Спосіб визначення ерукової кислоти в шроті соняшниковому методом газової хроматографії

Реферат: Спосіб визначення ерукової кислоти, при якому для дослідження беруть 0,5 кг підготовленого (гомогенізованого) зразку, екстрагують н-гексаном з подальшим випаровуванням до сухого 3 залишку, розведенням 1 мл. Далі відбирають 60 мг екстракту, з точністю 0,1 мг додають 4 см нгексану та 200 мкл метилового розчину гідроксиду калію, струшують 30 с, додають 1 г сірчанокислого моногідрату, інтенсивно струшують для гідролізу гідроксиду калію з подальшим відбиранням верхнього шару та розведенням н-гексаном і хроматографуванням з використанням полум'яно-іонізаційного детектора. UA 113064 U (12) UA 113064 U UA 113064 U 5 10 15 Корисна модель належить до ветеринарної медицини, зокрема до біохімії та токсикології, і може бути використана в роботі науково-виробничих лабораторій. Спосіб не має зареєстрованих аналогів в Україні. Задачею корисної моделі є розробка універсального та швидкого способу визначення ерукової кислоти у продукції рослинного походження, суттєве скорочення часу на пробопідготовку, зменшення витрат реактивів, посуду, зниження собівартості процесу. Спосіб згідно з корисною моделлю включає наступні дії: для дослідження беруть 0,5 кг твердого підготовленого (гомогенізованого) зразку, екстрагують н-гексаном з подальшим випаровуванням до сухого залишку, розведенням 1 мл н-гексану, потім проводять відбирання 3 60 мг екстракту, з точністю 0,1 мг додають 4 см н-гексану та 200 мкл метилового розчину гідроксиду калію, струшують 30 с, додають 1 г сірчанокислого моногідрату, інтенсивно струшують для гідролізу гідроксиду калію з подальшим відбиранням верхнього шару та розведенням н-гексаном і хроматографуванням з використанням полум'яно-іонізаційного детектора. Конфігурація газового хроматографа Varian CP 3800: генератор водню, автосамплер, інжектор, термостат колонок, полум'яно-іонізаційний детектор готують згідно з інструкцією з експлуатації приладу та задають робочі параметри. Таблиця 1 Конфігурація та режим роботи Конфігурація Газовий хроматограф Колонка Температура інжектора Температура колонки Температура детектора Об'єм інжекції Режим введення проби Потік Градієнт (рухома фаза) Режим роботи Varian CP 3800 Agilent J&W GC Coloumns Select Fame 100m x 0,25 mm x 0,25μm Front 1177 Split/Splitless 260 °C програмована 260 °C 1 мкл автоматичний N2-29 ml/min, H2-30 ml/min, Air-300 ml/min Азот з чистотою 99,9999 % Таблиця 2 Програмований температурний режим Початок°С/хв. Початкова 5 50 50 Температура, °C 140 240 200 100 Час/хв. 5 12 1 1 Загальний час, хв. 5,00 37,00 38,00 41,80 20 Таблиця 3 Час виходу, нормальний діапазон кислоти для шроту соняшникового та кількість жирної кислоти в сертифікованому референтному матеріалі Назва кислоти Ерукова кислота 25 Час виходу, хв. 27,50 Норма для шротів, % не доп. Кількість, % 0,05 Час виходу ерукової кислоти залежить від швидкості потоку, типу колонки температурного режиму. Умови виконання вимірювань підлягають перевірці і, при потребі, корегуванню: - при переході на інший хроматограф; - при заміні колонок; - після ремонту вузлів хроматографа, що впливають на чутливість детектора. Хроматограф градуюють по градуювальних розчинах ерукової кислоти. 1 та UA 113064 U Таблиця 4 Оцінка придатності методу Назва кислоти Збіжність, Sr, % Ерукова кислота 5 Кількість, % 0,05 10,3 Відтворюваність, SR, % 10,7 Невизначеність вимірювань, U(p) 0,01 Дані, наведені в таблиці 4 та 5, свідчать про те, що розроблений спосіб придатний для всіх видів шротів та макух, спосіб є досить чутливим, щоб детектувати дану жирну кислоту. Спосіб дозволяє за досить короткий проміжок часу дослідити зразок та одночасно виявити жирні кислоти в рослинних продуктах, що значно економить час, реактиви. Таблиця 5 Участь у міжлабораторних порівняльних дослідженнях (програма Вет-Тест) № програми 3/2015 10 15 20 25 Найменування матеріалу Шрот соняшниковий Показник Приписане значення, % Результат дослідження, % Z-індекс Ерукова кислота 0,053 0,05 -0,6 Результати, отримані під час дослідження референтного матеріалу, є вірогідними і знаходяться в межах приписаного значення. Таким чином, відпрацьована методика виявлення ерукової кислоти в рослинній продукції не поступається методикам, які використовуються в лабораторіях Європейської спільноти. Джерела інформації: 1. Commission Decision (2002/657/EC) of 12 August 2002 implementing Council Directive 96/23/EC concerning the performance of analytical methods and interpretation of results, O.J. Europ. Comm. L 221, 8-36. 2. ДСТУ 4638:2006 Шроти соняшникові. Технічні умови. 3. Настанова з оцінювання невизначеності вимірювання результатів кількісних випробувань. Технічний звіт EUROLAB №1/2006// Пер. з англ. Київ, Евролаб-Україна, 2008. 4. COMMISSION REGULATION (EC) No 2074/2005 °F 5 December 2005 laying down implementing measures for certain products under Regulation (EC) No 853/2004 °F the European Parliament and of the Council and for the organisation of official controls under Regulation (EC) No 854/2004 °F the European Parliament and of the Council and Regulation (EC) No 882/2004 °F the European Parliament and of the Council, derogating from Regulation (EC) No 852/2004 °F the European Parliament and of the Council and amending Regulations (EC) No 853/2004 and (EC) No 854/2004. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 30 35 Спосіб визначення ерукової кислоти, при якому для дослідження беруть 0,5 кг підготовленого (гомогенізованого) зразка, екстрагують н-гексаном з подальшим випаровуванням до сухого 3 залишку, розведенням 1 мл, відбирають 60 мг екстракту, з точністю 0,1 мг додають 4 см н-гексану та 200 мкл метилового розчину гідроксиду калію, струшують 30 с, додають 1 г сірчанокислого моногідрату, інтенсивно струшують для гідролізу гідроксиду калію з подальшим відбиранням верхнього шару та розведенням н-гексаном і хроматографуванням з використанням полум'яно-іонізаційного детектора. Комп’ютерна верстка О. Гергіль Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2