Модифіковане живильне середовище для індикації l-форм збудника туберкульозу великої рогатої худоби

Модифіковане живильне середовище для індикації L-форм збудника туберкульозу великої 3 60460 гов И.Е. Фармакологические стимуляторы в животноводстве. М.: "Колос", 1964. -367с.]. Процес приготування модифікованого живильного середовища для індикації L-форм збудника туберкульозу великої рогатої худоби складається з таких етапів: 1. приготування ферментативного гідролізату серцевого м'яза великої рогатої худоби; 2. приготування модифікованого живильного середовища; 3. приготування 200%-го розчину цукрози; 4. передпосівна підготовка модифікованого живильного середовища. 1. Серцевий м'яз очищають від жиру, зв'язок і клапанів, нарізають шматочками завтовшки 11,5см, які вкидають у киплячу воду з розрахунку 0,5кг на 1л і кип'ятять упродовж 5 хвилин. Виловлюють шматочки серця, перемелюють через м'ясорубку і змішують з бульйоном. Суміш вміщують у бутель зі щільною гумовою пробкою і для ферментативного гідролізу додають 45г медичного препарату Панкреатин 8000 та 25г змеленої через м'ясорубку печінки великої рогатої худоби. Доводять рН до 7,8-8,0, ретельно струшують і додають 3 10см хлороформу з розрахунку на 1л рідини. Щільно закривають пробкою і витримують у термостаті при температурі 37°С упродовж 10 діб, періодично струшуючи. Гідролізат фільтрують і використовують для приготування середовища. 2. Компоненти: калій фосфорнокислий однозаміщений 1,5г натрій фосфорнокислий двозаміщений 2,5г 4 магній сірчанокислий 0,5г натрій лимоннокислий 1,5г залізо лимоннокислоаміачне 0,05г L-аспарагін 1,0г 3 гліцерин 30см , у вказаному порядку розчиняють у 0,5л дистильованої води. Після фільтрації через паперовий фільтр додають 3,0г агар-агару, попередньо розчиненого у 0,5л ферментативного гідролізату серцевого м'язу великої рогатої худоби. Стерилізують в автоклаві при 1атм. (120°С) упродовж 30хв. 3 3. На 100см дистильованої води додають 200,0 цукрози, стерилізують в автоклаві при 0,5атм. упродовж 20 хвилин. 4. До модифікованого живильного середовища 3 додають по 100см 200 %-го розчину цукрози і сироватки крові коня чи великої рогатої худоби, а також пеніцилін і стрептоміцин, попередньо розчи3 нені у 100 см ізотонічного розчину хлориду натрію. Ростові та елективні властивості модифікованого живильного середовища для індикації L-форм збудника туберкульозу великої рогатої худоби визначали за результатами дослідження проб матеріалу, відібраного від тварин, експериментально заражених суспензією мікобактерій штаму Vallee у L-формі (дослід) та суспензією мікобактерій цього штаму у вегетативній формі (контроль №1) і інтактних тварин (контроль № 2). Результати проведених досліджень представлені у таблиці 1. Таблиця 1 Індикація L-форм збудника туберкульозу великої рогатої худоби з проб матеріалу експериментально заражених лабораторних тварин Введена культура мікобактерій Досліджувана проба матеріалу кров №1 M.bovis шт. Vallee вегетативна кров №2 форма (контроль №1) лімф, вузли per. №1 лімф, вузли per. №2 кров №3 Ізотонічний розчин хлориду натрію кров №4 (контроль №2) лімф, вузли per. №3 лімф, вузли per. №4 кров №5 M.bovis шт. Vallee L-форма (дос- кров №6 лід) лімф, вузли per. №5 лімф, вузли per. №6 З даних, наведених у таблиці 1, видно, що частота індикації L-форм збудника туберкульозу з досліджуваних проб матеріалу, відібраного від експериментально заражених тварин, на запропонованому живильному середовищі вища, ніж на середовищі Школьнікової, взятому за прототип. Виділено L-форми мікобактерій на середовищі Школьнікової запропонованому (прототип) _ + + + + + + + Корисна модель також ілюструється результатами індикації L-трансформованого збудника туберкульозу за впливу антибактеріальних препаратів в умовах експерименту in vitro (таблиця 2). 5 60460 6 Таблиця 2 Виділення L-індукованої форми збудника туберкульозу великої рогатої худоби Досліджувана культура мікобактерій М. bovis шт. Vallee M.bovis шт. 8 L-індуктор, мг/см Виділено L-форми мікобактерій на середовищі Школьнікової (прозапропонованому тотип) 3 амікацин 500 1000 стрептоміцин 500 1000 ципрофлоксацин 500 1000 амікацин 500 1000 стрептоміцин 500 1000 ципрофлоксацин 500 1000 Отже, результати проведених досліджень свідчать про те, що запропоноване модифіковане живильне середовище для індикації L-форм збудника туберкульозу великої рогатої худоби забез Комп’ютерна верстка Н. Лиcенко + + + + + + + + + + + + + + + + + печує 100-відсоткове його виділення як з проб патологічного матеріалу, так і L-індукованої його рми в експериментальних умовах. Підписне Тираж 24 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601