Спосіб генетичного маркерування ентеровірусів свиней у культурі клітин внк-21

Спосіб генетичного маркерування ентеровірусів свиней, а саме терморезистентності та стійкості до середовищ із різними значеннями рН, який відрізняє ться тим, що генетичне маркерування ентеровірусів свиней проводять у культурі клітин ВНК-21/сlоn13, яка є гетерологічною по відношенню до них. (19) (21) u200811493 (22) 24.09.2008 (24) 12.01.2009 (46) 12.01.2009, Бюл.№ 1, 2009 р. (72) РОМАНЕНКО ВОЛОДИ МИР ПИЛИПОВИЧ, UA, ДЕРКАЧ ІРИНА МИХАЙЛІВН А, UA (73) ІНСТИТУТ ВЕТЕРИНАРНОЇ МЕДИЦИНИ УКРАЇНСЬКОЇ АКАДЕМІЇ АГРАРНИХ НАУК, U A 3 38365 Паралельно у культурах клітин СНЕВ і BHK21/clon 13 вивчали терморезистентність референтних штамів ентеровірусів свиней. Згідно методики Wallis та Melnick, проби вірусів з 1М MgCl2 і без 1М MgCl2 прогрівали при температурі 56°С протягом 60хв. Дослідні проби охолоджували на льоду та титрували одночасно з контрольними непрогрітими пробами ентеровіру 4 сів. Інфекційну активність визначали методом десятикратних послідовних розведень. Титр вірусу обчислювали за методом L. Reed і Н. Muench. За різницею титрів проб вірусів прогрітих у присутності 1М MgCl2, без 1М MgCl2 і непрогрітих проб вірусів робили висновок щодо терморезистентності ентеровірусів свиней. Результати досліджень наведені у таблиці 1. Таблиця Термостійкість ентеров ірусів свиней у культурах клітин СНЕВ та ВНК-21 № п/п 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 Титр ентеров ірусів свиней, lg ТЦД 50/см 3 Серотип Культура клітин Непрогрітого (контПрогрітого без 1М Прогрітого в присутрольного) MgCl2 ності 1М MgCl2 СНЕВ 9,5±0,25 8,92±0,08 9,17±0,08 Тальфан 1 ВНК-21 8,42±0,08 6,09±0,08 8,17±0,08 СНЕВ 9,58±0,08 7,58±0,08 9,08±0,08 Т 80 2 ВНК-21 7,92±0,08 6,92±0,08 7,58±0,08 СНЕВ 9,08±0,08 6,42±0,08 8,92±0,08 F 34 3 ВНК-21 8,17±0,09 7,17±0,17 8,08±0,08 СНЕВ 8,59±0,08 7,42±0,08 8,42±0,08 F 78 4 ВНК-21 8,42±0,08 5,83±0,17 8,42±0,08 СНЕВ 8,08±0,08 6,58±0,08 7,42±0,08 F 12 5 ВНК-21 8,42±0,08 7,58±0,08 8,08±0,08 СНЕВ 9,0±0,15 8,42±0,17 8,92±0,08 F7 6 ВНК-21 7,92±0,08 7,08±0,08 8,08±0,08 СНЕВ 8,33±0,17 7,83±0,17 8,33±0,17 V-13 8 ВНК-21 4,92±0,08 3,92±0,08 5,08±0,08 "ПеречинськийСНЕВ 8,58±0,08 7,83±0,17 8,33±0,08 1 642" ВНК-21 8,42±0,08 7,08±0,17 8,08±0,08 "Березнянський СНЕВ 8,42±0,08 6,42±0,08 8,08±0,08 1 652" ВНК-21 8,67±0,17 5,33±0,17 8,17±0,17 СНЕВ 8,83±0,17 8,08±0,08 8,67±0,08 М 2323 10 ВНК-21 6,92±0,08 6,08±0,08 7,08±0,08 СНЕВ 8,33±0,17 7,5±0,29 8,42±0,08 К9 11 ВНК-21 8,08±0,08 7,08±0,08 7,42±0,08 СНЕВ 8,42±0,08 7,42±0,08 8,42±0,08 К 22 12 ВНК-21 8,42±0,08 7,92±0,08 8,42±0,08 СНЕВ 8,92±0,08 7,42±0,08 8,58±0,08 Л 90 13 ВНК-21 8,08±0,08 7,08±0,08 8,08±0,08 СНЕВ 8,58±0,08 7,58±0,08 8,58±0,08 М 116 14 ВНК-21 8,08±0,08 7,08±0,08 7,58±0,08 СНЕВ 8,42±0,08 7,08±0,08 8,42±0,08 Ч 73 15 ВНК-21 8,08±0,08 7,08±0,08 7,58±0,08 СНЕВ 9,42±0,08 8,42±0,08 8,92±0,08 Г 95 16 ВНК-21 6,92±0,08 6,08±0,08 6,92±0,08 СНЕВ 9,42±0,08 6,08±0,08 8,92±0,08 Б 111 17 ВНК-21 7,08±0,08 6,17±0,08 7,08±0,08 СНЕВ 8,92±0,08 6,08±0,08 8,92±0,08 Ч 184 18 ВНК-21 8,42±0,08 7,17±0,08 8,42±0,08 СНЕВ 8,92±0,22 8,08±0,08 8,58±0,08 Д 229 19 ВНК-21 7,08±0,08 6,42±0,08 6,92±0,08 СНЕВ 8,08±0,08 7,42±0,08 7,92±0,08 И 249 20 ВНК-21 7,42±0,08 6,42±0,08 7,08±0,08 СНЕВ 8,42±0,08 7,42±0,08 8,08±0,08 П 142 21 ВНК-21 6,92±0,08 5,42±0,08 6,08±0,08 СНЕВ 9,42±0,08 8,42±0,08 8,92±0,08 В 151 22 ВНК-21 8,08±0,08 7,08±0,08 7,58±0,08 СНЕВ 8,08±0,08 7,92±0,08 8,08±0,08 И 393 23 ВНК-21 7,08±0,08 5,92±0,08 6,42±0,08 Назв а штаму Примітка - М±m, n=3; Р