Спосіб кріоконсервування сперми собак

Реферат: Спосіб кріоконсервування сперми собак включає відцентрифугування упродовж 5 хвилин, розрідження розріджувачем, фасування, замороження у парах рідкого азоту протягом 10 хвилин та випаювання за температури 40 °C упродовж 10 секунд. Половину об'єму надосадової рідини (плазми) відбирають та заморожують за температури 20 С; другу половину об'єму сперми розпіпетовують в іншій половині плазми та краплями, постійно перемішуючи, додають розріджувач для кріоконсервації у співвідношенні 1:1; фасуючи сперму з розріджувачем у 3 пробірки місткістю по 2 см , та здійснюють 20-хвилинну еквалібрацію за температури 5 °C, замороження у парах рідкого азоту протягом 20 хвилин. UA 80544 U (54) СПОСІБ КРІОКОНСЕРВУВАННЯ СПЕРМИ СОБАК UA 80544 U UA 80544 U 5 10 15 20 25 30 35 40 Корисна модель належить до біотехнології та ветеринарної медицини. Відомий спосіб, запропонований Р. Terhaеr (1993), (Tеrhaer P. Untersuchungen zur Tiеfgefriеrkonsеrviеrung von Нundеspеrma: Motilitt, ATP-Konzentration und Akrosomintegrital der Spermien bei Zusatz unterschiedlicher Glycerinendkonzentrationen sowie von Seminalplasma zumverdunnten bzw. aufgetauten Samen. Praca dokt., Tierraztliche Hochschule Hannover. 1993. P. 239), який полягає у видаленні плазми шляхом центрифугування та поетапному додаванні до сперми компонентів розріджувача. Цей спосіб включає наступні стани: взяття еякуляту та його первинна оцінка; вступне розрідження спермії без додавання гліцерину; вторинне розрідження, центрифугування, додавання гліцерину; 10-хвилинна еквілібрація за кімнатної температури; фасування у міні-туби місткістю по 0,25 мл; еквілібрація за температури 5 °C упродовж 3 годин; замороження у парах рідкого азоту протягом 10 хвилин; розмороження за температури 40 °C упродовж 10 секунд. У результаті рухливість сперміїв після відтаювання становила 39,1 %. Проте при апробуванні цього способу із застосуванням середовища КД-1, до складу якого входять наступні компоненти: бідистильована вода 100 мл; хлорид натрію 0,65 г; хлорид калію 0,02 г; бікарбонат натрію 0,21 г; хлорид магнію 0,01 г; піруват натрію 0,01 г; лактат натрію 0,055 г; Тріс 0,25 М; глюкоза 0,25 г; сахароза 0,5 М; гліцерин 8 %, життєздатність сперміїв після відтаювання становила тільки 36 %. Задачею корисної моделі є розробка способу кріоконсервування сперми собак, використання якої дало б змогу підвищити життєздатність гамет після відтаювання. Поставлена задача досягається тим, що запропонований спосіб дає змогу зберегти життєздатність сперміїв собак після відпаювання у межах 50-55 %. Згідно пропонованої корисної моделі, у способі половину об'єму надосадової рідини (плазми) відбирають та заморожують за температури 20 С; другу половину об'єму сперми розпіпетовують в іншій половині плазми та краплями, постійно перемішуючи, додають розріджувач для кріоконсервації у співвідношенні 1:1; фасуючи сперму з розріджувачем у 3 пробірки місткістю по 2 см , та здійснюють 20-хвилинну еквалібрацію за температури 5 °C, замороження у парах рідкого азоту протягом 20 хвилин. Для досягнення високого відсотка виживання сперміїв після відтаювання при глибокому заморожуванні сперми необхідне суворе дотримання технології розрідження, охолодження та заморожування, на що, в свою чергу, вагомий вплив має спосіб кріоконсервації сперми. Запропонований спосіб дає змогу зберегти життєздатність сперміїв собак після відпаювання у межах 50-55 %, що значно підвищить виживаність сперміїв в статевих органах самок та збільшить ефективність заплідненості сук при штучному осіменінні. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб кріоконсервування сперми собак, що включає відцентрифугування упродовж 5 хвилин, розрідження розріджувачем, фасування, замороження у парах рідкого азоту протягом 10 хвилин та випаювання за температури 40 °C упродовж 10 секунд, який відрізняється тим, що половину об'єму надосадової рідини (плазми) відбирають та заморожують за температури 20 С; другу половину об'єму сперми розпіпетовують в іншій половині плазми та краплями, постійно перемішуючи, додають розріджувач для кріоконсервації у співвідношенні 1:1; фасуючи 3 сперму з розріджувачем у пробірки місткістю по 2 см , та здійснюють 20-хвилинну еквалібрацію за температури 5 °C, замороження у парах рідкого азоту протягом 20 хвилин. 45 Комп’ютерна верстка І. Мироненко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 1