Спосіб диференційованої оцінки ступеня ушкодження гепатоцитів при хронічному отруєнні алкоголем

Спосіб диференційованої оцінки ступеня пошкодження гепатоцитів при хронічному отруєнні алкоголем, що включає проведення морфологічних характеристик гепатоцитів і виявлення жирової дистрофії, який відрізняється тим, що виявляють розміри ліпідних крапель в гепатоцитах, стан ядра і цитоплазми, їх контури і забарвлення, і при виявленні наявності ледве помітної дрібнокрапельної жирової дистрофії не більше ніж в 18% гепатоцитів, причому гепатоцити мають чіткі межі і містять ядра нормального забарвлення й величини з чіткими контурами - діагностують мінімальний ступінь пошкодження 0,5 бала, при наявності дрібнокрапельної жирової дистрофії не більше ніж в 35% гепатоцитів, які мають чіткі межі і містять ядра нормального забарвлення і величини з чіткими контурами - визначають слабо виражений ступінь пошкодження - 1,0 бала, помірно виражений ступінь пошкодження - 1,5 бала визначають при наявності дрібнокрапельної жирової дистрофії не більше ніж в 50% гепатоцитів, причому гепатоцити мають чіткі межі і містять ядра нормального забарвлення і величини з чіткими контурами, значний ступінь пошкодження - 2,0 бала виявляють при наявності жирової дистрофії не більше ніж в 70% гепатоцитів, жирова дистрофія представлена переважно дрібнокрапельною і частково великокрапельною формами або обома формами рівною мірою, причому гепатоцити зберігають чіткі межі і містять ядра нормального забарвлення і величини з чіткими контурами, виражений ступінь пошкодження - 2,5 бала характеризується наявністю жирово)' дистрофії не більше ніж в 85% гепатоцитів з переважанням великокрапельної форми, причому гепатоцити збільшені в розмірах, мають нерівні межі, ядра гепатоцитів мають нечіткі контури, і можуть містити жирові включення, у частині клітин ядра забарвлюються слабо, різко виражений ступінь пошкодження - 3,0 бала характеризується наявністю поширеної великокрапельної жирової дистрофії із залученням до 100% гепатоцитів, причому гепатоцити збільшені в розмірах, мають нерівні межі, слабо забарвлюються, ядра мають нерівні і нечіткі контури і можуть містити жирові краплі різної величини, зустрічаються клітини у вигляді світлих крупних куль, що складаються з жирових крапель зі зморщеними ядрами. Корисна модель відноситься до медицини і може бути використана для морфологічної оцінки ступеню ушкодження гепатоцитів при хронічному отруєнні алкоголем. Відомим є спосіб визначення ступеня променевого ушкодження пухлини при раку молочної залози. [А.С. №1686932]. Суть способу полягає у прогнозуванні перебігу раку молочної залози під впливом променевої терапії в залежності від ушкодження пухлин на клітинному, тканинному рівні, та з урахуванням стромальних імунних реакцій. Спосіб дозволяє визначати ступень ушкодження дження гепатоцитів і при хронічному отруєнні алкоголем. В зазначеному способі ступень дистрофії є напівкількісною і самостійно не може відображати ступень пошкодження клітин. Діапазон оцінки дистрофічних змін коливається в межах трьохбальної системи, що потребує визначення і інших показників пошкодження клітин. Найбільш близьким та обраним за прототип є спосіб визначення механізмів пошкодження печінки у самок щурів при хронічному отруєнні алкоголем. [Amin A. Nanji, Kalle Jokelainen, Maryam Fotouhinia at all / Increased severity of alcoholic liver со СО о O) 11013 injury in female rats: role of oxidative stress, endotoxin, and chemokines. Am. J. Phisiol. Gastrointest. Liver Phisiol. 281: G1348-G1356, 2002]. Спосіб дозволяє визначити чотири ступені пошкоджень гепатоцитів, залежно від кількості пошкоджених клітин. Важкість пошкодження печінки автори оцінюють кількісно, плюсами: 1+ наявності жирової дистрофії менш ніж в 25% клітин 2+ наявності жирової дистрофії в 25-50% клітин 3+ наявності жирової дистрофії в 51-75% клітин 4+ наявності жирової дистрофії більш ніж в 75% клітин. Недоліком цього способу є відсутність характеристики гепатоцитів в яких виявлялася жирова дистрофія. Відомо що крупнокрапельна жирова дистрофія більш ушкоджує клітини і можливості репарації гепатоцитів з крупнокрапельною жировою дистрофією менше ніж у гепатоцитів з мілкокрапельною жировою дистрофією. Не дана характеристика гепатоцитів: стан їх ядра, цитоплазми і їх меж. Для детальнішої оцінки ступеня пошкодження гепатоцитів мають значення розміри ядра і ступінь їх забарвлення. В основу корисної моделі поставлена задача удосконалення способу оцінки ушкодження гепатоцитів при хронічному отруєнні алкоголем, у якому шляхом визначення додаткових показників стану гепатоцитів, які є найбільш значущими й інформативними для патології печінки, досягається можливість визначення найбільш оптимального та об'єктивного ступеня оцінки її алкогольного ушкодження. Поставлена задача вирішується в способі диференційованої оцінки ступеня пошкодження гепатоцитів при хронічному отруєнні алкоголем шляхом морфологічної характеристики гепатоцитів і виявленні жирової дистрофії, згідно з корисною моделлю, виявляють розміри ліпідних крапель в гепатоцитах, стан ядра і цитоплазми, їх контури і забарвлення, і при виявленні наявності ледве помітної мілкокрапельної жирової дистрофії не більше ніж в 18% гепатоцитів, при цьому гепатоцити мають чіткі межі і містять ядра нормального забарвлення і величини з чіткими контурами діагностують мінімальний ступень пошкодження 0,5 балу, при наявності мілкокрапельної жирової дистрофії не більше ніж в 35% гепатоцитів. які мають чіткі межі і містять ядра нормального забарвлення і величини з чіткими контурами визначають слабо виражений ступінь пошкодження 1,0 балу, помірно виражений ступінь пошкодження - 1,5 балу визначають при наявності мілкокрапельної жирової дистрофії не більше ніж в 50% гепатоцитів, при цьому гепатоцити мають чіткі межі і містять ядра нормального забарвлення і величини з чіткими контурами, значний ступінь пошкодження - 2,0 балу характеризується наявністю жирової дистрофії не більше ніж в 70% гепатоцитів, жирова дистрофія представлена переважно мілкокрапельною і частково крупнокрапельною формами або обома формами в рівній мірі, при цьому гепатоцити зберігають чіткі межі і містять ядра нормального забарвлення і величини з чіткими контурами, виражений ступінь пошкодження - 2,5 балу визначають при наявності жирової дистрофії не більше ніж в 85% гепатоцитів з переважанням крупнокрапельної форми, при цьому гепатоцити збільшені в розмірах, мають нерівні межі, ядра гепатоцитів мають нечіткі контури, і можуть містити жирові включення, у частині клітин ядра забарвлюються слабо, різко виражений ступінь пошкодження - 3,0 балу характеризується наявністю поширеної крупнокрапельної жирової дистрофії із залученням до 100% гепатоцитів, при цьому гепатоцити збільшені в розмірах, мають нерівні межі, слабо забарвлюються, ядра мають нерівні і нечіткі контури, і можуть містити жирові краплі різної величини, зустрічаються клітини у вигляді світлих крупних куль, що складаються з жирових крапель із зморщеними ядрами. Проліферуючі гепатоцити мають укрупнені ядра і яскравіше забарвлення у зв'язку із значнішим змістом ДНК і РНК. Атрофічні гепатоцити звичайно зменшуються в розмірах, мають нечіткі контури ядра і цитоплазми і слабо сприймають забарвлення. Крім того, градація пошкодження гепатоцитів по шести ступенях дає можливість детальніше оцінити тяжкість пошкодження печінки і можливість її регенерації. Здійснення способу, що заявляється пояснюється наступними прикладами. Приклад 1 Тварина 1, входила до експериментальної групи тварин, які протягом декількох місяців щодня одержували високу дозу алкоголю - 11 тижнів по 17г на 1 кг ваги. У препараті має місце практично тотальна жирова дистрофія (95% гепатоцитів), в основному за рахунок крупнокрапельної форми. Гепатоцити збільшені в розмірах, мають нерівні межі, слабо забарвлюються. Ядра багатьох гепатоцитів мають нерівні, нечіткі контури містять дрібні жирові краплі. У цитоплазмі деяких клітин візуалізуються крупні жирові краплі, що відтісняють зморщене ядро на периферію. Використовуючи запропонований спосіб морфологічної оцінки ступеня пошкодження гепатоцитів, оцінюють даний випадок в 3,0 бала, що відповідає різко вираженому ступеню пошкодження. Приклад 2 У препараті має місце жирова дистрофія 80% гепатоцитів, з переважанням крупнокрапельної форми. Гепатоцити збільшені в розмірах, мають нерівні межі. Ядра гепатоцитів мають нечіткі контури, місцями містять жирові включення. У частині клітин ядра забарвлюються слабо. Використовуючи запропонований спосіб морфологічної оцінки ступеня пошкодження гепатоцитів, оцінюємо даний випадок в 2,5 бала, що відповідає вираженому ступеню пошкодження. Приклад З У препараті має місце змішана жирова дистрофія 60% гепатоцитів, з переважанням мілкокрапельної форми. Гепатоцити мають чіткі межі і містять ядра нормального забарвлення і величини з чіткими контурами. 11013 Використовуючи запропонований спосіб морфологічної оцінки ступеня пошкодження гепатоцитів, оцінюємо даний випадок в 2,0 бала, що відповідає значному ступеню пошкодження Приклад 4 У препараті має місце жирова дистрофія 45% гепатоцитів Жирова дистрофія представлена мілкокрапельною формою Гепатоцити мають ЧІТКІ межі і містять ядра нормального забарвлення і величини з чіткими контурами Використовуючи запропонований спосіб морфологічної оцінки ступеня пошкодження гепатоцитів, оцінюємо даний випадок в 1,5 балу, що відповідає помірно вираженому ступеню пошкодження Приклад 5 У препараті наявна мілкокрапельна жирова дистрофія 30% гепатоцитів Гепатоцити мають ЧІТКІ межі і містять ядра нормального забарвлення і величини з чіткими контурами Використовуючи запропонований спосіб морфологічної оцінки ступеня пошкодження гепатоцитів, оцінюємо даний випадок в 1,0 балу, що відповідає слабо вираженому ступеню пошкодження Комп'ютерна верстка Д Шеверун Приклад 6 Тварина 2, входила до експериментальної групи тварин, які протягом нетривалого часу щодня одержували низьку дозу алкоголю - 2 тижні по 2г на 1 кг ваги У препараті спостерігається практично нормальна морфологічна картина печінки, про наявність патологічного процесу свідчить тільки ледве помітна мілкокрапельна жирова дистрофія по периферії часточки КІЛЬКІСТЬ гепатоцитів в стані жирової дистрофії - 10% При цьому гепатоцити мають ЧІТКІ межі і містять ядра нормального забарвлення і величини з чіткими контурами Використовуючи запропонований спосіб морфологічної оцінки ступеня пошкодження гепатоцитів, оцінюємо даний випадок в 0,5 балу, що відповідає мінімальному ступеню пошкодження Таким чином запропонований спосіб дає можливість обєктивно оцінити пошкодження печінки, виділити групу ризику з важким ступенем ураження та забезпечити своєчасну медикаментозну профілактику алкогольного цирозу печінки Підписне Тираж 26 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул Урицького 45, м Київ, МСП, 03680, Україна ДП "Український інститут промислової власності", вул Глазунова, 1, м Київ - 42, 01601