Ліпосомальна фармацевтична композиція антимікробної дії

1. Ліпосомальна фармацевтична композиція антимікробної дії на основі лецитину, яка відрізняється тим, що додатково містить хлорофіліпт та етакридину лактат при наступному співвідношенні компонентів [мас. %]: лецитин 97,0-99,0 хлорофіліпт 0,5-1,5 етакридину лактат 0,5-1,5. 2. Ліпосомальна фармацевтична композиція за п. 1, яка відрізняється тим, що одержана з використанням ектерициду як дисперсійного середовища. (19) (21) a200611251 (22) 25.10.2006 (46) 25.06.2008, Бюл.№ 12, 2008 р. (72) ДИКИЙ ІГОР ЛЕОНІДОВИЧ, UA, ФІЛІМОНОВА НАТАЛІЯ ІГОРІВНА, UA, ОСТАПЕНКО ВІКТОРІЯ МИКОЛАЇВНА, UA (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ, UA (56) Бєлік Г.В. Експериментальне обґрунтування використання ліпосомальної форми кверцетину при серцево-судинних захворюваннях. Автореферат дисертації на здобуття наукового ступеня кандидата фармацевтичних наук. Харків, 2006. 3 композиція містить хлорофіліпт та етакридину лактат при співвідношенні компонентів [мас.%]: Лецитин 97,0-99,0 Хлорофіліпт 0,5-1,5 Етакридину лактат 0,5-1,5 У відповідності з винаходом заявлена фармацевтична композиція одержана з використанням ектерициду в якості дисперсійного середовища. Заявлений склад фармацевтичної композиції визначений експериментальним шляхом, є новим і не відомий з джерел інформації. Введення до композиції лецитину обумовлює утворення ліпосом, які забезпечують максимальне проникнення діючих речовин у внутрішні структури клітин завдяки хіміко-біологічним властивостям, ідентичним з цитоплазматичною мембраною клітин. Додаткове введення хлорофіліпту забезпечує виражену антимікробну активність заявленої композиції по відношенню до чутливих і лікарськостійких мікроорганізмів. Введення до складу заявленої фармацевтичної композиції етакридину лактату обумовлює посилення та розширення спектру антимікробної дії засобу в цілому. Авторами вперше використане поєднання у ліпосомальній формі антисептиків природного і хімічного походження: хлорофіліпту та етакридину лактату. Досліджено, що у цьому випадку спостерігається неочевидний ефект запобігання формуванню лікарської стійкості патогенних мікроорганізмів до заявленої композиції. Додатково виникає ефект взаємного потенціювання фармакологічної дії зазначених активних діючих речовин, введених у ліпосоми. У ході експериментів були визначені інтервали кількісного вмісту кожного з компонентів. Збільшення вмісту лецитину понад 99% практично виключає можливість введення діючих речовин, зменшення нижче 97% призводить до негативного впливу на конструкційні характеристики сформованих ліпосом. Оптимальний вміст - 98%. Збільшення вмісту хлорофіліпту понад 1,5% призводить до порушень технології одержання ліпосом, при цьому терапевтичний ефект практично не зростає внаслідок кінцевої кількості хлорофіліпту, який може бути включений до ліпосоми, зменшення вмісту нижче за 0,5% призводить до зниження антимікробної активності. Оптимальний вміст - 1%. При зменшенні вмісту етакридину лактату нижче за 0,5% не відбувається його проникнення крізь двошарову цитоплазматичну мембрану ліпосоми, при збільшенні вмісту понад 1,5% порушується технологічність одержання ліпосомальної композиції. Оптимальний вміст - 1%. Вибір композиційного сполучення етакридину лактату з хлорофіліптом обумовлений наступними причинами. За антимікробними властивостями обрані для технологічного сполучення препарати відносяться до антисептиків з вибірковими мікробоцидними властивостями. За антимікробними спектрами характеризуються пріоритетно вираженою здатністю по відношенню до грампозитивних 83299 4 патогенних коків. За антиселективним потенціалом вибрані антисептики відрізняються рівноцінно вираженою активністю по відношенню до чутливих і лікарськостійких мікроорганізмів у поєднанні з упереджувальною здатністю у формуванні стійких штамів мікроорганізмів і елімінаційним впливом на R-плазміду множинної лікарської стійкості. За результатами мікробіологічного скринінгу підтверджена синергідна сумісність між етакридину лактатом і хлорофіліптом у комплексному вияві антисептичної дії. Виходячи з того, що ліпосоми являють собою замкнуті бульбашки водного розчину, оточені безперервним бімолекулярним шаром фосфоліпідів, забезпечення стабільності такого шару обумовлює якість ліпосомальної структури. Авторами визначеного використання ектерициду в якості дисперсійного середовища при одержанні ліпосом дозволяє підвищити їх стійкість та ефективність. Такий результат обумовлений вмістом у ектерициді водорозчинних дикарбонових кислот, альдегідів та органічних перекисів, завдяки чому відбувається ущільнення міжмолекулярних структур фосфоліпідів лецитину, які утворюють бімолекулярний шар. Ектерицид відрізняється також вираженою антимікробною активністю по відношенню до стійких до антибіотиків грамнегативних та грампозитивних мікроорганізмів, що сприяє зниженню мікробного забруднення, подовженню терміну зберігання та підвищенню антимікробної дії заявленої ліпосомальної композиції. Заявлену композицію одержують наступним чином. До розчину лецитину у диетиловому ефірі або хлороформі додають пропорційні об'єми ектерициду, хлорофіліпту та етакридину лактату, суміш диспергують за допомогою ультразвуку з частотою приблизно 40кГц до утворення суспензії моноламелярних часток-багатошарових ліпосом. Одержану суспензію "протискують" крізь мембранний фільтр з діаметром пор 500 нм. Декілька разів відокремлюють із суспензії стандартні за розміром ліпосоми за допомогою ценрифугації, ресуспензують їх в ектерициді та піддають ліофілізації. Використання ектерициду в якості дисперсійного середовища дає можливість вже на вихідній стадії везикуляції фосфоліпідів спрямовано формувати ліпосоми з антимікробними властивостями. Винахід ілюструється прикладами. Приклад. 1. Антимікробну активність заявленої композиції вивчали у дослідах in vitro методом дифузії в агар, який базується на здатності активних речовин заявленого засобу дифундувати в агаровому середовищі, попередньо засіяному тест-культурою. У досліді були використані штами американської колекції культур Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Bacillus subtilis ATCC 6633 та клінічних штамів Streptococcus mitis 124,Klebsiella pneumoniae 18141. Рівень антимікробної активності визначали за діаметром зони затримки росту культури навколо лунки з досліджуваним засобом. Результати досліду наведені у таблиці 1. 5 83299 6 Таблиця 1 Вивчення антимікробної активності заявленого засобу Діаметр зони затримки росту культури мікроорганізмів, мм. Заявлений засіб. 22,02±0,02 11,08±0,02 12,14±0,02 11,16±0,04 18,44±0,27 22,08±0,02 Культури мікроорганізмів St.aureus ATCC 25923 Str.mitis 124 Escherichia coli ATCC 25922 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Klebsiella pneumoniae 18141 Bacillus subtilis ATCC 6633 Дані таблиці 1 свідчать про наявність вираженої антимікробної активності заявленого засобу у відношенні широкого кола патогенних мікроорганізмів. Таким чином заявлено нову фармацевтичну композицію у ліпосомальній формі на основі лецитину з вмістом хлорофіліпту та етакридину лактату, взятих у заданному співвідношенні, причому композиція одержана з використанням ектерициду в якості дисперсійного середовища. Авторами досліджено синергідну сумісність за антимікробними властивостями між етакридину лактатом та хлорофіліптом. Принципово доведено, що етакридину лактат здатний виявляти суттєвий потенціюючий вплив на антимікробну активність хлорофіліпту. Вперше на прикладі суміщення етакридину лакта Комп’ютерна верстка В. Клюкін ту з хлорофіліптом експериментально обґрунтована доцільність створення комплексних ліпосомальних препаратів на основі дозозалежного суміщення антисептиків синтетичного та природного походження. При цьому як визначаючий показник перспективності створення комплексних антимікробних препаратів на основі технологічного суміщення у рецептурному складі хлорофіліпту з етакридину лактатом, слід враховувати здатність останнього попереджувати формування стійких штамів мікроорганізмів та елімінувати з них Rплазміду. Заявлена фармацевтична композиція може бути одержана в умовах хіміко-фармацевтичних підприємств з використанням стандартного обладнання. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601