Спосіб отримання мезенхімальних стовбурових клітин із пупкового канатику коней

Реферат: Спосіб отримання мезенхімальних стовбурових клітин із пупкового канатику коней включає отримання пупкового канатику коней, звільнення від судин, подрібнення на фрагменти, ферментативна дезагрегація, фільтрування та центрифугування протягом 10 хв. Фрагменти пупкового канатику піддають ферментативній дезагрегації у 0,25 %-ому розчині трипсину за температури 2-4 °C протягом 36 годин з наступним фільтруванням суспензії клітин через 4 шари стерильної марлевої серветки та подальшим її центрифугуванням при 300 g. UA 95207 U (12) UA 95207 U UA 95207 U 5 10 15 20 25 30 35 40 Корисна модель належить до галузей ветеринарної медицини та біотехнології. Відомий аналог (Lange-Consiglio Anna. In vitro studies of horse umbilical cord matrix-derived cells: from characterization to labeling for magnetic resonance imaging / Anna Lange-Consiglio, Bruna Corradetti, Lucia Rutigliano et al. // The open tissue engineering and regenerative medicine journal. 2011. - Vol. 4. - P. 120-133), при якому отриманий пупковий канатик звільняють від судин, подрібнюють на фрагменти, піддають ферментативній дезагрегації у 0,075 %-ому розчині колагенази протягом 16 годин при температурі 37 °C, а отриману при цьому суспензію клітин відбирають, фільтрують через фільтр з діаметром пор 80 мкм та центрифугують протягом 10 хвилин при 250 g. Недоліком даного способу є проведення ферментативної дезагрегації за температури 37 °C та використання як дезагрегуючий фактор колагенази, що призводить до пошкодження стовбурових клітин та здороження процедури їх отримання. В основу корисної моделі поставлено задачу вдосконалення способу отримання мезенхімальних стовбурових клітин із пупкового канатику коней, який може бути використаний для напрацювання біологічного матеріалу з метою подальшого його застосування. Поставлена корисною моделлю задача вирішується способом отримання мезенхімальних стовбурових клітин із пупкового канатику коней, який включає отримання пупкового канатику коней, звільнення від судин, подрібнення на фрагменти, ферментативна дезагрегація, фільтрування та центрифугування протягом 10 хв, згідно з корисною моделлю фрагменти пупкового канатику піддають ферментативній дезагрегації у 0,25 %-ому розчині трипсину за температури 2-4 °C протягом 36 годин з наступним фільтруванням суспензії клітин через 4 шари стерильної марлевої серветки та подальшим її центрифугуванням при 300 g. Спосіб здійснюється наступним чином. Фрагменти пупкового канатика розміром 3-5 мм та 3 3 загальною вагою 15-20 г вносять у стерильну скляну колбу об'ємом 100 см із 50 см 0,25 %-ого розчину трипсину і піддають ферментативній дезагрегації за температури 2-4 °C протягом 36 годин. Після дезагрегації фрагментів пупкового канатика отриману суспензію клітин профільтровують крізь 4 шари стерильної марлевої серветки у стерильні центрифужні пробірки 3 об'ємом 15 см та відцентрифугують при 300 g протягом 10 хв. Осад клітин ресуспендують у відповідній кількості поживного середовища і використовують за призначенням. Технічним рішенням корисної моделі є те, що за допомогою способу отримання мезенхімальних стовбурових клітин із пупкового канатику коней вдається мінімізувати пошкоджуючий вплив дезагрегуючого фактора на стовбурові клітини та здешевити процедуру їх отримання. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб отримання мезенхімальних стовбурових клітин із пупкового канатику коней, який включає отримання пупкового канатику коней, звільнення від судин, подрібнення на фрагменти, ферментативна дезагрегація, фільтрування та центрифугування протягом 10 хв, який відрізняється тим, що фрагменти пупкового канатику піддають ферментативній дезагрегації у 0,25 %-ому розчині трипсину за температури 2-4 °C протягом 36 годин з наступним фільтруванням суспензії клітин через 4 шари стерильної марлевої серветки та подальшим її центрифугуванням при 300 g. Комп’ютерна верстка Л. Ціхановська Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 1