Спосіб отримання речовини з жовчогінною, гепатозахисною та антиоксидантною активністю

УКРАЇНА (19) UA (11)27442 (із, С2 (51) 6А61К35/78 опие МІНІСТЕРСТВО ОСВІТИ І НАУКИ УКРАЇНИ ДЕРЖАВНИЙ ДЕПАРТАМЕНТ ІНТЕЛ ЕКТУАЛЬНОЇ ВЛАСНОСТІ ДО ПАТЕНТУ НА ВИНАХІД (54, СПОСІБ ОТРИМАННЯ РЕЧОВИНИ З ЖОВЧОГІННОЮ, ГЄПАТОЗАХИСНОЮ ТА АНТИОКСИДАНТНОЮ АКТИВНІСТЮ (21)94042893 (22) 12 04 1994 (24) 15.09.2000 (46) 15.09.2000, Бюл. № 4, 2000 р . ( 72) Гвоздікова Тетяна Борисівна, Гвоздікова Наталія Олександрівна ( 73) Гвоздікова Тетяна Борисівна, Гвоздікова Наталія Олександрівна ( 56) Справочник. Лекарственные средства, примен яемые в медици нск ой пр ак тике в СС СР / По д ред. К люев а М.А. - М.: Медицин а. - 1989. - 509 с. ( 57) 1. Способ получени я веществ а с ж елчегон ной , гепато защи тной и антиоксидан тной актив ностью, включающий экстр акцию р асти тельного сырья горячей водой 60-70°С, отстаивание и суш Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается лекарственных пре паратов растительного происхож дения и способов их получения. Известен желчегонный препарат силибор и способ его получения из семян расторопши пятни-, стой. Препарат такж е обладает гепато защи тным действием. Силибор получают экстракцией семян расторопши пятнистой 80% этанолом, упариванием и растворением осадка 50%-ным этанолом. Затем обрабатывают четыреххлористым углеродом и смесью хлороформ - этанол в соотношении 2:1, упаривают, сушат, остаток обрабатывают смесью хлороформ : этанол 21, еще раз упаривают, сушат и получают целевой продукт с выходо м 4,5-5,0% (в пересчете на в оздушно-сухое сырье) [Справочник лекарственные средства, применяемые в медицинской пр актике в СССР / По д ред. Клюева М.А. - М.: Медицина, 1989, с. 509] . Однако данный препарат обладает относительно узким спектром биологического действия, при его получении используются токсические ве щества, что не исключает присутствия их следов в препарате, способ не обеспечивает выхода целе вого продукта выше 4,5-5,0% в пересчете на воздушно -сухое сыр ье [ Спр аво чник лекар ствен ные средства, применяемые в медицинской практике в СССР / Под ред. К люева М.А. - М.: Медицина, 1989, с. 509]. ку, отли чающийся тем, что в качестве расти тельного сырья используют шрот эфиромасличного производства лепестков розы эфиром а сличи ой, которые сушат, измельчают до размера 3-5 мм, экстракцию проводят при соотношении сырье экстрагент 1:5 в течение 3-4-х часов, отстаивают не менее 10 часов и фильтруют, затем ж идкую фракцию подвергают лиофилизации. 2. Спосо б по п . 1, о тли чающийся тем, что в качестве растительного сыр ья используют шрот эфиромасличного производства лепестков розы красной - Rosa gallica L. 3 Способ по п. 1, отличающийся тем, что лио филизацию проводят методом распылительной или сублимационной сушки. Признаками аналога, совпадающими с признаками заявляемого изобретения являются: - желчегонное действие; - гепатозащитное действие; - экстракция; - сушка. Известен такж е ж елчегонн ый преп арат фламин и способ его получения из цветков бессмертника песчаного. Цветки бессмертника песчаного экстрагируют горячей водой (60-70 град С), упаривают, декантируют раствор с осадка, разбавляют водой, экстрагируют смесью этапацетатспирт (9:1) . Органические растворители удаляют, остаток сушат и получают целевой продукт с выходом 4,0- 5,0% (в пересче те н а во здушно- сухое сырье) [Справочник лекарственные средства, применяемые в медицинской практике в СССР / Под ред. К люев а М .А . - М.: Медицин а, 1989, с. 509]. Однако указанный препарат обладает узким спектром биологического действия, при его получении также используются токсические вещества, что не исключает присутствие их следов в конечном продукте, способ получения фламина трудоемок, не обеспечиваэт достаточно высокого выхода целевого продукта. Признаками прототип а, совпадающими с существенными признаками заявляемого изобретения, являются: м О СМ атного буфера (0,05 моля, рН 7,4) на ультразвуковом диспергаторе УЗДН-2Т (СССР) в течение 10 мин при частоте 25 кГц, затем к 0,5 мл полученной дисперсии липидов добавляли 0,05 мл раствора исследуемого препарата известной концентрации так, что соотношение в среде инкубации липиды-вещество составило 500:1. Смесь доводили фосфатным буфером до конечного объема 4,5 мл и стимулировали ПОЛ 0,5 мл 0,14% водным раствором FeSO4 • 10 НгО. Конечную смесь инкубируют при 37 град С и в динамике (через 15, 30, 45 мин) отбирают аликвоты по 0,5 мл для определения липоперекисей. Показателем антиоксидантной активности являлся малоновый диальдегид (МДА). Результаты опытов обрабатывали статистически с помощью критерия t Стьюдента (таблица 3). Обозначения, использованные в таблицах: п - количество опытов; М - среднее значение; m - ошибка среднего значения; р - достоверность отличия. Из таблицы 3 следует, что у изучаемых препаратов ингибирующая активность в отношении ПОЛ выше, чем витамина Е, что дает возможность создания на их основе новых высокоэффективных натуральныхпродуктов с антиоксидантным действием. Гепатозащитную активность препаратов из розы эфиромасличнсй определяли по выживаемости животных при введений им четыреххлористсто углерода в смертельной дозе (защитный индекс) и активности индикаторного фермента, характеризующего цитолитический процесс аланинаминотрансферазы (АЛТ) сыворотки крови у белых крыс-самцов массой 200.0 ± 10,0 г. В каждую серию брали 6-8 животных (таблица 4). Препарат из вещества по заявленному способу обладает максимальной гепатозащитной I 27442 активностью (52,3%), однако отличие от сиям бора статистически недостоверно (р>0,05). Исследование холеретического действия препаратов из шрота лепестков розы эфиромасличной по степени влияния их на скорость желче отделения у подопытных ж ивотных проводили по М.Д . Литвинчуку и З.И. Новосилец [Соврем енные м етоды в биохимии /Турков М.И., Климова Г.И., Да выдо ва Г А, и др . - М.: 1977 . - С. 3 91, Fe rnander N.. Valenzuela A., Fernander Vn. //Lipids . 1982.-Vol. 17. Na 5-P. 393-395.]. Изучение ж елчеотделения проводили в острых опытах на крысах м ассой 210,0 ± 10,0 г под этаминаловым наркозом (100 м г на 100 г массы тела). Об интенсивности желчеотделения судили по заполнению желчью полиэтиленового катетера диаметром 2 мм в течение 3 ч наблюдения (в см заполнения капилляра). За 30 мин до опыта различным группам крыс вводили зондом в ж елудок предлагаем ый препарат в дозе 0,25 м г на 100 гр м ассы тела. В этом ж е реж им е вводили водный раствор препарата с холеретическим действием флам ина в дозе 2,5 м г/кг. Контролем служ или опыты с введением животным дистиллированной воды и 40% спирта, на которых готовились иссле дуем ые препараты, и в том ж е количестве . Результаты исследований приведены в таб лице 5. Вещество по заявляем ом у способу достоверно превосходит флам ин по ж елчеотделитель ным свойствам (р