Спосіб моделювання акушерського антифосфоліпідного синдрому

Спосіб моделювання акушерського антифосфоліпідного синдрому шляхом імунізації мишей лінії BALB/c препаратом, що містить кардіоліпін, який відрізняється тим, що імунізацію здійснюють кардіоліпіновим антигеном, суспендованим в фізіологічному розчині, який вводять внутрішньовенно в дозі 30 мкг кардіоліпіну на одну тварину, 4 рази з інтервалом 14 діб. (19) (21) u201100372 (22) 12.01.2011 (24) 10.08.2011 (46) 10.08.2011, Бюл.№ 15, 2011 р. (72) ПРОКОПЮК ВОЛОДИМИР ЮРІЙОВИЧ, ПРОКОПЮК ОЛЬГА СТЕПАНІВНА, ТРІФОНОВ ВІКТОР ЮРІЙОВИЧ, ЗАЙЧЕНКО ГАННА ВОЛОДИМИРІВНА, ФАЛЬКО ОКСАНА ВАЛЕРІЇВНА (73) ІНСТИТУТ ПРОБЛЕМ КРІОБІОЛОГІЇ І КРІОМЕДИЦИНИ НАЦІОНАЛЬНОЇ АКАДЕМІЇ НАУК УКРАЇНИ 3 62029 близити експериментальну модель до клінічного перебігу захворювання. Ця задача вирішується тим, що в способі моделювання акушерського АФС шляхом імунізації мишей лінії BALB/c препаратом, що містить кардіоліпін, згідно з корисною моделлю, імунізацію здійснюють кардіоліпіновим антигеном, суспендованим в фізіологічному розчині, який вводять внутрішньовенно в дозі 30 мкг кардіоліпіну на одну тварину, 4 рази з інтервалом 14 діб. Кардіоліпіновий антиген містить кардіоліпін, лецетин та холестерол в співвідношенні 1:10:30. Відомий як препарат для лабораторної діагностики сифілісу (реакції Вассермана, або мікропреципітації). Використання кардіоліпінового антигену дозволяє отримати модель акушерського АФС, наближену до клінічного перебігу захворювання, без загальної сенсибілізації, введення сторонніх речовин і з ураженнями, характерними для АФС як в першій половині вагітності (переривання вагітності - резорбції), так і в другій (передчасні пологи, внутрішньоутробна загибель плоду, гіпотрофія плоду, плацентарна недостатність). Спосіб пояснюється наступним прикладом. Приклад. В експерименті застосовували 40 мишей лінії BALB\c, яких розділяли на 2 групи: І група (20 тварин) - основна, II група (20 тварин) контрольна, інтактні миші. Мишам І групи здійснювали імунізацію кардіоліпіновим антигеном, суспендованим в 0,1 мл фізіологічного розчину, який вводили внутрішньовенно в дозі 30 мкг кардіоліпіну на одну тварину, 4 рази з інтервалом 14 діб. Через 14 і 30 діб після останньої ін'єкції кардіоліпінового антигену проводили дослідження імунологічних показників (реакція мікропреципітації (РМП), реакція бласттрансформації лімфоцитів (РБТЛ), рівень комплементу), показників коагулограми (кількість тромбоцитів, згортання крові за 4 Моровіцем) та гістологічне дослідження ендометрію. Було визначено, що миші І групи мали позитивну РМП з кардіоліпіновим антигеном одразу після формування моделі та через 30 діб. Показник РБТЛ був вірогідно підвищений в І групі, тоді як рівень комплементу знижувався (Табл. 1), що свідчить про розвиток АФС. При дослідженні показників коагулограми спостерігали прискорення згортання крові та тромбоцитопенію (Табл. 2), що демонструє характерну для АФС коагулопатію. При гістологічному дослідженні ендометрію у тварин з АФС спостерігали атрофічні явища, мікротромбози, деяку десквамацію ендометрію, чого не було у здорових тварин. При подальшому дослідженні інтактних самиць та з моделлю АФС спарювали з самцями. Виводили з експерименту на 20 добу вагітності, підраховували кількість плодів, резорбцій, мертвих плодів, вагу плодів, плаценти (Табл. 3). Виділяли 2 групи: І - з АФС, II - контрольну. Завагітніло 8 самиць з кожної групи, однак кількість плодів у мишей з АФС була вірогідно нижча. Зустрічалися тварини з резорбцією плодів і з мертвими плодами. Середня вага плодів зменшувалася, середня вага плацент не змінювалася (Табл. 3). У однієї миші відбулися передчасні пологи на 18 добу вагітності. При гістологічному дослідженні плацент відмічали мікротромбози в плаценті, збільшення кількості фібріноіду, атрофічні явища, які є ознаками АФС та плацентарної недостатності. Таким чином продемонстровано, що заявлений спосіб дозволяє отримати модель акушерського АФС, наближену до клінічного перебігу захворювання, з характерними змінами в імунній системі та системі коагуляції, без загальної сенсибілізації, введення сторонніх речовин і з ураженнями, характерними для акушерського АФС як в першій, так і в другій половині вагітності. Таблиця 1 Імунологічні показники в досліджуваних групах (М±m) Група І (n=101 II (n=10) РБТЛ, % Через 14 діб 22,0±1,6 10,5 ±0,8* Через 30 діб 16,8±2,1 10,4±0,5* Комплимент, СН50 Через 14 діб Через 30 діб 47,1±2,3 48,6±3,2 64,5±3,3* 62,8±1,43* * - вірогідність різниці з І групою (р