Спосіб оцінки тяжкості синдрому гострого дисемінованого внутрішньосудинного зсідання крові

Спосіб оцінки тяжкості і прогнозування синдрому гострого дисемінованого внутрішньосудинного зсідання крові, що включає лабораторні дослідження крові, який відрізняється тим, що проводять дослідження в сироватці/плазмі крові первинних і вторинних продуктів перекисного окислення ліпідів і при зниженні концентрації дієнових кон'югатів нижче 1,65у.о., а малонового діальдегіду нижче 65,0ммоль/мл, оцінюють стан хворого як тяжкий і прогнозують ймовірний несприятливий перебіг. UA (21) a200801048 (22) 29.01.2008 (24) 10.09.2008 (46) 10.09.2008, Бюл.№ 17, 2008 р. (72) КІНАХ МАРІЯ ВАСИЛІВН А, U A, ЧАПЛИК ТОР ВАСИЛЬОВИЧ, UA, ФЕДЧИШИН НАЗАР МАНОВИЧ, U A (73) КІНАХ МАРІЯ ВАСИЛІВН А, U A, ЧАПЛИК ТОР ВАСИЛЬОВИЧ, UA, ФЕДЧИШИН НАЗАР МАНОВИЧ, U A (56) UA 9 427 U, 15.09.2005 SU 1 461 409 A1, 28.02.1989 RU 2 021 617 C1, 15.10.1994 RU 2 033 611 C1, 20.04.1995 RU 2 109 296 C1, 20.04.1998 EP 1 816 211 A1, 08.08.2007 2 (19) 1 3 84116 тної системи, що призводить до прогресування ДВЗ, порушення мікроциркуляції, метаболічних змін, які несумісні з життям. Спосіб здійснюють таким чином. У хворого шляхом венепункції або з катетера забирають 5,0мл крові і визначають у сироватці/плазмі крові первинні і вторинні продукти ПОЛ. Первинні продукти ПОЛ - дієнові кон'югати (ДК) визначають методом Placer, 1970 в модифікації В.Б. Гаврилова і М.І. Мішкорудної [Лабораторное дело. - 1983, №3. -С.33-36]. Реактиви: розчин ЕДТА 90ммоль (3,348г на 100мл води); гептан-ізопропанол 1:2; розчин НСl 0,01 N (РН-2,0); гептан; розчин ЕДТА 0,3ммоль, приготовлений на фізіологічному розчині (0,00558г до 50мл фізрозчину). Хід визначення: до 1 краплі ЕДТА додають 0,2мл плазми і розмішують, або до 2 крапель ЕДТА(приготовленому на фізрозчині) - 3мл крові і центрифугують для отримання плазми. До 0,2мл плазми додають 4мл гептан-ізопропанолу, струшують 30хв і додають 1,0мл НСl і 2,0мл гептану, струшують і відстоюють 30хв, збирають верхній шар і вимірюють протів гептану на спектрофотометрі СФ 46 при довжині хвилі 233нм. Результати екстинції перемножують на 20, виражають в у.о. Норма ДК - 1,7±0,2у.о. Вторинні продукти ПОЛ - малоновий діальдегід (МДА) визначають методом Р.А. Тімірбулатова і Є.І. Селезньова, 1981 [Лабораторное дело. 1984, №4. -С.209-211]. Реактиви: фосфатний буфер РН-7,4 (2,689г Na2HPO4; 0,272г КН2РО4; 0,931 КСl - на 1л води); КМnO4 - 1ммоль розчин (15,8мг на 100мл води); FeSO4 - 10ммоль розчин (304мг на 100мл води, після приготування стоїть 30хв); тіобарбітурова 4 кислота (ТБК) 0,7% (700мг на 100мл води, перед використанням нагрівати); НСl - 1N; трихлороцтова кислота (ТХО)-20%; бутанол. Хід визначення: до 3,0мл фосфатного буфер у додають 0,3мл сироватки/плазми, розмішують і додають 0,5мл КМnО4, стр ушують і через 10хв додають 0,5мл FeSO4, перемішують, через 10хв знову додають 0,5мл FeSO4, перемішують і через 5хв додають 1,0мл ТХО, перемішують, центрифугують 10хв при 1500об/хв. До 4мл супернатанта додають 0,5мл НСl і 1,0мл ТБК, перемішують і ставлять на водяну баню (95-100°С) на 20хв, о холоджують, додають 3,0мл бутанолу, розмішують, центрифугують 15хв при 3000об/хв. С упернатантбутанол, який увібрав колір, обережно знімають і колориметрують на спектрофотометрі СФ 46 при довжині хвилі 532нм (можна на фотоелектроколориметрі при аналогічній довжині хвилі). Результати екстинції перемножують на коефіцієнт, який отримують при калібруванні. Для калібрувального розчину використовують МДА. При нормальній калібрувальній кривій коефіцієнт коливається в межах 260-270. Різниця між плазмою і сироваткою є завжди, тому набираючи групи хворих і контрольну груп у, необхідно враховувати різницю і сироватку порівнювати зі сироваткою, а плазму - з плазмою. Норма МДА для сироватки крові-68,4±6,3. Зниження концентрації продуктів ПОЛ у порівнянні з нормою свідчить про тяжкий стан хворого та ймовірний несприятливий прогноз. Для підтвердження ефективності запропонованого способу були проведені клініко-лабораторні дослідження груп хворих з різною тяжкістю протікання ДВЗсиндрому та контрольної групи донорів. Результати клініко-лабораторних досліджень подані в таблиці. Таблиця Показники первинних і вторинних продуктів перекисного окислення ліпідів у хворих з ДВЗ-синдромом різної тяжкості протікання і прогнозом №п/п 1 2 Показники ДК(у.о) МДА(ммоль/мл Контроль 1,7±0,2 68,4±6,3 ДВЗ І, ІІ, III фази зі сприятливим прогнозом (п=42) 4,6±0,08 Р