Спосіб визначення впливу яктону на жирнокислотний склад ліпідів при навантаженні та охолодженні

Спосіб визначення впливу яктону на жирнокислотний склад ліпідів при навантаженні та охоло 3 лотний склад ліпідів при навантаженні та охолодженні. Переваги цього способу: чутливість газорідинної хроматографії, висока інформативність, швидкість аналізу, зручність у використанні. Спосіб здійснюється наступним чином: Дослідження проводили на щурах лінії Вістер обох статей, масою 150-180 г, загальна кількість - 40 щурів, згідно з Методичними рекомендаціями ДФЦ МОЗ України (7). Швидкісне навантаження створювали за допомогою бігу щурів на тредбані при швидкості руху стрічки 42 м/хв і визначали при цьому тривалість бігу до цілковитого виснаження (7). Охолодження здійснювали в холодильній камері при -2-4°С протягом 3-х годин. Тваринам перед бігом та бігом з попереднім охолодженням протягом 5 днів внутрішньошлунково через зонд вводили яктон у вигляді суспензії дозою 375 мг/кг, що складає 1/10 від LD 50. Тварин декапітували під хлоридно-уретановим наркозом. Тварин поділили на 5 груп: 1. група - інтактні тварини (контроль) – п=8. 2. група - тварини після бігу на тредбані – п=8. 3. група - тварини після бігу на тредбані+ яктон – п=8. 4. група - тварини після охолодження + біг на тредбані – п=8. 5. група - тварини після охолодження + біг на тредбані + яктон – п=8. Для визначення жирнокислотного складу ліпідів тканини скелетних м'язів, печінки, серця гомогенізували у фізіологічному розчині, підготовку біологічного матеріалу і газохроматографічний аналіз ліпідів тканин проводили за існуючою методикою (8). У спектрі жирних кислот (ЖК) ліпідів ідентифікували 10 найбільш інформативних кислот - С 14:0 - міристинову, С 15:0 - пентодеканову, С 16:0 - пальмітинову, С 17:0 - маргаринову, С18:0-стеаринову - на сичені, С16:1 - пальмітоолеїнову, С18:1 - олеїнову, С18:2 - лінолеву, С18:ліноленову, С20:4 - арахідонову - ненасичені ЖК. Піки ЖК ідентифікували шляхом порівняння з часом утримання піків стандартних ЖК. Кількісну оцінку ЖК ліпідів тканин скелетних м'язів та серця щурів проводили методом нормування площин піків метильованих похідних ЖК і визначали їх склад у відсотках. Результати проведених досліджень узагальнені в таблицах 1-6. Дані щодо змін жирнокислотного складу ліпідів тканин експериментальних щурів після бігу на тредбані без та під впливом яктону наведені в таблиця 1, 2, 3. Було встановлено, що у тварин 2 групи в скелетних м'язах, печінці, міокарді понижувався вміст лінолевої кислоти, зростав рівень пальмі тинової кислоти. Спостерігалося збільшення кількості насичених жирних кислот в скелетних м'язах і міокарді. В міокарді також зменшується кількість ненасиченних жирних кислот і ПНЖК. Яктон при попередньому введенні мав протекторний вплив щодо вищезазначених коливаь показників жирноки слотного складу органів. При попередньому до бігу охолодженні жирнокислотний склад ліпідів в скелетних м'язах, печінці, 43083 4 серці ще більше порушувався. Так спостерігали збільшення вмісту пальмітинової, стеаринової кислоти. При цьому зменшувався вміст лінолевої та олеїнової кислот. Яктон в цих умовах проявляв протекторний вплив стосовно даних показників. Як видно з таблиці 4 значно змінюється кількість насичених і ненасичених а також рівень поліненасичених жирних кислот при бігу і охолодженні та на фоні попереднього впливу яктону. Отримані дані свідчать, що після бігу на тредбані і при сумісному впливу охолодження і бігу на тредбані найбільш виражені зміни жирнокислотного вмісту ліпідів спостерігаються в скелетному м'язі, що може пояснювати один з механізмів розвитку втомлення. Завдяки протекторному вливу яктону щодо жирнокислотного складу ліпідів забезпечується стабільність мембрани і регулюються вільнорадикальні процеси. Запобігаючи змінам ненасичених жирних кислот, яктон поліпшує синтез ейкозаноїдів,сприяє нормалізації складу фосфоліпідів мембрани, модулює інозитидний ліпідний цикл, сигнальну систему клітини, що веде до змін активності натрієвих та кальцієвих каналів і ферментів. Крім того,яктон може змінювати чутливість скелетних м'язів і міокарду до надмірних адренергічних стимулюючих впливів, які поступово призводять до втомлення. Таким чином, отримані експериментальні дані свідчать про протекторні властивості яктону щодо жирнокислотного складу ліпідів скелетних м'язів, міокарду, печінки і доцільність застосування препарату в період підготовки перед змаганнями. Після бігу на тредбані в скелетних м'язах, печінці, міокарді щурів спостерігається підвищення вмісту пальмітинової кислоти і пониження лінолевої. При попередньому охолодженніперед бігом на тредбані спостерігається також тенденція до підвищення рівня стеаринової кислоти і пониження рівня олеїнової кислоти в цих органах. Яктон при попередньому внутрішньошлунковому введенні протягом 5 днів запобігає змінам жирнокислотного складу ліпідів, які спостерігалися під час бігу на тредбані та на фоні охолодження (2 - -4°С), що підтверджує його застосування в спортивній медицині. Література: 1. Петрунь Л.М., Крисюн І.П., Михайлівський В.О. Особливості функціонування деяких ферментів про- та антиоксидантної дії у тканинах щурів за холодового стресу.//Мед. хімія.- 2004. -№ 3. -с.98100. 2. Рожкова Е.А., Орджоникидзе З.Г., Дружинин А.Е. и соавт. Карнозин и антиоксиданты природного происхождения как средство после острого нагрузочного окислительного стресса.//Эксперим. и клин. фармакология.- 2007. -т.170. №3. – с. 44-46. 3. Трофімова Т.С., Брюзгіна Т.С., Чекман І.С. та ін. Вплив тіотриазоліну на ліпідні показники печінки та серця щурів при токсичній дії доксорубіцину //Запорізький мед.журн. - 2005.- т.26.-№ 1.- с. 124-126 4. Вдовенко Н.В.,Горчакова Н.О. Коваль І.В.,Олійник С.А. Кардіопротектори в спортивній медичній практиці підготовки спортсменів високої 5 43083 кваліфікації.//Спортивна медицина. - 2007.- № 1. с. 100-107 5. Олійник С.А Антиоксидантний захист за умов опосередкованих окисним стресом патологічних станів організму. Автореф.дис.д-ра биол.наук. - К., 20043.-40с. 6. Мищенко О.А., Яковлева Л.В. Фармакологічний скрінінг актопротекторної активності нових засобів природного походження. //Медична хімія.2004.- № 4. - с.28-33 7. Доклинические исследования лекарственных средств. Методические рекомендации.//Под.ред.член-кор.АМН Украины А.В.Стефанов.- К.-Авиценна 2002. - 508 с. 8. Губський Ю.І., Яніцька Л.В.,Брюзгіна ТС. Жирнокислотний склад ліпідів головного мозку щурів при токсичному ураженні 1,2 дихлоретаном та введення нікотинаміду. //Сучасні проблеми токсікології.- 2005.-№1.с.19Результати експериментальної перевірки впливу яктону на жирнокислотний склад ліпідів при навантаженні та охолодженні 6 чінки щурів при бігу на тредбані (%) Назва Група 1 Група 2 Група 3 ЖК (п=8) (п=8) (п=8) С14:0 0,7±0,08 0,8±0,04 0,5±0,08 С15:0 0,3±0,04 0,4±0,03 0,3±0,03 С16:0 17,3±0,8 20,4±0,4* 16,7±0,9** С16:1 3,6±0,4 3,2±0,4 3,7±0,4 С17:0 0,4±0,03 0,5±0,04 0,3±0,06 С18:0 12,3±0,5 10,1±0,7 11,8±0,6 С18:1 6,1±0,3 9,2±0,2* 6,9±0,3 С18:2 6,8±0,3 5,5±0,4* 9,7±0,3** С18:3 0,5±0,02 0,7±0,05 0,6±0,03 С20:4 51,8±2,2 49,3±2,8 53,2±2,1 32,2±1,9 29,6±1,6 Суш нас. 31,0±1,8 ЖК Сума не- 68,8±2,2 67,9±2,9 70,4±2,1 нас. ЖК Сума 59,1±2,8 55,5±1,2* 63,5±1,3 ПНЖК Примітка: *) р< 0,05 у порівнянні з групою 1; **) р< 0,05 у порівнянні з групою 2 Таблиця 1 Вплив яктону на жирнокислотний склад ліпідів склелетних м'язівщурів при бігу на тредбані (%) Назва Група 1 Група 2 Група 3 (п=8) ЖК (п=8) (п=8) С14:0 0,8±0,06 0,9±0,07 0,7±0,05 С15:0 0,3±0,03 0,3±0,04 0,3±0,05 С16:0 15,1±0,8 18,5±0,5* 14,8±0,3** С17:0 0,4±0,04 0,4±0,03 0,4±0,05 С18:0 9,8±0,07 10,9±0,5 8,9±0,6 С18:1 10,8±1,2 14,0±1,1 10,0±1,4** С18:2 18,1±0,9 14,0±0,8* 18,4±1,0** С18:3 0,6±0,02 0,7±0,01 0,6±0,03 С20:4 44,2±1,2 40,2±0,9 45,8±0,6 Сума 26,4±1,9 31,0±1,2* 25,1±1,5** нас. ЖК Сума 73,6±2,5 69,0±2,8 74,9±1,2 ненас. ЖК Сума 62,9±1,8 54,9±1,2 64,8±1,5 ПНЖК Примітка: *) р< 0,05 у порівнянні з групою 1; **) р< 0,05 у порівнянні з групою 2 Таблиця 2 Вплив яктону на жирнокислотний склад ліпідів пе Таблиця 3 Вплив яктону на жирнокислотний склад ліпідів серця щурів при бігу на тредбані (%) Назва Група 1 Група 2 (п=8) Група 3 ЖК (п=8) (п=8) С14:0 0,6±0,06 0,9±0,07 0,4±0,03 С15:0 0,8±0,03 0,9±0,06 0,9±0,05 С16:0 12,4±0,8 15,0±0,4* 12,2*0,5** С16:1 1,0±0,05 0,9±0,06 0,8±0,05 С17:0 0,3±0,03 0,4±0,05 0,4±0,04 С18:0 10,6±0,9 11,6±0,6 12,3±0,7 С18:1 5,8±0,5 7,7±0,6 4,6±0,5 С18:2 15,2±0,2 12,1±0,5* 15,4±0,4** С18:3 2,3±0,2 1,9±0,3 2,0±0,2 С20:4 50,9±1,4 47,5±1,5* 51,0±1,8 Сума 24,7±1,1 28,8±1,3* 26,2±1,6 нас. ЖК Сума 75,2±1,4 71,2±1,5* 73,8±1,0** ненас. ЖК Сума 68,4±1,0 61,5±1,1* 68,4±1,3** ПНЖК Примітка: *) р< 0,05 у порівнянні з групою 1; **) р< 0,05 у порівнянні з групою 2 7 43083 Таблиця 4 Валив яктону на жирнокислотний склад ліпідів м’язів щурів при бігу і охолодженні (%) Група 1 Група 4 Группа Назва (п=8) (п=8) 5 (п=8) ЖК С14:0 1,3±0,3 1,6±007 1,4±0,5 С15:0 0,3±0,03 0,4±0,05 0,4±0,03 С16:0 17,2±0,3 21,6±0,1* 18,2±0,3** С16:1 3,0±0,5 2,4±0,7 3,2±0,8 С17:1 0,4±0,04 0,5±0,05 0,4±0,06 С18:0 12,4±0,6 14,3±0,9 12,2±0,3 С18:1 6,2±0,6 4,8±0,5* 6,5±0,6** С18:2 6,7±0,5 4,7±0,4* 6,5±0,6** С18:3 0,6±0,02 0,5±0,03 0,6±0,04 С20:4 51,8±1,2 49,2±1,4 50,6±1,4 Сума нас. 31,6±0,7 38,4±0,8* 32,6±1,0 ЖК Сума неи- 68,4±0,4 61,6±0,6* 67,4±0,7** ас. ЖК Сума 59,1±1,3 54,4±1,0* 57,7±1,1** ПНЖК Примітка: *) р< 0,05 у порівнянні з групою 1; **) р< 0,05 у порівнянні з групою 4 Таблиця 5 Валив яктону на жирнокислотний склад ліпідів печінки щурів при бігу і охолодженні (%) Назва ЖК С14:0 С15:0 С16:0 С16:1 С17:0 С18:0 Группа Група 1 Група 4 (п=8) (п=8) 5 (п=8) 0,7±0,08 0,5±0,03 0,4±0,02 0,3±0,04 0,4±0,03 0,3±0,02 17,3±0,8 20,9±1,2* 17,1±0,4** 3,6±0,4 3,5±0,2 3,7±0,3 0,4±0,03 0,4±0,02 0,3±0,01 12,3±0,5 13,7±0,3 12,1±0,4 Комп’ютерна верстка І.Скворцова 8 С18:1 6,1±0,3 5,6±0,2* 6,3±0,5** С18:2 6,8±0,3 5,3±0,3* 6,9±0,4** С18:3 0,5±0,02 0,4±0,01 0,5±0,02 С20:4 51,8±2,2 493±3,1 52,4±2,9 Сума нас. 31,0±1,8 35,9±2,0 30,2±2,8 ЖК Сума не- 68,8±2,2 64,1±2,3* 69,8±1,1** нас.ЖК Сума 59,1±2,8 55,0±2,0** 59,8±1,8** ПНЖК Примітка: *) р< 0,05 у порівнянні з групою 1; **) р< 0,05 у порівнянні з групою 4 Таблиця 6 Валив яктону на жирнокислотний склад ліпідів сердця щурів при бігу і охолодженні (%) Назва Група 1 Група 4 (п=8) Група 5 ЖК (п=8) (п=8) С14:0 0,4±0,04 0,5±0,05 0,6±0,03 С15:0 1,3±0,03 1,4±0,1 1,2±0,2 С16:0 12,8±1,2 16,4±1,1* 12,5±1,1** С16:1 0,6±0,02 1,7±0,03 0,6±0,03 С17:0 0,4±0,05 0,5±0,04 0,3±0,07 С18:0 12,1±0,7 13,7±0,8 12,0± 0,5 С18:1 4,2±0,3 3,4±0,2* 4,2±0,4** С18:2 18,1±1,2 13,7±1,1* 17,8±1,4** С18:3 1,1±0,2 1,0±0,3 1,3±0,4 С20:4 49,0±1,6 48,2±1,7 49,5±1,2 Сума 27,0±1,5 32,45±1,8 26,6±1,3 нас. ЖК Сума 73,0±2,2 67,5±3,3* 73,4±2,1** ненас. ЖК Сума 68,8±2,0 62,4±1,2* 68,6±2,0** ПНЖК Примітка: *) р< 0,05 у порівнянні з групою 1; **) р< 0,05 у порівнянні з групою 4 Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601