків (при довжині хвилі протягом Юхв для відділення плазми від формен492нм) Якщо хвороба прогресує, в організмі утвоних елементів Дослідження виконувались на рюється більша КІЛЬКІСТЬ ВІЛ-антитіп у ВІДПОВІДЬ на біохімічному аналізаторі «Санофі діагностик Пасреплікацію вірусу імунодефіциту людини [5] Тож, тер» (Франція) Для визначення оптичної ЩІЛЬНОСТІ порушення динаміки співвідношення оптичної сироватки крові використовувались реагенти ЩІЛЬНОСТІ сироваток крові, яке виникає при прогрефірми «ДіаПрофМед» (Україна) Граничні значенсуванні хвороби, відбиває характерні ознаки ня оптичної ЩІЛЬНОСТІ сироватки крові негативного вірусного імунодефіциту, що складає основу патоконтролю не перевищували 0,1 оптичної одиниці генезу ВІЛ-інфекцм [3,4] Новизна запропонованого (00), а позитивного контролю - не були нижче 0,6 способу прогнозування перебігу вірусного ОО Рівень ВІЛ-антитіл визначали в сироватці імунодефіциту людини полягає утому, що вперше крові методом твердофазного імуноферментного пропонується спосіб, який дозволяє по визначенаналізу (ELISA) із використанням стандартних ню динаміки КІЛЬКІСНИХ параметрів сироватки крові тест-систем прогнозувати перебіг захворювання як у доношених, так і у передчасно народжених дітей Висока технологічність виконання, Суттєвою ВІДМІННІСТЮ запропонованого способу мінімальний обсяг вивчаємого матеріалу, прогнозування є те, що встановлені конкретні павідсутність спеціальної апаратури підвищують раметри ризику виникнення захворювання на оперативність та простоту методу та роблять його вірусний імунодефіцит у дітей вже на першому доступним для використання у лікувальних заклароці життя ( коефіцієнт ризику більше 30% або дах менше чи дорівнює 30%) Перевагами заявленого Приклад 1 способу прогнозування є наступні дослідження Дитина Л , народилась від III вагітності II попроводять в динаміці розвитку дитини, а не лише логів передчасно (термін гестацм плоду 36 тижнів) при народженні, мала інвазивність досліджень Перебіг вагітності мав патологічні ознаки (токси(для дослідження використовується пуповинна коз, загроза викидня, анемія) Пологи відбулися кров, а в динаміці 3-5мл крові), висока точність стрімко Стан здоров'я дитини за шкалою Апгар 95%, чутливість - 97%, результати досліджень при народженні оцінено як важкий - 5 балів, через після взяття крові можуть бути отримані через 245 хвилин - середньоважкий - 7 балів Маса тіла при 48 годин народженні 2000г, зріст 42см за період перебування у пологовому будинку стан дитини був сеРезультати проведених нами досліджень доред ньоважким, що обумовлено неврологічними, зволили встановити залежність між рівнем динамідихальними та гемодинамічними розладами На 5 ки оптичної ЩІЛЬНОСТІ сироватки крові та прогнодень дитина із пологового будинку була переведезом захворювання Відсутність ризику щодо на до відділення патології новонароджених Пророзвитку захворювання можна прогнозувати при тягом першого року життя у дитини відмічались коефіцієнті більше 30%, а наявність такого ризику багаточисельні вірусно-бактеріальні захворюванпри коефіцієнті нижче 30% ня, більше 8 раз вона лікувалась у стаціонарах з Отже, сукупність відокремлюючих ознак винаприводу пневмонії, септичного ендокардиту, алерходу є істотною, бо має причинно-наслідковий годерматиту, анемії, нефриту При народженні зв'язок з очікуваним технічним результатом, а сарівень оптичної ЩІЛЬНОСТІ ВІЛ-антитіл склав ме, дозволяє підвищити ефективність прогнозубільше 4ум од , а в динаміці у ВІЦІ 6 і 9 МІСЯЦІВ вання перебігу вірусного імунодефіциту у дітей за дорівнював 1,83ум од Обчислений за формулою рахунок використання чітких КІЛЬКІСНИХ критеріїв, а 60197 винаходу коефіцієнт ризику розвитку вірусного імунодефіциту склав 2 1 % Таким чином, по заявленому способу прогнозування дитина Л мала високий ризик викнення захворювання на вірусний імунодефіцит, що і підтвердилося у ВІЦІ 18 МІСЯЦІВ як лабораторне антигену р24), (наявність так і ВІЛ-антитіл, ВІЛ КЛІНІЧНИМИ ознаками (гіпотрофія III ступеню, кандидоз ротової порожнини, прояви нейроСНІДу у вигляду бульбарних порушень та повної атрофії клітин головного мозку, підтверджених методом комп'ютерної томографії) Висновок ризик розвитку вірусного імунодефіциту (21%) дуже високий Приклад 2 Дитина П , народилась від І вагітності І пологів у термін 40 тижнів (доношена) Маса при народженні 1900г, зріст 45см Під час вагітності жінка хворіла на сифіліс, отримувала антибактеріальне лікування Крім того, під час вагітності жінка споживала наркотичні речовини ІН'ЄКЦІЙНИМ ШЛЯХОМ Стан дитини при народженні за шкалою Апгар оцінено як середньоважкий - 6 балів, через 5 хвилин - 7 балів Пологи відбувалися з патологічними ознаками — коротка пуповина, сідничне прилягання плоду У періоді новонародженості дитина страждала на гнійне запалення очей та пуповинного кільця, перинатальне ураження ЦНС Протягом перших двох МІСЯЦІВ життя перебувала на стаціонарному лікуванні у відділенні патології новонароджених При дослідженні оптичної ЩІЛЬНОСТІ ВІЛ-антитіл у пуповинній крові и рівень склав 2,83ум од Протягом першого року життя дитина страждала на анемію, ОРВІ, бронхіт, контактний дерматит, вірусний гепатит В При дослідженні сироватки крові на ВІЛ-антитіла у декретований термін 6 МІСЯЦІВ рівень оптичної ЩІЛЬНОСТІ склав 0,8ум од При обчисленні за заявленою формулою коефіцієнт ризику розвитку вірусного імунодефіциту у дитини П склав 72%, і був розцінений як незначний Даний висновок було підтверджено у ВІЦІ 18 МІСЯЦІВ лабораторними (повна відсутність ВІЛ-антитіл) і КЛІНІЧНИМИ даними (відсутність КЛІНІЧНИХ симптомів ВІЛ-асоційованих хвороб) Комп'ютерна верстка Н Лисенко Висновок ризик розвитку вірусного імунодефіциту (72%) незначний Таким чином, після проведеного КЛІНІЧНОГО випробування запропонованого способу прогнозування перебігу ВІЛ-інфекцм, заявником встановлено, що заявлений спосіб може бути широко використаний в КЛІНІЦІ інфекційних хвороб, для заявляемого об'єкту утому вигляді, як він схарактеризований у незалежному пункті формули, підтверджена можливість його здійснення за допомогою вказаних у заявці або відомих до дати пріоритету діагностичних приладів, спосіб, що втілює заявляємий винахід при здійсненні, забезпечує досягнення позитивного результату, а саме підвищення ефективності прогнозування перебігу вірусного імунодефіциту людини по відношенню до прототипу з можливістю його здійснення на ранніх стадіях захворювання, а у разі необхідності провести лікувально-профілактичні заходи по реабілітації порушень імунного статусу у дітей Отже, розроблений винахід відповідає умовам "промислова придатність", "новизна", "винахідницький рівень" і може бути кваліфікований винаходом України Джерела інформації 1 Денисенко В Б„ Сизякина Л П Симованьян ЭН Иммунопатогенетические основы диагностики стадий ВИЧ-инфекции у детей// Иммунология 1999 -№2-С 16-20 2 Клінічна імунологія проблеми і значення для практичної медицини // Одеський медичний журнал -1999 -№3 -С 74-77 3 Патент Російської Федерації, RU2101707 G01 N33/53, Мартенова А А , Сотникова Н Ю , Копилова Е Б, Кудряшова А В Способ диагностики ранних отклонений в иммунном статусе новорожденных детей, опубл 10 01 1998Бюл№1 4 Abrams E J,, Matheson Р В , Thomas P A et al / Neonatal predictors of infections status and early death among 332 infants at risk of HIV-1 infections monitored prospectively from birth// Pediatrics -1995 N3 -P 451 457 5 Schlumpberger J M , Wolde-Tsadik G , Yao J F et al / CD8+-lymphocyte counts and the risk of death in advanced fflV infection // J Fam Pract1994-N1 -P33-38 Підписано до друку 06 10 2003 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна