Водний екстракт свинячої плаценти

1. Водний екстракт свинячої плаценти, що включає біологічно активну речовину із плацентарної тканини, консервант і знебарвлюючу речовину як допоміжні речовини, який відрізняється тим, що біологічно активна речовина включає водну фракцію пептидів і вільних амінокислот, отриманих із тканини плаценти свині. 2. Водний екстракт за п. 1, який відрізняється тим, що включає розчин нипагіну у пропіленгліколі як консервант і лимонну кислоту як знебарвлюючу речовину при наступному співвідношенні компонентів, ваг. %: біологічно активна речовина 0,1-0,35 нипагін 0,18-0,22 0,3-0,4 лимонна кислота 2,5-6,0 пропіленгліколь решта, вода де біологічно активна речовина включає вільні амінокислоти, пептиди і низькомолекулярні органічні залишки при наступному співвідношенні компонентів, % сухої ваги: вільні амінокислоти від 100 до 500 Д 21,6-26,6 пептиди від і 000 до 2000 Д 35,3-43,1 пептиди від 3000 до 5000 Д 16,5-20,1 низькомолекулярні органічні залишки менше за 100 Д решта. 3. Водний екстракт за п. 2, який відрізняється тим, що біологічно активну речовину отримано за способом, що включає механічне подрібнення і гомогенізацію плаценти свині, отримання водного екстракту гомогенізату шляхом його розбавлення водою, знебарвлення водної суспензії гомогенізату доданням підкислювача, витримку при перемішуванні з наступним відстоююванням, декантуванням, і консервацією шляхом додання до супернатанту консерванта. 4. Водний екстракт за п. З, який відрізняється тим, що водний екстракт гомогенізату розбавлюють дистильованою водою в співвідношенні 0,8-1,2 масових частин води на 1 частину гомогенізату, водну суспензію гомогенізату знебарвлюють доданням до суспензії 0,006-0,007 масових частин лимонної кислоти, витримування здійснюють протягом 70-110 хвилин при перемішуванні, потім відстоюють протягом 10-20 хвилин, декантують, консервацію здійснюють шляхом додання до супернатанту нипагіну, супернатант з консервантом витримують протягом 45-75 хвилин, після чого з декантованого супернатанту видаляють частки з розмірами більше 3 мкм шляхом фільтрації. 5. Водний екстракт за п. 4, який відрізняється тим, що нипагін додають в кількості 0,1-0,3 ваг. %. 6. Водний екстракт за п. 5, який відрізняється тим, що нипагін додають у вигляді 5 % розчину в пропіленгліколі. СО со 5> о> Корисна модель відноситься до області косметології, фармації і медицини, зокрема, до водного екстракту свинної плаценти. Відомий спосіб отримання біологічно активної речовини з людської плаценти, що включає механічне подрібнення і гомогенізацію плаценти, отримання водного екстракту і обробку екстракту за допомогою електролізу протягом 1-1,5 години [патент РФ №22119903, МПК7 А61К7/48, 2003р.]. У результаті отримують желеподібну масу. Недоліком цього відомого способу є використання дефіцитної сировини людської плаценти. Крім того, при електролізі водного екстракту плаценти відбувається хімічне розщеплення пептидів, 9133 що містяться в екстракті, і появі в суміші продуктів їх розпаду у вигляді окремих амінокислот і не нативних пептидів, внаслідок чого біологічна активність продукту різко падає Відомий також спосіб отримання плацентарного протеїну, що включає отримання гомогенату тканини плаценти свині, центрифугування, хроматографування, елюювання пов'язаного білка, осадження елюату і повторне центрифугування, при цьому з хроматографій використовують афінну хроматографію на сефарозі з іммобілізованим конго-червоним носієм, елюювання проводять 1,0 М розчином хлориду калію з доданням 5% гліцерину, осадження елюату здійснюють при 90%-ном насиченні сульфатом амонію, а після центрифугування осадок додатково піддають фракціюванню в 0,1 М амоній-бікарбонатному буфері з подальшим збором фракцій, що містять цільовий продукт, і їх діалізом [патент РФ №2007417, МПК5 С07КЗ/02, 1994] Цей спосіб дозволяє отримати специфічний плацентарний протеїн свині 2 (ППС-2), який є плаценто специфічним антигеном і може бути використаний як маклер для ранньої діагностики поросності свині, але не як біологічно активна речовина широкого спектра ди, що застосовується в косметологи, фармації і медицині Відомий спосіб отримання низькомолекулярної фракції з тканин плаценти свині заснований на отриманні низькомолекулярної фракції вагою не більше за 300-350 атомних одиниць за допомогою попереднього подрібнення тканини на крюмлині при температурі від мінус 80°С до мінус 120°С з подальшим крюсублімаційним фракціюванням при температурі від мінус 10°С до мінус 20°С у вакуумних камерах при тиску 0,1 мм рт ст і подальшої крюконденсацм на кріогенний панелі, що охолоджується рідким азотом [патент РФ № 2228759, МПК7А61К35/50, 05 20 2004 ] Недоліком цього способу є те, що продукт містить фракції, молекулярна маса яких не перевищує 300-350 атомних одиниць, оскільки більш важкі молекули неможливо витягнути методом низькотемпературної сублімації Тобто в продукті відсутні біологічно активні речовини, наприклад, пептиді з молекулярною масою вище за 300-350 атомних одиниць, які, як відомо, володіють протизапальною дією, є регулювальниками обмінних процесів Низька продуктивність способу і використання складних і кріогенних технологій, що дорого коштують, обумовлюють високу вартість кінцевого продукту, що також є серйозною перешкодою для промислового використання цього відомого способу ВІДПОВІДНО, вказані вище недоліки відомого способу обмежують також можливості застосування біологічно активних плацентарних речовин в косметиці і фармакології Задачею корисної моделі є створення водного екстракту плаценти свині, при отриманні якого біологічно активна речовина з плаценти свині може бути використана безпосередньо без додаткової обробки або значної зміни складу Поставлена задача вирішується тим, що водний екстракт плацентарної тканини, який містить біологічно активну речовину із плацентарної тканини, нипапн, пропіленгліколь і знебарвлюючу речовину, як ДОПОМІЖНІ речовини, відрізняється тим, що біологічно активна речовина включає водну фракцію пептидів і вільних амінокислот тканини плаценти свині, переважно при наступному співвідношенні компонентів, (ваг %) біологічно активна речовина 0,1-0,35 ніпапн 0,18-0,22 лимонна кислота 0,3-0,4 пропіленгліколь 2,5-6,0 вода решта, де біологічно активна речовина включає ВІЛЬНІ амінокислоти, пептиди і низькомолекулярні органічні залишки, переважно при наступному співвідношенні компонентів, % сухої вагиВІЛЬНІ амінокислоти від 100 до 500 Д 21,6-26,6 пептиди від 1000 до 2000 Д 35,3-43,1 пептиди від 3000 до 5000 Д 16,5-20,1 низькомолекулярні органічні залишки менше за 100 Д решта Переважно, як знебарвлюючу речовину водний екстракт містить лимонну кислоту БІОЛОГІЧНО активну речовину отримують способом, що включає механічне подрібнення і гомогенізацію плаценти свині, отримання водного екстракту гомогенізату і консервацію екстракту, водний екстракт гомогенізату отримують шляхом його розбавлення водою, водну суспензію гомогенізату знебарвлюють доданням до суспензії підкислювача, витримують при перемішуванні, потім відстоюють, декантують, а консервацію здійснюють шляхом додання до супернатанту консерванту Переважно водний екстракт гомогенізату отримують шляхом його розбавлення дистильованою водою в співвідношенні 0,8-1,2 масових частин води на 1 частину гомогенізату, водну суспензію гомогенізату знебарвлюють доданням до суспензії 0,006-0,007 масових частин лимонної кислоти, витримують протягом 70-110 хвилин при перемішуванні, потім відстоюють протягом 10-20 хвилин, декантують, консервацію здійснюють шляхом додання до супернатанту нипапну, супернатант з консервантом витримують протягом 45-75 хвилин, після чого з декантованого супернатанта видаляють частки з розмірами більше Змкм шляхом фільтрації У якості консерванту засіб може містити ПОХІДНІ ефіру парагідроксибензойної кислоти, наприклад, розчини нипапну (метилпарапдроксибензоату) у пропіленгліколі, поліетиленоксиді, диметилсульфоксиді або в інших розчинниках, амідосечевину та ІНШІ фармацевтично прийнятні у якості консерванту речовини Переважно, у якості консерванту засіб містить 2-5% розчин нипапну в пропіленгліколі Переважно, нипапн додають в КІЛЬКОСТІ 0,1-0,3 ваг % і його додають у вигляді 5% розчину в пропіленгліколі Більш детально корисна модель описана за допомогою приведеного нижче прикладу 9133 Приклад Розморожену і ретельно відмиту від крові тканину плаценти свині в КІЛЬКОСТІ 10КГ ОЧИСТИЛИ ВІД слизу, подрібнили ножицями до часток розміром приблизно 50x50 мм і гомогенізували за допомогою електром'ясорубки Отриманий гомогенізат залили 10л охолодженої до 15°С дистильованою водою, ретельно перемісили до отримання однорідної суспензії і додали 70г лимонної кислоти для знебарвлення суспензії Для екстракції водорозчинних пептидів суспензію плаценти витримали в ємності протягом 1,5 годин при повільному перемішуванні, після чого дали відстоятися протягом 15 хвилин Біологічно-активно речовину у вигляді супернатанту в КІЛЬКОСТІ 10Л декантували і додали до нього 0,5кг розчину, який містить 20г нипапну (як консерванту), що розчинений в 0,5кг пропіленгліколю Суспензію ретельно перемішали і витримали протягом 1 години Отриманий водний екстракт плаценти відфільтровували за допомогою мембранних фільтрів типу "Миллипор" з діаметром пір 1-Змкм Отримали 10 л чистого пептидного екстракту плаценти Водний екстракт розлили по ємностях і вмістили на зберігання в морозильну камеру з температурою мінус 28° С Отриманий водний екстракт плаценти є прозорою, злегка жовтуватою, рідиною з характерним слабким запахом, має рН від 3 8 до 4 5 Сухий залишок складає не менше за 6 і не більше за 7% Отриманий водний екстракт плаценти досліджували з допомогою гель-проникаючої високоефективної рідинної хроматографи (ГПВЕРХ) За даними гель-хроматографи був визначений фракційний склад (по молекулярній масі) водного екстракту плаценти свині 6 Прилади і матеріали Для визначення фракційного складу водного екстракту плаценти використали рідинний хроматограф Woters "Alhense", з програмним забезпеченням Міленіум 32, версія 51 Умови аналізу - колонка TSK SW 2000, розміром 7,5 х 600мм, - рухлива фаза фосфатний буферний розчин з сульфатом натрію -ацетонітрил (90 10), дегазована будь-яким зручним способом - швидкість рухливої фази 1 мл/хв , - об'єм проби 20мкл Приготування рухливої фази 32,21г натрію фосфорнокислого одно заміщеного двохводного вміщують в мірну колбу МІСТКІСТЮ 1л, розчиняють в 500мл води, доводять об'єм водою до мітки і перемішують (розчин А) 71,64г натрію фосфорнокислого двох заміщеного дванадцативодного вміщують в мірну колбу МІСТКІСТЮ 1л, розчиняють в 500 мл води, доводять об'єм водою до мітки і перемішують (розчин Б) 32,22г натрію сірчанокислого десятиводного вміщують в мірну колбу МІСТКІСТЮ 1 л, розчиняють в 300 мл води, додають 312,5мл розчину А і 187,5мл розчину Б, перемішують, додають ЮОмл ацетонітрилу, перемішують і доводять об'єм розчину водою до мітки Результати аналізу представлені в таблиці Отриманий водний екстракт відрізняється тим, що містить оптимальну і оригінальну по складу композицію біологічно активних речовин, що включає ВІЛЬНІ амінокислоти, пептиди і низькомолекулярні органічні речовини і придатна для використання у виробництві високоефективних фармацевтичних препаратів і широкого спектру косметичних засобів. Таблиця Фракційний склад (по молекулярній масі) водного екстракту плаценти за данимигель-хроматографи (X = 254 нм) Час витримки речовин на колонці (хвилини) 18 576 20 062 20 479 Площа під хроматограф, 21 569 2749469 24 22 22 879 24 471 25 571 967350 608547 500830 8 52 5 36 4 41 Комп'ютерна верстка М Клюкін ПІКОМ 2075501 2332345 2116487 Площа під хроматограф піком (в %) 18 29 Орієнтовна молекулярна маса, (дальтон) 3000