Спосіб визначення вітаміну к1 (ниж.інд.) в травяному борошні

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИТАМИНА К. В ТРАВЯНОЙ МУКЕ путем экстракции его из анализируемой пробы бензолом, содержащим н-бутанол, с последующим тонкослойным хроматографироваиием экстракта в системе растворителей гексан-хлороформ, удалением целевого компонента с пластинки и э к стракции его этиловым спиртом с последующим фотометрированием экстракта, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что. с целью сокращения длительности определения и повышения чувствительности способа^ экстракт перед фотометрированием обрабатывают 0,1-0,2%-ным раствором боргидрида натрия в этаноле. а е ел 90 1 175874 2 Изобретение относится к химичесрителей гексан-хлороформ, взятых в ким методам определения витамина К j объемном соотношении 50:50, После то(филлохинона) с -применением хроматого, как фронт подвижной Лазы подниграфических методов очистки, в частмается на высоту 15 см, пластинку ности тонкослойной хроматографии, и 5 вынимают из камеры, просушивают и может быть использовано в различных быстро определяют положение витамианалитических лабораториях при опрена К ( по свидетелю под ультрафиоледелении содержания витамина Kv в кортовой лампой (проявляется в виде мах и других продуктах растительного темной полосы), происхождения и кормовых препаратах. Т 0 Пятно силикагеля с адсорбирован- ., Цель изобретения - сокращение у— ным на нем витамином К( соскаблидлительности определения и повышевают с пластинки, переносят в проние чувствительности способа. бирку с притертой пробкой, заливают Изобретение иллюстрируется сле*3 мл 96%-ного этилового спирта и стадующими примерами. 15 вят в темное место на 30 мин. ЗаПример 1, Берут 500 мг травяной тем отфильтровывают раствор через муки, вносят в пробирку с притертой бумажный фильтр (красная полоса), пробкой, заливают 10 мл экстрагирусмоченный этиловым спиртом, пробирющей смеси - бензол с 2% (объем) ку ополаскивают 1 мл этанола, котоп-бутанвла к 10 мл бензола добав20 рый' переносят на этот же фильтр. ляют 0,2 мл н-бутанола и хорошо переДалее к элгоату добавляют 0,1 мл мешивают. Пробирку ставят в темное 0,1%-ного раствора боргидрида натрия место на 3 ч. Заполняют колонку див этаноле. Содержимое пробирки быаметром 10 см слоем силикагеля стро перемешивают, переносят в кюве(2 см ) и сверху него насыпают 1 см 25 ту для измерений и через 20 с после безводного сульфата натрия, Содервнесения боргидрида натрия проводят жимое пробирки пропускают через копервое фотометрирование элюата на лонку, а пробирку ополаскивают пятью длине волны 243 им. Затем после доспорциями по 5 мл экстрагирующей сметижения максимума экстинции (через си, которые также пропускают через 30 3-4 мин) проводят повторное фотометколонку» Фильтрат выпаривают на рориров ание и по разнице показаний торном испарителе при 80 С и сухой между начальным и конечным измереостаток растворяют в 0,2 мл бензола. ниями находят прирост экстинции и определяют количество витамина К і Затем с помощью микропипетки пе_ _ .____. реносят полученный раствор (0,2 м л ) 35 по калибровочной кривой. на пластинку "Силуфол", размером 15x15 см, и по обе стороны образоП р и м е р 2, Осуществляют опревавшейся полости наносят свидетельделение витамина К (г аналогично при-раствор - 3 мкг филлохинона в 0,1 меру 1 с раствором боргидрида натмл хлороформа, 40 рия различной концентрации с целью установления оптимальных количеств Развитие хроматограммы проводят используемого восстановителя. Резульв камере (180x70x170 см), насыщенной таты представлены в табл. 1. в течение 30 мин парами смеси раствоТ а б л и ц а Определение оптимальной концентрации боргидрида натрия для востановления (Ьиллохиноиа 1 Используемая концентрация боргидрида натрия в этаноле, % 0,02 Определено витамина К. % 81,5 1 0,05 0,1 89,3 I 100 *) В каждом варианте добавляли по 0,1 раствора. 0,2 0,3 | 0,5' J 1,0 100 J . 1 98,1 96,0 96,2 1175874 4 образец люцерновой муки. РезультаП р и м е р 3. Осуществляют опты экспериментов представлены в ределение витамина К. аналогично табч.2. примеру I , анализируя усредненный Т а б л и ц а 2 Способ ]Кол-во вита',мина К, в 1 ' г травяной 'муки, мкг t {Кол-во J Среднее ] Чувст{опре- j время витель анализа, кость 'делеч мкг |ний {Надейно Коп-во витавитамимина К / в 1 на К ( , г травяной муки + 5 мкг стандарта, мкг п редлагаемый 20,44 + 0,02 J 3-35 25,49 + 0,02 j 8,3 5-30 24,91 + 0,02 j 48,2 і Известный 20,37 + 0,02 1! Данные т а б л . 1 с в и д е т е л ь с т в у ю т 20 о том, ч т о оптимальной к о н ц е н т р а ц и е й р а с т в о р а боргидрида н а т р и я в э т а н о л е я в л я е т с я 0 , 1 - 0 , 2 % . ттрИ добавлении низких концентраций ( 0 f 0 2 - 0 , 0 5 ^ ) прирост окстинций идет очень медлен- 25 Ї по и ресь находящийся в растворе витамин К, неопределяется. В случае добавления к исследуемому элюату витамина Kj избытка боргидрида натрия элюат мутнеет, что делает невозможным фотометрирование, Составитель С, Хованская Редактор М. Бандура Техред Т.Фанта Корректор Л.Бескид Заказ 5304/26 ' Тираж 897 Подписное БНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская н а б . , д . 4/5 Филиал ппл "Патент 1 1 , г , Ужгород, ул. Проектная, 4