Штам fusarium moniliforme sнeldon-продуцент мікотоксинів фумонізин

Реферат: UA 100655 U UA 100655 U 5 10 15 20 25 30 35 40 Галузь техніки, до якої належить корисна модель: до ветеринарної мікотоксикології і стосується отримання нового штаму мікроміцету, який може використовуватись для одержання мікотоксину фумонізизину, необхідного як стандарт-свідок при мікотоксикологічних дослідженнях кормів, продуктів харчування, культур мікроміцетів з метою діагностики і профілактики фумонізинтоксикозу сільськогосподарських тварин і птиці, а також для науководослідних робіт. Відомі наступні види штамів, які можуть продукувати фумонізини: Fusarium solani і Fusarium verticillioides. Але ці мікроміцети не мають практичного значення для отримання мікотоксину, так як не вивчений їх біосинтез та не встановлена продуктивність. Прототипом корисної моделі є штам Fusarium moniliforme № 6, який використовується нами в процесі виробництва фумонізину В1. Вказаний штам, внаслідок довготривалого використання, втратив свою токсигенність по відношенню до біосинтезу токсину на культурі зерна кукурудзи. Штам Fusarium moniliforme № 3 виділений нами у 2010 році з фузаріозної кукурудзи, що надійшла на мікотоксикологічне дослідження з Інституту захисту рослин НААН. Штам відклонований та селекціонований в лабораторії мікотоксикології Інституту ветеринарної медицини НААН. Штам Fusarium moniliforme № 3 задепонований в колекції мікроорганізмів Інституту ветеринарної медицини НААН та має реєстраційний номер 12. Морфологічні властивості. Колонії пластівцеподібні з білим повітряним міцелієм, часто мають легкий пурпурний відтінок; зворотна сторона має відтінок від безбарвного до пурпурного. Гіфи безбарвні. Конідієносці прості, але розгалужені, середньої довжини. Макроконідії іноді рідкі, від злегка серповидно-вигнутих до майже прямих, з тонкими стінками, з 3-5 септами. Мікроконідії багаточисельні, з 0-1 септою, від яйцевидних до булавовидних. Хламідоспори відсутні. Культуральні властивості. На агарі Чапека 10 добова колонія рівна, круглої форми з нерівними краями, центральна частина колонії плоска, повітряний міцелій добре розвинутий, високий пластівчато-павутинний білий або пурпуровий. Токсиноутворююча активність. При вирощуванні на стерильному вологому зерні кукурудзи при температурі 24-28 °C протягом 14 діб, та при температурі 4-6 °C протягом 30-35 діб утворюються фумонізини в кількості 3-4 г/кг субстрату. Приклад № 1. Штам Fusarium moniliforme № 3 вирощують в пробірці При вирощуванні на стерильному вологому зерні кукурудзи при температурі 24-28 °C протягом 14 діб, при температурі 4-6 °C протягом 30-35 діб (4-5 тижнів) утворюється фумонізин в кількості 1-3 г/кг субстрату. Штам Fusarium moniliforme вирощують в пробірці на скошеному агарі Чапека при температурі 28 °C протягом 14 діб. Отриманою культурою засівають субстрат зерна кукурудзи, попередньо зволожену водопровідною водою (70 мл на 100 г субстрату) та простерилізовану в автоклаві при тиску 1 атм протягом 1 години. Колби з засіяними субстратами витримують в термостаті при 28 °C протягом 14 діб, а потім в холодильнику при 4-6 °C протягом 30-35 діб, після чого визначають вміст токсину фумонізину. Результати досліджень приведені в табл. 1 Таблиця 1 Динаміка продукування фумонізину шт. Fusarium moniliforme Період росту 30 31 32 33 34 35 45 Вміст токсину фумонізину (мг/кг) 0,7±0,20 0,9±0,30 1,2±0,21 1,9±0,32 2,3±0,15 3,0±0,26 Токсиноутворююча здатність штамів Fusarium moniliforme № 3 і № 6, які використовуються в даний час для виробництва фумонізину, представлено в табл. 2 культури обох штамів на зволоженому стерильному зерні інкубують протягом 14 діб при 28 °C і потім витримують 30-35 діб в холодильнику при 4-6 °C. 1 UA 100655 U Таблиця 2 Токсиноутворююча активність штамів № 3 і № 6 Тривалість вирощування при 46 °C, дні 30 35 5 10 15 20 25 30 Вміст фумонізину (мг/кг) в культурі №6 №3 кукурудза кукурудза 1,7 2,6 2,1 3,1 За даними таблиці 2 штам № 3 відрізняється від штаму № 6 більшою токсиноутворюючою здатністю. Джерела інформації: 1. Ветеринарные препараты / Под ред. А.Д. Третьякова. - Москва: Агропромиздат, 1988. – 319 с. 2. Инструкция по проведению ветеринарно-токсикологических, медико-биологических исследований стимуляторов роста сельскохозяйственных животных и гигиенической оценки продуктов животноводства. - Москва:, 1985. - 17 с. 3. Лабораторные исследования в ветеринарии: биохимические и микологические / Под ред. Б.И. Антонова. - Москва: Агропромиздат, 1991. - 287 с. 4. Порядок і періодичність контролю комбікормів і комбікормової сировини за показниками безпеки: метод, рекомендації. - Київ:, 1997. - 14 с. 5. Методичні вказівки по санітарно-мікологічній оцінці і поліпшенню якості кормів. - Київ:, 1998. - 107 с. 6. Методы исследования кормови кормовых добавок: метод, рекомендации. - Львов:, 1985. - 54 с. 7. Харченко С.М. Ветеринарно-санітарна експертиза кормів / С.М. Харченко, М.К. Щербанюк. - Київ: Урожай, 1985. - 112 с. 8. Определение уровня микотоксинов в рамках исследовательской программы [Електронный ресурс]. Режим доступа: http://global.alltech.com/sites/default/files/documents. Название с экрана. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Штам Fusarium moniliforme Sheldon-продуцент мікотоксинів фумонізинів, який виділений, відклонований, селекціонований і охарактеризований в лабораторії мікотоксикології ІВМ НААН, призначений для виробництва стандарту мікотоксину фумонізину та має високу здатність до токсиноутворення. Комп’ютерна верстка І. Мироненко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут інтелектуальної власності", вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2