Спосіб оцінки захисної функції кальцію в умовах свинцевої інтоксикації

1. Спосіб оцінки захисної функції кальцію в умовах свинцевої інтоксикації, що включає формування груп досліджуваних тварин, їх годівлю з домішуванням до раціону порошку яєчної шкаралупи, моделювання інтоксикації за допомогою свинцевого запалу, після адаптації тварин до раціону - відбір біологічного аналізату, його дослідження та оцінку, який відрізняється тим, що групи досліджуваних тварин формують з числа дорослих і зростаючих особин, як біологічний аналізат застосовують проби 3 31478 4 досліджуваних тварин формують з числа дорослих оцінки захисної функції кальцію розраховують і зростаючих особин, як біологічний аналізат співвідношення показників активності застосовують проби периферичної крові, а при їх адаптаційних систем, ферментативної ланки дослідженні на 10 добу інтоксикації контролюють антиоксидантної системи до кількості загального концентрації еритроцитів і гемоглобіну та кальцію, концентрації лужної фосфатази та встановлюють прийнятну захисну функцію дельта-амінолевулінової кислоти. Захисну дію кальцію, якщо концентрація еритроцитів і кальцію оцінюють шляхом зіставлення розрахункових співвідношень з нормалями та гемоглобіну в пробах сягає 4,5±0,6×1012 й встановлюють зниження адаптаційної 140,6±0,5г/л у зростаючих або 5,6±0,1×1012 й спроможності організму у відповідь на дефіцит 149,6±0,9г/л у дорослих особин, відповідно, або кальцію в раціоні [5]. відсутність захисної дії, якщо концентрація При апробації способу, у тварин, які вживали еритроцитів і гемоглобіну в пробах становить фізіологічно збалансований казеїновий раціон, 3,1±0,3×1012 й 120,0±0,8г/л у зростаючих або спостерігали вірогідний зріст концентрації 2,6±0,2×1012 й 119,3±4,2г/л у дорослих особин, глутатіону в печінці та зниження активності відповідно; за умови, що запальна доза свинцю глутатіонредуктази, що інформувало про для інтоксикації складає 10мг/кг маси тіла тварин. декомпенсацію захисних механізмів і порушення Причинно-наслідковий зв’язок сукупності синтезу білка в печінці. Акумулювання свинцю чи відмітних ознак з вищезазначеним технічним відсутність захисної дії кальцію у тварин цієї групи результатом зв’язується з наступним. позначалося на зниженні останнього в сироватці Формування груп дорослих і зростаючих крові, збільшенні концентрації лужної фосфатази тварин за віковим принципом, на відміну від їх та дельта-амінолевулінової кислоти, внаслідок формування за кількістю утримування кальцію в вимивання кальцію з кісток скелета. раціоні за найближчим аналогом, дозволяє в Недоліком найближчого аналогу є складність і умовах свинцевої інтоксикації з’ясувати недостатня економічність. З однієї сторони, це практичний аспект, щодо застосування харчового зумовлене надмірною трудомісткістю процесу, кальцію для попередження розвитку захворювань пов’язаною з необхідністю визначення крові і кровотворних органів у дорослих і онтогенез концентрацій цитохрому Р-450, глутатіону, еритропоезу та анемії у зростаючих особин. З глутатіонредуктази, лужної фосфатази й дельтаіншої сторони, запропонований принцип амінолевулінової кислоти, пошуком співвідношень формування груп досліджуваних тварин виключає показників активності адаптаційних систем, необхідність з’ясування вмісту кальцію в раціоні ферментативної ланки антиоксидантної системи однієї з груп для подвоєння його кількості в раціоні до загальної кількості кальцію, концентрації лужної іншої, що спрощує планування експериментальних фосфатази й дельта-амінолевулінової кислоти. і натурних досліджень, усуває потребу При цьому залучають 2 біологічні аналізати, застосування фізіологічно збалансованого наприклад, сечу та сироватку крові, безліч казеїнового раціону для паралельної групи тварин лабораторних реактивів і устаткування для і є фактом економічної переваги. дослідження концентрацій вищезазначених Застосування проб периферичної крові субстанцій, що варто взяти до уваги, без досліджуваних тварин як біологічного аналізату необхідності розрахунку собівартості одиниці істотно спрощує спосіб і покращує його продукції чи виконаних робіт. Натомість, перед економічність, оскільки зміна концентрації подвоєнням вмісту кальцію в раціоні тварин однієї еритроцитів і гемоглобіну в умовах свинцевої з груп, необхідно усвідомити кількість останнього в інтоксикації достовірно (р>0,05) корелює з раціоні тварин протилежної групи, що ускладнює резервом кальцію. Це відповідає спрощенню та планування як експериментальних, так і натурних поліпшенню економічності способу, адже оцінка досліджень, адже раціон ссавців приблизно захисної функції кальцію досягається без потреб у складається з продуктів, в котрих уміст кальцію є визначенні концентрацій цитохрому Р-450, не завжди відомим, а продуктах, які традиційно глутатіону, глутатіонредуктази, лужної фосфатази, багаті на кальцій, часто спостерігають істотну дельта-амінолевулінової кислоти та розрахунків, з нестачу останнього, як фактор його загального пошуком відповідей щодо активності адаптаційних дефіциту в організмі. корисної моделі поставлена В основу дійсної систем і ферментативної ланки антиоксидантної задача створити спосіб оцінки захисної функції системи. Спроможність концентрації еритроцитів і кальцію в умовах свинцевої інтоксикації, гемоглобіну периферичної крові відбивати застосування котрого дозволило б шляхом виснаження кальцію в організмі ґрунтується на залучення критеріїв, що корелюють з виснаженням чутливості до нестачі харчової кількості кальцію резерву кальцію в організмі, досягти спрощення і при його концентрації 1,0-1,5г на 100г добового поліпшити економічність. раціону. Відтворення способу у наданому обсязі Поставлена задача вирішується тим, що в встановлює позитивну чи негативну ефективність способі оцінки захисної функції кальцію в умовах захисної дії кальцію, також надає належну свинцевої інтоксикації, що включає формування відповідь про якість використовуваних груп досліджуваних тварин, їх годівлю з домішкою кальційутримуючих продуктів (при р>0,05), якщо до раціону порошку яєчної шкарлупи, на 10 добу після інтоксикації концентрація моделювання інтоксикації шляхом свинцевого еритроцитів і гемоглобіну в пробах периферичної запалу, після адаптації тварин до раціону, відбір крові зростаючих особин сягає 4,5×±0,6×1012 й біологічного аналізату, його дослідження та оцінку, 140,6±0,5г/л або у дорослих - 5,6±0,1×1012 й відповідно до корисної моделі, групи 5 31478 6 економічним, оскільки виключає дослідження 149,6±0,9г/л, відповідно, при запальній дозі будь-яких інших вихідних параметрів, необхідність свинцю 10мг/кг маси тіла тварин. Інформативність застосування додаткового лабораторного заявлених інтервалів концентрацій еритроцитів і обладнання й реактивів, аналізатів, різновидів гемоглобіну корелює з виснаженням резерву харчового раціону, що є очевидним без розрахунку кальцію в організмі, насамперед, з тим його собівартості одиниці продукції чи виконаних робіт. залишком, котрий не піддався вимиванню з кісток Експеримент. Для перевірки властивостей скелета тварин і підтримує рівень еритроцитів і дійсного способу використали 60 лабораторних гемоглобіну в периферичній крові за нормою. щурів різного віку, 30 з яких (молоді, зростаючі Натомість, відсутність захисної функції кількості щури) перебували у 1-й фазі онтогенезу, а 30 кальцію, внаслідок його вимивання з кісток інших (дорослі) - у ІІ-й фазі онтогенезу. скелета, у т.ч. й замала якість використовуваних Тварин розподіляли на 6 груп. До 1 й 2 з них кальційутримуючих продуктів характеризується включали зростаючих і дорослих щурів, істотним зниженням концентрації еритроцитів і відповідно, що одержували звичайний раціон. До 3 гемоглобіну в пробах периферичної крові як серед й 4 - зростаючих і дорослих щурів, відповідно, що зростаючих 3,1±0,3×1012 й 120,0±0,8г/л, так і вживали порошок яєчної шкарлупи, з розрахунку дорослих особин 2,6±0,2×1012 й 119,3±4,2г/л, по 1,0-1,5г на 100г добового раціону (корм з відповідно (р>0,05), при запальній дозі свинцю підвищеним вмістом кальцію). До 5 і 6 10мг/кг маси тіла тварин. зростаючих і дорослих щурів, відповідно, що були Таким чином, порівняння заявленого рішення інтактними, як контрольні. Надалі, після адаптації задачі з найближчим аналогом свідчить про те, що до раціону, тварин навантажували укуснокислим застосування концентрацій еритроцитів і свинцем, при його концентрації 10мг/кг маси тіла, гемоглобіну периферичної крові, котрі корелюють протягом 10 діб. Відбирали проби периферичної з виснаженням резерву кальцію в організмі серед крові, визначали концентрації еритроцитів і тварин різного віку, сприяє спрощенню та гемоглобіну. Додатково контролювали динаміку покращенню економічності. Важливими ланками кальцію, активність лужної фосфатази в сироватці експерименту є можливість встановлення якісних крові й токсичну кінетику свинцю, наприклад, по кондицій харчових продуктів, відомих на багате динаміці вмісту дельта-амінолевулінової кислоти в утримування кальцію, та оптимізації вмісту сечі. а рівні свинцевого запалу тварин (10мг/кг) Н кальцію в добовому раціоні різновікових ссавців виявляли спроможність показників еритроцитів і при потребі підвищення адаптаційної гемоглобіну периферичної крові відбивати спроможності в умовах підвищеного рівня позитивну захисну дію кальцію, в межах радіаційного фона чи накопичення важких металів 4,5±0,6×1012й 140,6±0,5г/л у зростаючих або на забруднених екологічних територіях. 5,6±0,1×1012 й 149,6±0,9г/л у дорослих тварин, Відомості, які підтверджують можливість відповідно. За контролем - 4,8±0,3×1012 й здійснення запропонованого способу з досягненням заявленого технічного результату 142,2±4,2г/л у зростаючих або 6,0±0,9×1012 й полягають в наступному. 154,4±3,3г/л у дорослих тварин, відповідно Для здійснення способу залучають стандартне (р>0,05). Відсутність захисної дії кальцію лабораторне обладнання для дослідження вмісту відповідала зниженню концентрації еритроцитів і еритроцитів і гемоглобіну в периферичній крові, гемоглобіну в в критеріальних межах: 3,1±0,3×1012 стандартні страви для годівлі лабораторних й 120,0±0,8г/л у зростаючих або 2,6±0,2×1012 й тварин, наприклад, щурів лінії Вістар і порошок 119,3±4,2г/л у дорослих тварин, відповідно. яєчної шкарлупи як кальційутримуючу харчову Як свідчить аналіз масиву даних дослідження, домішку. Перед початком експерименту формують що наданий у табл.1, свинцеве навантаження групи досліджуваних тварин, з числа їх дорослих щурів з 3 і 4 груп практично не впливало на та зростаючих особин. Під час годівлі, до кількість еритроцитів і вміст гемоглобіну у харчового раціону додають порошок яєчної периферичній крові, які залишалися в межах шкарлупи, а після адаптації до раціону тварин коливання контрольних значень, причому на всіх піддають інтоксикації шляхом свинцевого запалу у етапах дослідження спостерігали стабільний вміст дозі 10мг/кг маси тіла. На 10 добу інтоксикації у загального кальцію, дельта-амінолевулінової тварин відбирають проби периферичної крові й кислоти в сечі та активність лужної фосфотази в досліджують в них концентрації еритроцитів і сироватці крові. і 2 груп концентрації еритроцитів і У тварин 1 гемоглобіну. Якщо концентрація еритроцитів і гемоглобіну меншали. Серед молодих особин гемоглобіну в пробах досягає 4,5±0,6×1012 й анемія розвивалась інтенсивніше, триваліше 140,6±0,5г/л у зростаючих або 5,6±0,1×1012 й зберігалась після припинення запалу. До кінця 149,6±0,9г/л у дорослих особин, відповідно, то експерименту значення показників для тварин з визначають прийнятну захисну функцію кальцію. цих групах не відновлювалось. Виявляли ознаки Відсутність захисної дії кальцію визначають, коли дефіциту кальцію. Загальний рівень останнього в концентрація еритроцитів і гемоглобіну в пробах сироватці крові прогресивно знижувався до 10 доби, особливо у молодих особин, і становить 3,1±0,3×1012 й 120,0±0,8г/л у зростаючих супроводжувався підвищенням активності лужної або 2,6±0,2×1012 і 119,3±4,2г/л у дорослих тварин, фосфатази, збільшенням дельта-амінолевулінової відповідно. За цим принципом встановлюють і кислоти в сечі, що свідчило про вимивання якісні кондиції харчових продуктів, відомих на кальцію з костей скелету та накопичення свинцю в багате утримування кальцію. організмі. За цими даними дійшли висновку, що У порівнянні з найближчим аналогом застосування концентрації еритроцитів і запропоноване рішення задачі є більш простим і 7 31478 8 а його мінімальна травматичность допускає навіть гемоглобіну в пробах периферичної крові тварин профілактику дитячої анемії, що характеризується різного віку, як показників виснаження кальцію в дефіцитом як загального, так і депонованого організмі, є достовірним (р>0,05) і може бути кальцію, та можливих порушень кровотворної використане в експериментальній біо-, функції кісткового мозку. Ймовірно протекторна токсикології, сфері гігієни навколишнього функція харчового кальцію поширюється не лише середовища для оптимізації вмісту кальцію в на систему кровотворення, але й на оцінку функцій раціоні. інших органів і систем, особливо тих, котрі Застосування об’єкта дозволятиме реагують на навантаження важкими металами і оперативно знаходити оптимальний вміст кальцію відповідають за адаптацію організму під впливом в раціоні, необхідний, здебільше, для ефективного забруднення навколишнього середовища. захисту організму в умовах свинцевої інтоксикації, Таблиця 1 Вплив свинцевого навантаження на молодих щурів с різним вмістом кальцію в раціоні 1 Показники, од. вим. 1 3 Діб після запалу свинцем 10 групи тварин 1 3 30 (20) 1 Еритроцити: 4,8±0,6×1012 4,8±0,3 4,0±0,2 4,5±0,6** 2,6±0,2* 4,8±0,6** Гемоглобін: 142,0±4,2, г/л 142,2±6,2 138,6±3,6 140,6±0,5** 119,3±4,2* 142,4±3,1** Са в сироватці крові: 2,01±0,06, ммоль/л 2,00±0,06 1,65±0,21 1,99±0,10** 0,94±0,02* 2,03±0,07** Дельта-амінолевулінова кислота в сечі: 0,07±0,01** 0,26±0,02* 0,12±0,06*** 0,34±0,02* 0,06±0,02 ** 0,07±0,02ЕД/мол Лужна фосфотаза у сироватці крові: 185,4±8,6 201,5±5,4* 196,7±10,2** 326,4±32,8* 180,6±21,4** 180,5±6,8, МЕ/л Вплив свинцевого навантаження на дорослих щурів с різним вмістом кальцію в раціоні 2 4 2 4 2 Еритроцити: 6,0±0,9×1012 5,1±0,2 4,8±0,3 5,6±0,1** 3,2±00,3* 6,0±0,4** Гемоглобін: 154,4±3,3, г/л 54,8±2,3 151,3±1,01 149,6±0,9** 120,0±1,0* 156,2±12,1** Са в сироватці крові: 2,10±0,05, ммоль/л 2,10±0,05 2,09±0,04 2,02±0,06** 1,24±0,0,9* 2,12±0,04** Дельта-амінолевулінова кислота в сечі: 0,07±0,04** 0,29±0,01* 0,12±0,08** 0,42±0,04* 0,08±0,02** 0,07±0,02ЕД/мол Лужна фосфотаза у сироватці крові: 180,3±7,6 199,6±16,8* 186,5±19,1** 278,0±29,6* 185,4±18,6** 179,5±9,6, ME/л 3 3,1±0,3* 130,9±3,5* 1,05±0,09 0,19±0,06* 312,6± ±48,1* 4 4,2±0,2 125,1±1,3 1,64±0,02 0,10±0,05* 259,4± ±32,6* Примітки: у дужках - доби відновного періоду; * достовірні відмінності від вихідного показника; ** достовірні відмінності між групами. 1. Свинец. Гигиенические критерии состояния окружающей среды. - Женева: ВОЗ 1980. - 192с. 2. Суханов Б.П., Королев А.А., Марнинчик А.Н., Мерзлякова Н.М. Экспериментальное изучение протекторной роли кальция при свинцовой интоксикации// Гигиена и санитария. 1990. - № 12. - С.47-49. 3. Суханов Б.П., Королев А.А. Пробл. алиментарной адаптации в условиях ухудшающейся экологической обстановки// Объедин. конф. «Актуальные вопросы профилактической медицины»: Материалы. - Рига, 1991. - С.116-117. Комп’ютерна верстка А. Крижанівський 4. Deknudt G, Gerber G.B. Chromosomal aberrations in bone-marrow cells of mice given a normal or a calcium-deficient diet supplemented with various heavy metals// Mutat. Res. -1979. -V.68. -№ 2. -P. 163-168. 5. Королев А.А., Суханов Б.П. Влияние алиментарного кальция на уровень адаптации организма в условиях нагрузки цезием-137 и свинцом// Вопросы питання. - 1996. - №3. - С.3437. Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601