Спосіб одержання низькомолекулярної фракції з тканин плаценти свинячої

Спосіб одержання низькомолекулярної фракції із тканин плаценти свинячої, що включає попереднє відмивання плацентарних тканин у воді, подрібнення і виділення водорозчинної композиції, який відрізняється тим, що після відмивання здійснюють швидке заморожування тканин до температури -80°С...-120°С парами рідкого азоту, подрібнення здійснюють у кріогенних млинах при температурі -80°С...-120°С до розміру частинок 2030мкм, а потім проводять відділення низькомолекулярної фракції у вакуумних камерах при тиску 0,1мм рт.ст. і температурі -10°С...-20°С з подальшою конденсацією на кріогенні панелі, які охолоджують рідким азотом. Винахід відноситься до області ветеринарії, медицини, косметології. Прототипом винаходу є біогенний стимулятор в ін'єкційній лікформі, що призначена для лікування і профілактики захворювань сільськогосподарських тварин, переважно корів та свиноматок, на основі плацентарних тканин тих же тварин після хімічної обробки плаценти кисневими сполуками хлору відомим способом [RU, 2036651, 06.09.1995]. До недоліків даного способу слід віднести: - вміст у кінцевому продукті високомолекулярних білків і пептидів, а також продуктів їх окислення із-зі відсутності вибіркової екстракції для водорозчинних компонентів; - хімічна і температурна обробка при відсутності кріогенної консервації призводить до зниження якості біологічної активності одержаної фракції. Технічний результат винаходу - одержання високоефективної біологічно активної фракції з молекулами, що мають нативну структуру і вагою не більше 300-350а.о.м. Технічного результату досягають шляхом використання заявляемого способу. Спосіб здійснюють таким чином: Плаценту промивають водою, фрагментують і піддають швидкому заморожуванню у парах рідкого азоту до температури від -80°С до -120°С зі швидкістю 30 на хвилину. Подрібнення плаценти свинячої здійснюють на кріомлині при охолодженні парами рідкого азоту до температур від -80°С до 120°С. Ступінь подрібнення тканин складає 2030мкм. Подрібнену і заморожену тканину плаценти піддають кріосублімаційному фракціонуванню при температурах у діапазоні від -10 С до -20 С і залишковому тиску у камері не вище 13,33Па протягом 16-20год. Фракція, що була випарена із заморожених тканин плаценти і яка містить молекули і молекулярні комплеси не більше 300-350а.о.м., конденсується на спеціальних кріогенних панелях, які охолоджують рідким азотом до температури 196°С. Термін фракціонування складає 16-20год. Після завершення процессу кріосублімаційного фракціонування кріогенні панелі отеплюються до 0°С і сконденсована на них водна фракція стікає у спеціальний приймач. Вихід кінцевого продукту складає не менше 85% від ваги вихідної сировини. Сутність способу пояснюється прикладами. (19) UA (11) 77487 (13) C2 (21) 20040806563 (22) 05.08.2004 (24) 15.12.2006 (31) 2003124739 (32) 07.08.2003 (33) RU (46) 15.12.2006, Бюл. №12, 2006р. (72) Шабунін Сєргєй Вікторовіч, RU, Востроілова Галіна Анатольєвна, RU, Мєщєряков Ніколай Прокофьєвіч, RU, Курило Миколай Федоровіч, Конев Володимир Федорович, Гребенщиков Віктор Юхимович, Бондар Лариса Олександрівна, Філатов Володимир Антонович, Осецький Олександр Іванович, Федченко Юрій Григорович, Осецька Марія Олександрівна, Лисенко Тетяна Михайлівна (73) ЗАКРИТОЄ АКЦІОНЄРНОЄ ОБЩЄСТВО НАУЧНО-ПРОІЗВОДСТВЄННОЄ ПРЄДПРІЯТІЄ "АГРОФАРМ", RU 3 77487 Приклад 1. Визначення оптимального співвідношення температури і ступеня кріоподрібнення З метою визначення оптимального співвідношення температури і ступеня кріоподрібнення було проведено три досліди. При усіх дослідах брали 10кг тканин свинячої плаценти і відмивали водою. Надалі: у досліді №1 - заморожували до 80°С, подрібнення до середнього розміру часток 30мкм проводили при температурі -80°С; у досліді 4 № 2 - заморожували до -100°С, подрібнення до середнього розміру часток 20мкм проводили при температурі -100°С; у досліді №3 - заморожували до -120°С, подрібнення до середнього розміру часток 15мкм проводили при температурі -120°С. Потім матеріал, який одержали в результаті усіх трьох дослідів, протягом 20год. піддавали кріосублімаційному фракціонуванню. Результати проведених дослідів наведені у Таблиці 1. Таблиця 1 Вплив температури і ступеня подрібнення тканин плаценти свинячої на вихід низькомолекулярної фракції Показники Температура подрібнення, С Середній розмір часток після подрібнення, мкм Вихід кінцевого продукту, кг*) Примітка: *) Номер досліду 2 -100 1 -80 3 -120 30 20 15 8,2 8,5 8,5 Після 20год. кріосублімаційного фракціонування Проведені досліди показали, що отимальним режимом одержання низькомолекулярної фракції є заморожування до -100°С, подрібнення при -100°С до середнього розміру часток 20мкм. Збільшення температури і розміру часток призводить до зни ження виходу готової продукції. Зниження даних параметрів призводить до підвищення затрат. Результати біохімічного аналізу низькомолекулярної фракції із плаценти свинячої, яку одержали з використанням заявляемого способу, наведені у Таблиці 2. Таблиця 2 Амінокислотний і мінеральний склад низькомолекулярної фракції плаценти свинячої Амінокислоти Макро- і мікроелементи Показники Цистеїнова кислота Аспарагінова кислота Треонін Серін Глутамінова кислота Гліцин Аланін Валін Ізолейцин Лейцин Гистидін Лізин Мідь Цинк Залізо Кальцій Фосфор Дані, наведені у Таблиці 2, дозволяють зробити висновок, що одержана фракція є ефективною основою для створення лікарських форм для ветеринарії, медицини, косметології. Це обумовлено тим, що біологічно активні речовини із тканин плаценти знаходяться у самому вигідному для них природному стані, коли різко прискорю Вміст,мкМ/л 8,22 6,85 6,96 10,16 17,34 13,87 10,23 17,54 19,42 14,82 47,24 456,52 2,05 44,05 17,91 0,46 0,48 ються процеси всмоктування БАР із основи, у зв'язку з чим прискорюються регенеративні процеси в організмі, знімаються запальні процеси різної природи. Фракція, яку одержали з застосуванням заявляємого способу, дозволяє ефективно і нешкідливо впливати на організм. 5 Комп’ютерна верстка В. Сердюк 77487 6 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601