Спосіб виготовлення біостимулюючого засобу

Спосіб виготовлення біостимулюючого засобу з листів дуба, зібраних по закінченні фази вегетації, що включає екстракцію їх водою при критичних параметрах тиску і температури на лінії насичення, який відрізняється тим, що до початку екстра 3 39656 діючих речовин, що входять в нього під дією підвищених температур без попереднього розподілу на фракції, наприклад, при температурі екстракції вище 200°С руйнуються ефіри, вітаміни, органічні кислоти терпеноїди, альдегіди. Зруйновані фракції випадають в важкорозчинний осад і не засвоюються організмом, тим самим знижуючи ефективність дії фітопродукту. В основу корисної моделі поставлено задачу шляхом зміни параметрів екстракції і додаткових операцій забезпечити одержання засобу з більш високими біостимулюючим і радіопротекторним ефектами. Поставлена задача вирішується тим, що в способі виготовлення біостимулюючого засобу, з листів дуба, зібраних по закінченні фази вегетації шляхом екстракції їх водою при критичних параметрах тиску і температури на лінії насичення, згідно з корисною моделлю, до початку екстрагування із закритою кришкою герметичної посудини для екстрагування відкачують повітря, нагрівають до температури насичення першої фракції, після чого проводять охолодження розчину до температури конденсації першої фракції шляхом охолодження кришки проточною водою, відбирають першу фракцію і досушують насухо шляхом вакуумно-конденсаційної сушки при температурі конденсації, після відбору першої фракції процес повторюють відповідно підвищуючи температури насичення, конденсації і сушки для кожної наступної фракції. Критеріями розподілу продукту на окремі фракції, що входять в розчин є температури їх конденсації, наприклад, для одержання ефірів та вітамінів - не вище 60°С, для одержання глікозидів - не вище 100°С, для одержання альдегідів - не вище 150°С, для одержання терпеноїдів - не вище 200°С, для одержання фенолів - не вище, 250°С. При охолодженні посудини з боку кришки проходить інтенсивний тепло- та масоперенос, при цьому за рахунок активного перемішування концентрату в посудині при підвищеній ефективній теплопровідності розчину, що в сотні разів перевищує теплопровідність міді та срібла, а також більш швидкого випарування розчину і його конденсації у вигляді крапель на кришці, термодинамічний процес дозволяє підвищити концентрацію танінів, які є активними біостимуляторами. 4 Завдяки здійсненню зазначеного способу підвищується концентрація і збереження діючих речовин у го товому продукті, що є основними складовими біостимулюючого засобу. Спосіб виконують таким чином. До початку екстрагування із герметичної посудини для екстрагування відкачують повітря, листя дуба екстрагують водою при критичних параметрах тиску і температури на лінії насичення. Після закінчення циклу екстрагування розчин нагрівають до температури насичення першої фракції 5060°С, проводять охолодження розчину до температури конденсації не вище 60°С шляхом охолодження кришки проточною водою. На внутрішній поверхні кришки конденсуються пари потрібної нам першої фракції, наприклад, ефіри та вітаміни. Конденсат відводять і досушують насухо шляхом вакуумно-конденсаційної сушки при температурі від 50°С до 60°С. Після відбору першої фракції процес повторюють відповідно підвищуючи температури насичення, конденсації і сушки для кожної наступної фракції. Суть корисної моделі пояснюється наведеними нижче прикладами. Приклад 1 Порівняльні дослідження прототипу і запропонованої корисної моделі проводили шляхом вивчення їх хімічного складу, токсичності, біологічної активності. Хімічний склад біологічно активних ефірів, глікозидів, агліконів, вітамінів, фенолів визначали методами радіоізотопних досліджень в пробірці, які дозволяють визначити концентрацію біологічно активних речовин і отримати спектри поглинання хімічних елементів, що входять у склад екстракту. Біологічна активність фітозасобів визначалась шляхом дріжджового культивування на середовищі УЕРТ по швидкості колоноутворення мікроорганізмів під впливом різних концентрацій засобів, що тестуються. Кількість мікроорганізмів визначали нефелометричним методом. Токсикологічні дослідження проводились в лабораторно-експериментальних умовах. Результати досліджень приведені в таблицях 1, 2, 3, 4. Результати токсикологічних досліджень: гостра токсичність внутрішньом'язово - 0, хронічна токсичність внутрішлунково - 0, індекс місцевоподразнюючої дії - 0. Таблиця 1 Біостимулююча дія прототипу та засобу, що заявляється Назва досліду Контроль (дріжджі + середовище) Найближчий аналог 0,1% розчин 0,01% розчин Пропонує мий засіб 0,1% розчин 0,01% розчин Оптична густина (абс.од.) Сумарна Приріст Приріст клітинної маси, % 40 70 55 6 5 51,5 45 75 72 7 7 56,5 50 5 39656 6 Таблиця 2 Вплив засобу, який пропонується, на функціональну активність макрофагів Група тварин Контрольна Ті, що отримали фітозасіб Кількість тварин 12 14 Інтенсивність фагоцитозу 15,3±1,1 17,5±1,2 Інтенсивність НСТ-тесту 38,4±2,9 44,2±3 Таблиця 3 Вплив засобу, що пропонується, на клітинну імунну відповідь Група тварин Кількість тварин Контрольна Ті, що отримали фітозасіб Контроль сенсибілізації (розрізнювальна фаза антигену) 9 10 Різниця маси піддослідної і контрольної лап (мг) 24,6±5,2 17,2±2,9 8 11,7±3,1 Таблиця 4 Чутливість до імуномодуляторів у обстежених осіб Чутливість, % Найменування препарату Контроль 19,1±0,4 9,7±0,2 24,7±10,3 39,3±0,5 12,01±0,2 1,4±0,3 54,2±0,3 Хворі 2,8±0,7 2,1±0,1 26,7±0,7 41,2±0,8 14,1±0,1 0,7±0,03 68,7±0,8 58,4±0,3 Лаферон Декаріс Котячий кіготь Джерело Ехінацея пурпурна Вобензим За прототипом За корисною моделлю, що пропонується, 69,8±0,8 Вивчення імуномоделюючих властивостей засобу, що пропонується, проводилось відділом проблем інтерферону та імуномодуляторів Інституту мікробіології та вірусології НАНУ. Оцінюючи результати досліджень, можна засвідчити відсутність лімфотоксичної дії, збільшення інтенсивності гуморальних імунних реакцій організму у порівнянні з прототипом. Данні досліджень імуномоделюючий властивостей засобу, що пропонується, на піддослідній групі хворих онкологічними захворюваннями: саркома шлунка - 7чол., саркома легенів - 4чол., саркома простати - 2чол., саркома щитовидної залози - 1чол., фіброма матки - 2чол., саркома стравоходу - 1чол., саркома придатків матки - 2чол., показані в Таблиці 5. Таблиця 5 Найменування препарату Контроль (фіз.розчин) Фітор 50д Фітор 250д Засіб, що пропонується 50д ПФ ФК НСТ-тест 24ч. 48 52 69 72ч. 55 78 24ч. 3,4 4,0 7,5 72ч. 4,2 8,0 24ч. 52 60 82 72ч. 53 63 84 73 81 7,9 8,5 85 87 Отримані при дослідженні дані дозволяють рекомендувати запропонований засіб у якості лікувально-профілактичного засобу при запальнодистрофічних процесах, що супроводжуються алергічними реакціями, а також при застосуванні лікарських препаратів, що пригнічують імунну систему (цитостатики, антибіотики, сульфаніламіди, психотропні засоби та ін.). Приклад 2 У дослідах на самцях мишей лінії СВА (150шт.) вагою 18-25г досліджували імуномоделюючі властивості засобу, що пропонується, а також його протипухлинну дію. Ім уномоделюючі якості засобу оцінювали по його здатності впливати на інтенсивність розвитку реакцій гуморального та клітинного імунітету. Імунотропні якості засобу оцінювали по його здатності змінювати характер 7 39656 імунної реакції на тест-антиген для чого використовували еритроцити барана. Одночасно з визначенням інтенсивності імунних реакцій у тварин оцінювали стан лімфоїдних 8 органів (тимуса та селезінки) за показниками: вага органу, кількість лімфоїдних клітин та органний індекс. Результати досліджень наведені в таблицях 6, 7. Таблиця 6 Вплив запропонованого засобу на стан лімфоїдних органів Група тварин Інтактні оптимальна до- контроль отримавші заза антигену сіб Субоптимальна контроль отримавші задоза антигену сіб оптимальна до- контроль за антиген + ци- отримавші заклофосфан сіб Тимус Кількість лим- Органний інфоїдних клітин декс (10) 32,1±9,8 238±21 11,6±3,2 191±18 192±24 219±1,9 Селезінка Кількість лимфоїдних клітин (10) 149±21 197±2,5 Маса (мг) Органний індекс 721±99 965±73 8,2±0,9 128±19 236±9 232±14 1114±39 49±1,9 277±20 136±15 102±10 652±36 45,2±5,4 197±12 160±21 150±15 965±74 27,9±4,8 152±16 196±18 175±11 812±39 15,4±1,3 118±9 221±15 218±25 1102±64 Таблиця 7 Вплив запропонованого засобу на гуморальну імунну відповідь Група тварин інтактні контроль отримавші засіб субоптимальна контроль отримавші доза антигену засіб Оптимальна контроль доза антиген + отримавші циклофосфан засіб Оптимальна доза антигену Число РОК Число АОК Гемолітична активність Титри (на 196 спле- (на 106 сплеспленоцитів сироватки аглютинів гемоензимів ноцитів) ноцитів) 11±1 108±4 3,6±0,5 1,3±1 0,34±0,05 0,42±0,05 68±6 632±21 23±1,9 9,8±0,6 9,5±0,65 9,5±0,7 94±3 795±15 30,4±1,9 10,1±1 9,25±0,3 9,25±0,45 24±3 203±21 5,3±0,1 1,2±0,1 1,43±0,21 2,1±0,2 48±2 498±20 9,9±0,9 3,8±0,2 3,89±0,32 4,27±0,28 29±4 351±29 12,1 ±0,4 5,4±0,3 4,05±0,27 5,25±0,32 45±3 439±15 16,2±0,5 6,5±0,4 6,03±0,32 6,2±0,4 Аналіз результатів досліджень дозволяє зробити висновок щодо більш високих імуностимулюючих властивостей засобу по запропонованому Комп’ютерна в ерстка А. Рябко способу в порівнянні з прототипом. Інтенсивність реакції при введенні засобу збільшується в 2-2,5 разів. Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601